骨桥蛋白在子宫内膜异位症中介导细胞迁移与依赖核转录因子κB通路促进基质金属蛋白酶及尿激酶型纤溶酶原激活物表达中的作用研究

骨桥蛋白(OPN)是从骨细胞中提取出来的酸性糖蛋白,在细胞的黏附、侵袭、抗凋亡和促血管生成等方面具有重要作用,在胃癌、肝癌、卵巢癌及甲状腺癌中均呈高表达,但在正常人体中一般呈弱表达或不表达。子宫内膜异位症(EMs)在病理上虽为良性疾病,却有着类似于肿瘤的侵袭、种植及远处转移等生物学行为,且其治疗方案局限。因此,本文就OPN可能通过核转录因子κB(NF-κB)通路介导基质金属蛋白酶(MMPs)、尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)的表达来诱导EMs的发生和发展进行综述,并概述其生物学特点及各因子在EMs发病机制中的作用,旨在为EMs的靶向药物治疗提供一种新的思路。

NF-κB p65对子宫内膜异位症腺上皮细胞OPN、MMP-9表达及细胞侵袭性的影响

目的:探讨RNAi抑制核因子NF-κB p65对子宫内膜异位症(EMs)在位内膜腺上皮细胞中OPN、MMP-9表达及细胞侵袭性的影响。方法:采用NF-κB p65 siRNA基因沉默转染10例EMs患者在位内膜原代腺上皮细胞,由Western blot、Real-time PCR、Transwell等分别检测干扰前后OPN、NF-κB p65、MMP-9蛋白和mRNA表达及细胞侵袭性的变化。结果:与未干预组比较,NF-κB p65 siRNA干预后EMs腺上皮细胞中OPN蛋白及mRNA表达无明显变化,差异无统计学意义(P均>0.05);NF-κB p65、MMP-9蛋白及mRNA表达降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。NF-κB p65 siRNA干预后,EMs腺上皮细胞的细胞侵袭性明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:揭示NF-κB可能通过下调MMP-9的表达进而改变细胞侵袭性诱导EMs的发生。

核转录因子κB p65和骨桥蛋白在子宫内膜异位症中的表达及相关性研究

背景目前子宫内膜异位症(EMs)的病因和发病机制尚不清楚,治疗措施有限,严重影响女性的身心健康。目的探讨核转录因子κB(NF-κB)p65和骨桥蛋白(OPN)在EMs组织中的表达及二者的相关性。方法收集2013年1—12月于宁夏医科大学总医院妇产科因EMs行手术的患者35例(病例组),于术中或术后确诊,其中增生期17例,分泌期18例;收集同期行双侧输卵管结扎手术并经病理科诊断排除EMs的正常子宫内膜者30例作为对照(正常子宫内膜组),其中增生期15例,分泌期15例。分别采用免疫组化SP法、RT-PCR法检测正常子宫内膜组、EMs在位内膜组和EMs异位内膜组NF-κB p65、OPN及其mRNA的表达。结果 NF-κB p65、OPN主要表达于子宫内膜腺上皮细胞的胞质中,极少数表达于间质细胞中。EMs在位、异位内膜组NF-κB p65和OPN表达高于正常子宫内膜组,EMs异位内膜组高于EMs在位内膜组(P<0.05)。3组增生期及分泌期NF-κB p65的表达比较,差异无统计学意义(P>0.05),EMs在位、异位内膜组分泌期OPN的表达均高于增生期(P<0.05);EMs在位内膜组和EMs异位内膜组中NF-κB与OPN的表达均呈正相关(r在位=0.88,r异位=0.78,P<0.05)。NF-κB p65、OPN mRNA在EMs在位、异位内膜组中的表达高于正常子宫内膜组,EMs异位内膜组高于EMs在位内膜组(P<0.05)。结论 NF-κB p65、OPN及其mRNA在EMs患者在位、异位内膜组织的表达明显增强,并呈正相关,提示二者极有可能通过相互激活进而诱导EMs的发生、发展。

OPN干预子宫内膜异位症腺上皮细胞中NF-κBp65表达及其对细胞侵袭性的影响

目的探讨子宫内膜异位症(EMS)患者在位内膜腺上皮细胞中骨桥蛋白(OPN)对核因子κB(NF-κB)p65表达的影响及其与细胞侵袭的关系。方法原代分离培养12例EMS患者在位内膜原代腺上皮细胞。采用OPN siRNA干扰细胞24h后收集,Western blot、RT-PCR方法分别检测干预前、后细胞中OPN、NF-κBp65蛋白及其mRNA表达情况;Transwell试验检测干预前、后细胞侵袭性的变化。采用相同剂量的无RNA酶水干预EMS患者在位内膜腺上皮细胞作为未干预组。结果与干预前比较,OPN siRNA干扰后细胞中OPN蛋白、mRNA的表达明显下降(t1=7.92,t2=9.87,P<0.05);与未干预组比较差异无统计学意义(P>0.05);OPN siRNA干扰后细胞中NF-κBp65蛋白及mRNA的表达明显减弱(t1=-2.13,t2=-8.61,P<0.05),与未干预组比较差异无统计学意义(P>0.05)。OPN siRNA干扰后原代腺上皮细胞的侵袭性明显降低(t=2.38,P<0.05),与未干预组比较差异无统计学意义(P>0.05)。OPN、NF-κBp65在EMS患者在位内膜腺上皮细胞中的表达呈明显的正相关(r=0.87)。结论 OPN siRNA沉默EMS患者腺上皮细胞中的OPN后OPN、NF-κBp65的表达及细胞的侵袭性均明显降低,且二者呈明显正相关,揭示二者极有可能在异位细胞的侵袭中发挥同步协调作用。

尿激酶型纤溶酶原激活物在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的研究尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)在子宫内膜异位症(EMs)组织中的表达及意义。方法分别采用免疫组织化学SP法及RT-PCR法检测正常子宫内膜组织30例,EMs的在位内膜35例,EMs的异位内膜35例,uPA蛋白及mRNA的表达。结果 uPA蛋白主要定位于子宫内膜腺上皮细胞与间质细胞的细胞质中,极少数表达于血管内皮细胞中,在EMs异位内膜中的表达强于在位内膜、正常内膜,在EMs在位内膜中的表达强于正常内膜(P<0.05)。uPA蛋白在3组内膜的增生期与分泌期中的表达差异无统计学意义(P>0.05)。uPA mRNA在EMs患者异位内膜中的相对表达量高于在位内膜和正常内膜,在内异症在位内膜中的表达高于正常内膜(P<0.05)。结论 uPA可能在EMs异位内膜的黏附、生长等方面起一定作用。

避孕药在人工流产术后对宫腔粘连的预防效果及对子宫内膜厚度和性激素水平的影响

目的:探讨避孕药在人工流产术后对宫腔粘连的预防作用及对子宫内膜厚度和性激素水平的影响。方法:选取行人工流产术的患者320例为研究对象,随机分为对照组和研究组,各160例。对照组术后进行常规治疗,研究组在对照组基础上采用避孕药治疗。治疗结束后进行宫腔镜检查,观察宫腔粘连发生情况。治疗前后检测性激素[促黄体生成素(LH)、促卵泡生成素(FSH)及雌二醇(E_(2))]水平,检查子宫内膜厚度。比较两组术后月经复潮时间、复潮量减少发生率及≥42 d月经未来潮率。结果:人工流产术后宫腔镜检查发现,研究组宫腔粘连发生率低于对照组(P<0.001)。治疗前,两组子宫内膜厚度和LH、FSH、E_(2)水平比较差异无统计学意义(均P>0.05)。治疗后,研究组子宫内膜厚度大于对照组,LH、FSH、E_(2)水平高于对照组(均P<0.05)。研究组月经复潮时间短于对照组,其复潮量减少发生率、≥42 d月经未来潮率低于对照组(均P<0.05)。结论:人工流产术后采用避孕药治疗能有效预防宫腔粘连发生,改善水平子宫内膜厚度和性激素,促进月经恢复正常。

核转录因子-κB p65在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的探讨子宫内膜异位症(EMs)中核转录因子-κB p65(NF-кBp65)表达情况及其在内异症中的作用。方法收集行腹腔镜或开腹下子宫全切术于术中或术后经病理切片证实EMs患者30例作为病例组(分在位内膜组和异位内膜组);收集同年因子宫肌瘤经手术治疗并经病理切片排除EMs的正常子宫内膜30例作为对照组(正常子宫内膜组)。采用免疫组织化学SP法检测3组组织中NF-кB p65蛋白的表达,同时,选取病例组及对照组中各9例子宫内膜组织进行子宫内膜腺上皮细胞的原代分离培养,采用实时荧光定量PCR及western blot的实验方法,分别检测9例对照组及9例病例组的子宫内膜腺上皮细胞中NF-кB p65 mRNA及蛋白的表达情况。结果 EMs在位内膜组、异位内膜组NF-кB p65蛋白表达强于正常子宫内膜组,EMs异位内膜组高于EMs在位内膜组(P<0.05)。细胞中NF-кB p65 mRNA在EMs在位内膜腺上皮细胞中的表达明显高于对照组的正常内膜腺上皮细胞(P<0.05);细胞中NF-кB p65蛋白在EMs在位内膜腺上皮细胞中的表达明显高于对照组的正常内膜腺上皮细胞(P<0.05)。结论 NF-кBp 65在子宫内膜异位症患者的在位内膜、异位内膜中均高表达,提示其可能在EMs的病理形成中发挥重要作用。

uPA蛋白、mRNA在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的研究uPA(尿激酶型纤溶酶原激活物)蛋白、mRNA在子宫内膜异位症中的表达,并分析其在该病中发挥的作用。方法采用RT-PCR的试验方法检测u PA蛋白在对照组子宫内膜(来源于同期子宫肌瘤患者)、子宫内膜异位症患者在位、异位子宫内膜各35例中的表达情况,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)分别检测子宫内膜异位症患者及对照组患者血清各35例中u PA蛋白的表达。结果 u PA、mRNA在子宫内膜异位症患者异位子宫内膜中的表达高于在位子宫内膜,且其在两者中的表达均高于正常子宫内膜,差异均有统计学意义(P<0.05);u PA蛋白在子宫内膜异位症患者血清中的表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 u PA蛋白及mRNA水平在子宫内膜异位症患者子宫内膜中均高表达,其可能参与了子宫内膜异位症病理的形成。

核因子-κB p65和骨桥蛋白在子宫内膜癌组织与细胞中的表达及相关性研究

目的:探讨核因子-κB(NF-κB)p65和骨桥蛋白(OPN)在子宫内膜癌组织及细胞中的表达,并分析两者的相关性。方法:收集子宫内膜腺癌患者35例(子宫内膜腺癌组)、子宫内膜非典型增生患者35例(非典型增生内膜组)和正常子宫内膜患者35例(正常子宫内膜组),采用免疫组织化学法检测三组子宫内膜组织中NF-κB p65、OPN蛋白的表达。采用反转录PCR(RT-PCR)及Western blot检测正常内膜细胞及子宫内膜癌HEC-1-B细胞中两者蛋白及mRNA的相对表达水平。采用Pearson法分析NF-κB p65与OPN表达的相关性。结果:三组患者组NF-κB p65与OPN蛋白平均积分光密度(IOD)值比较差异有统计学意义(P<0.05)。子宫内膜腺癌组和非典型增生内膜组NF-κB p65与OPN蛋白IOD值高于正常子宫内膜组,且子宫内膜腺癌组高于非典型增生内膜组(均P<0.05)。Western blot和RT-PCR结果显示,NF-κB p65和OPN蛋白及mRNA在子宫内膜癌HEC-1-B细胞中的相对表达水平明显高于正常内膜细胞(均P<0.05)。Pearson相关性分析显示,子宫内膜腺癌组和非典型增生内膜组中,NF-κB p65和OPN蛋白表达呈正相关(r=0.78、0.88,均P<0.001),但在正常子宫内膜组中两者蛋白表达无相关性(P>0.05)。结论:NF-κB p65和OPN在子宫内膜癌组织及细胞中表达较高且呈正相关,有可能是形成该病的分子通路,为该病靶向治疗提供了理论依据及重要靶点。

骨桥蛋白基因沉默对子宫内膜异位症患者在位内膜细胞侵袭性的影响

目的:探讨骨桥蛋白(OPN)基因沉默对子宫内膜异位症(EMS)患者在位内膜细胞侵袭性的影响。方法:采用原代细胞培养方法培养EMS患者在位内膜腺上皮细胞,分为干预组和未干预组。干预组采用OPN特异小RNA(siRNA)进行基因沉默。采用Western blot、RT-PCR检测细胞中OPN蛋白、mRNA表达情况。采用穿膜实验观察细胞的侵袭性变化。结果:与未干预组比较,干预组细胞OPN蛋白及mRNA表达明显下降(均P<0.05)。与未干预组比较,干预组细胞穿膜数减少(P<0.05)。结论:对EMS患者在位内膜腺上皮细胞进行OPN基因沉默后,细胞OPN蛋白、mRNA表达降低,侵袭性明显减弱,说明OPN与细胞侵袭性明显相关。

新辅助化学治疗联合宫颈癌根治术治疗宫颈癌的临床疗效观察

目的 探讨对宫颈癌患者联合采用新辅助化学治疗(NACT)和宫颈癌根治术治疗的临床效果。方法 回顾性分析80例宫颈癌患者的临床资料,根据治疗方式的不同分为手术组(n=37)和联合组(n=43)。手术组单纯给予宫颈癌根治术治疗;联合组在实施宫颈癌根治术前给予NACT,比较两组治疗效果。结果 联合组治疗总有效率高于手术组(P<0.05);联合组脉管癌栓、深肌层浸润、阴道切缘转移和盆腔淋巴结转移发生率均低于手术组(P<0.05);两组治疗有效患者术后6个月的复发情况对比无明显差异(P>0.05);联合组术后12个月和18个月复发率均低于手术组(P<0.05)。结论 对宫颈癌患者联合采用NACT和宫颈癌根治术治疗降低术后复发率,改善术后病理结局,临床治疗效果显著。

NGF、MAPK及CREB在子宫内膜异位症中的表达及其与疼痛的关系

目的研究神经生长因子(NGF)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)及环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)在子宫内膜异位症(EMs)患者内膜组织中的表达及其与痛经的关系。方法回顾性选取就诊于榆林市星元医院并进行腹腔镜手术的35例伴有明显痛经症状的子宫内膜异位症患者作为研究组(在位内膜35例,异位内膜32例);非子宫内膜异位症且无明显痛经症状的患者35例作为对照组。分别采用免疫组织化学SP法、Western-blot、实时荧光定量PCR(Real Time-PCR)方法检测正常子宫内膜、EMs在位内膜组织、异位内膜组织中NGF、MAPK及CREB蛋白及mRNA的表达。结果 NGF、MAPK及CREB蛋白主要表达于子宫内膜腺上皮细胞的胞浆中,少数于间质细胞、血管内皮细胞中表达。NGF、MAPK及CREB于EMs在位内膜组、异位内膜组中的表达明显强于正常内膜组,且EMs异位内膜组中表达高于在位内膜组(P<0.05)。NGF、MAPK及CREB mRNA在EMs患者异位内膜组、在位内膜组中的相对表达量明显高于正常内膜组,且EMs异位内膜组中表达高于在位内膜组(P<0.05)。结论 NGF、MAPK及CREB可能诱导子宫内膜异位症疼痛的发病机制中发挥着重要的作用。

卵巢型内膜异位症患者围手术期卵巢储备功能评估及影响因素分析

目的通过检测卵巢型内膜异位症(内异症)患者围手术血清抗苗勒氏管激素(AMH)水平,评估患者的卵巢储备功能,并探讨影响卵巢型内异症患者卵巢储备功能的因素。方法选取有手术指征的卵巢型内异症患者60例为实验组,子宫肌瘤患者30例组为对照组。采用ELISA法分别检测上述患者术前、术后1个月、3个月、6个月血清中AMH含量的表达,评估卵巢型内异症患者卵巢储备功能,探讨卵巢型内异症患者的年龄、单双侧卵巢型内异症、临床分期、肿瘤大小及卵巢肿瘤手术对卵巢储备功能的影响。结果实验组和对照组患者术前血清中AMH的表达与年龄均呈负相关性(P<0.05);双侧卵巢型内膜异症患者血清中AMH表达明显低于单侧卵巢型内异症和对照组患者(P<0.05);Ⅰ~Ⅱ期卵巢型内异膜症血清中AMH的表达高于Ⅲ~Ⅳ期患者(P<0.05);卵巢型内膜异症直径>8 cm患者血清中AMH表达明显低于直径<8 cm者血清中AMH表达(P<0.05);卵巢型内膜异症患者行肿瘤剥除手术后1个月,AMH的表达低于术后3个月、6个月(P<0.05)。结论卵巢型内异症患者的卵巢储备功能与年龄、双侧卵巢是否受累、临床期别、肿瘤直径及卵巢肿瘤剥除手术有关;卵巢储备功能正常患者手术后短期内卵巢储备功能下降,但术后很快恢复。

卵巢良性肿瘤患者血清中AMH、INHB的表达及临床意义

目的检测卵巢良性肿瘤患者血清中抗苗勒管激素（AMH）及抑制素B（INHB）的表达,评估良性卵巢肿瘤患者的卵巢储备功能。方法选取卵巢良性肿瘤需行手术治疗的患者90例,其中卵巢子宫内膜异位囊肿组60例（观察组）,卵巢囊肿组30例（对照组）。90例患者按年龄段分成4组（25～岁组、31～岁组、36～岁组、41～45岁组）,采用ELISA法分别检测上述患者术前血清中AMH、INHB表达水平。结果卵巢良性肿瘤患者血清中AMH、INHB的表达与年龄呈负相关,差异有统计学意义（P〈0.05）;双侧卵巢子宫内膜异位囊肿患者血清中AMH及INHB的表低于单侧卵巢子宫内膜异位囊肿患者,差异无统计学意义（P〉0.05）。卵巢良性肿瘤患者血清中AMH和INHB呈明显正相关性（P〈0.05）。结论 AMH和INHB均与年龄密切相关,单一AMH和INHB变化均可预测不同年龄段、良性卵巢肿瘤患者卵巢的储备功能;良性卵巢肿瘤患者血清AMH和INHB表达呈正相关且与不同病理类型、双侧是否受累有关。

uPA在子宫内膜异位症患者在位内膜腺上皮细胞中的表达及其与侵袭性的关系

目的:探讨尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)在子宫内膜异位症(EMS)患者在位内膜腺上皮细胞中的表达和该因子与其侵袭性的关系。方法:通过原代细胞培养EMS患者和正常内膜各9例在位内膜腺上皮细胞并鉴定,分别经由Western blot和RT-PCR检测该因子的表达。通过侵袭小室验证uPA与腺上皮细胞侵袭性和迁移性的关系。结果:(1)uPA蛋白及mRNA在EMS患者在位内膜腺上皮细胞中的表达比正常内膜中明显增强,其差异具有统计学意义(均P<0.05);(2)EMS患者在位内膜腺上皮细胞的侵袭性较正常细胞明显增强,其差异具有统计学意义(均P<0.05)。结论 :uPA在EMS患者在位内膜腺上皮细胞中的表达明显增加,且与其侵袭性及迁移能力明显相关,揭示uPA与该病的发生密切相关。

卵巢良性肿瘤围手术期卵巢功能的检测与评价

女性卵巢储备功能下降(DOR)与卵泡数量的下降有密切的关系,是一系列复杂的生物学过程,某些卵巢良性肿瘤会在一定程度上影响卵巢功能[1].因此,在卵巢良性肿瘤围手术期正确的检测与评估卵巢的储备功能,并在术中进行积极的防范与干预,对预防卵巢早衰,提高卵巢良性肿瘤患者的预后及生活质量有着重要的意义. 1 外界因素指标 1.1 年龄:卵巢大小随年龄的不同而有差异,随着年龄的增长,其卵巢的储备功能也会出现逐渐下降的的趋势.研究表明,妊娠率和年龄有着密切的关系,20～30岁女性具有最佳的生育能力,年龄＞35岁女性将进入生殖的高风险期.

促性腺激素释放激素激动剂联合左炔诺孕酮宫内节育系统治疗子宫腺肌症的临床效果

目的分析促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-α)联合左炔诺孕酮宫内节育系统治疗子宫腺肌症的临床效果。方法选取2019年1月至2020年6月我院接诊的122例子宫腺肌症患者为研究对象,按照随机数字表法将其分为对照组(n=61)和观察组(n=61)。对照组采用左炔诺孕酮宫内节育系统治疗,观察组在对照组的基础上联合GnRH-α治疗。比较两组的临床效果。结果治疗3个月后,两组的子宫体积、子宫内膜厚度均小于治疗前,且观察组小于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组月经过多、痛经、贫血改善率高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组不良反应总发生率低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗3个月后,两组患者的卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)水平均低于治疗前,雌二醇(E2)水平均高于治疗前,且观察组优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗3个月后,两组的癌胚抗原125(CAl25)、神经生长因子(NGF)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平均低于治疗前,且观察组低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论GnRH-α联合左炔诺孕酮宫内节育系统治疗子宫腺肌症可有效改善患者的临床症状,降低不良反应发生率,改善卵巢功能。