绿色木霉C-08产纤维素酶的固态发酵条件优化

以稻草粉与麦麸为主料,对影响绿色木霉（Trichoderma viride）C-08固态发酵生产纤维素酶、半纤维素酶的营养因素和环境条件进行了研究。结果表明：秸秆粉和麸皮为2∶4最适合产酶;铵态氮适合C-08产CMCase,NO3-利于产Xylanase,其中NH4NO3最好;料水比1∶2,适合C-08产CMCase,1∶2.5适合产Xylanase;稻草粉粒度40~100目时,适合C-08产CMCase,此范围外适合产Xylanase;pH值为4时,适合C-08产酶;孢子接种量为7.5×107孢子.mL-1时,适合C-08产酶;低于28℃时适合C-08产酶;最适发酵时间为72h。该菌株在以上条件下产酶效果较好,为实际应用奠定了基础。

纤维素降解菌绿色木霉C-08产酶条件研究

为了确定绿色木霉C-08菌株的最佳产酶条件,对从土壤中筛选到一株具有较高纤维素酶活性的绿色木霉的液态发酵条件进行了优化,结果表明,麸皮和稻草作为最佳碳源可较大幅度地提高纤维素酶的产量,C-08的最佳麸皮和稻草质量比为5∶2.C-08株菌的最佳无机、有机氮源为(NH4)2SO4和豆饼粉,最佳无机、有机氮源比为1∶5.最适宜的碳氮比为5∶1,质量分数为3.6%.产酶的最适宜温度为30℃,最佳产酶pH为3.2,最佳产酶时间为96h.

纤维素降解菌简青霉H-11的筛选及酶学特性的研究

在环境破坏较少的野生森林土样中,通过刚果红平板、滤纸条液体培养等初筛,并在摇瓶发酵复筛的基础上得到一株高效纤维素降解菌,通过最适酶活、最适温度及其稳定性的测定。试验结果表明：CMCase的最适pH为2.8,最适温度是50℃,在30-50℃温度范围内温度稳定性较强。FPase的最适pH为4.8,最适温度是60℃,30-40℃温度范围内稳定性较强。

纤维素降解菌绿色木霉C-08的筛选及酶学特性研究

在环境破坏较少的野生森林土样中,通过刚果红平板、滤纸条液体培养等初筛,并在摇瓶发酵复筛的基础上得到1株高效纤维素降解菌绿色木霉C-08,同时对其最适酶活、最适温度及其稳定性进行了测定。结果表明:CMCase的最适pH值为3.6,最适温度是60℃,在30-50℃稳定性较强;FPase的最适pH值为4.8,最适温度是50℃,在30-40℃稳定性较强。

简青霉H-11产纤维素酶条件的研究

通过对筛选得到的简青霉(Penicillium simplicissimum)H-11菌株进行发酵条件优化,得出以下结论:麸皮和稻草作为最佳碳源可较大幅度地提高纤维素酶的产量,简青霉H-11的较佳麸皮:稻草比为4:3。简青霉H-11株菌的最佳无机、有机氮源为KNO_3和豆饼粉,最佳无机、有机氮源比为0:6。确定了最佳碳氮源后,进行了碳氮源比例和含量的确定,结果为:碳氮比为7:1,含量为3.6%,产酶的最佳温度为30℃。简青霉H-11的最适宜产酶pH为3.6,最佳产酶时间为144h。

花生根系分泌物对土壤微生物学特性及群落功能多样性的影响

为研究花生根系分泌物对根际微生物群落功能多样性的影响,通过向土壤中添加花生根系分泌物溶液的方法,研究了不同浓度的外源花生根系分泌物对土壤微生物量碳(MBC)、微生物商(q MB)、基础呼吸(BRC)和代谢商(q CO2)的影响,并利用Biolog技术研究了土壤微生物群落功能多样性的变化。结果表明:施入不同浓度花生根系分泌物后土壤MBC和BRC呈现显著性差异,其中,BRC随浓度升高而呈上升趋势,当施入高浓度根系分泌物时达到最大值,较CK提高21.15%;MBC的变化趋势为:高浓度>中浓度>CK>低浓度,其中高浓度处理比CK提高11.55%,低浓度处理较CK降低2.16%。只有在高浓度根系分泌物处理下,q MB才出现显著差异,较CK提高11.63%。施入高浓度根系分泌物土壤的平均吸光值(AWCD),Shannon和Mcintosh指数均高于CK及其他两个处理,分别较CK提高21.53%、5.64%和8.82%,并达到显著差异水平。主成分分析结果表明:不同处理土壤微生物碳源利用特征出现分异,中浓度根系分泌物处理与CK土壤微生物群落代谢特征相近,其明显不同于高浓度根系分泌物处理的土壤,说明它们对单一碳源的利用能力不同,其群落代谢特征存在差异,其中对碳源的利用差异主要表现在6种碳源上,分别为L-天冬酰胺、D-甘露醇、α-环式糊精、D-氨基葡萄糖酸、D-纤维二塘和α-D-乳糖。高浓度的根系分泌物能够明显改变土壤微生物学特性及群落功能多样性。

连作胁迫对花生叶片防御酶活性及丙二醛含量的影响

以花生品种"阜花12"为供试材料,选取正茬和连作3年2个处理,分析了花生在连作条件下防御酶系活性以及膜脂过氧化产物含量的变化规律。结果表明:花生连作后,叶片的SOD活性和MDA含量在整个生育期内均高于正茬;叶片的PPO和POD活性在整个生育期内总体上呈现升高趋势,但在苗期时连作3年的酶活性小于正茬的花生处理;叶片的CAT活性在整个生育期内总体上呈现下降趋势,仅在成熟期时连作3年的酶活性大于正茬;叶片的PAL活性在整个生育期内变化规律不一致,苗期和花针期时,连作3年的酶活性大于正茬,结荚期和成熟期时,连作3年的酶活性小于正茬。连作改变了花生叶片防御酶活性和MDA含量。

放线菌H50发酵液抑菌活性及其稳定性测定

将沈阳农业大学微生物研究室分离的1株放线菌H50[链霉菌属(Streptomyces)]分别以植物病原菌真菌12株、细菌3株为供试菌,采用菌丝生长速率法和管碟法测定H50发酵液的抑菌活性以及发酵液的稳定性。发酵液的抑菌活性测定结果表明:H50发酵液对12株供试病原真菌均具有不同程度抑制作用,对其中6种病原真菌菌丝生长抑制率达50%以上,对油菜菌核病菌和黄瓜灰霉病菌的抑制率分别为98.3%和94.9%;H50发酵液对3种供试病原细菌中的枯草芽孢杆菌的抑制作用最强,抑菌圈直径为12.3mm。发酵液的稳定性检测结果表明:发酵液在80℃处理后抑菌活性开始下降,发酵液在pH值4.0～8.0条件下抑菌活性稳定,可见该菌株的代谢产物具有广谱抑菌活性和较强的热、酸、紫外光稳定性,具有潜在的开发价值。

复合包埋菌剂对大豆生长及土壤肥力的影响

将大豆根瘤菌R12、解磷菌S7、解钾菌C1制作复合菌剂,并进行包埋和草炭吸附处理。以大豆作为试验作物,在大豆鼓粒期和成熟期对大豆的生长与土壤肥力相关指标进行测定。结果表明:包埋菌剂与对照相比,植物株高、干重、根瘤数和百粒重分别增加16.64%、79.41%、40.83%和18.59%。对土壤根际微生物数量测定表明:包埋菌剂与对照相比,鼓粒期细菌、真菌、放线菌分别增加68.81%、196.15%和21.05%,成熟期分别增加59.31%、145.45%和20.00%。包埋菌剂与空白对照相比鼓粒期植物氮磷钾含量分别增加71.02%、50.00%和32.61%,成熟期分别增加67.63%、41.66%和22.40%。对土壤碱解氮、速效磷、速效钾含量测定的结果表明:鼓粒期包埋菌剂与对照组相比碱解氮、速效磷、速效钾分别增加5.35%、41.70%和13.43%,成熟期分别增加4.19%、42.67%和21.28%。比较不同剂型菌剂的效果,包埋菌剂要优于草炭菌剂。

PEG介导细胞融合最适条件的探讨

以鸡红细胞、兔红细胞、蟾蜍红细胞作为同源与异源研究的试验材料,聚乙二醇作为促融剂,从聚乙二醇不同浓度、融合温度、融合时间三个方面进行单因素探究,以期找到融合率最高的条件。结果表明,蟾蜍同源红细胞融合组的最适条件为聚乙二醇500mL/L、37℃、10min,其余组最适条件皆为聚乙二醇500mL/L、37℃、15min,且通过对数据的分析发现,融合温度与融合时间对细胞融合率的影响远小于聚乙二醇浓度的影响。此外,由于球形的兔红细胞在运动时所受到的阻力明显小于椭球形的鸡红细胞和蟾蜍红细胞,使得兔同源红细胞的融合率及与兔红细胞融合的异源红细胞的融合率比其他组都高,其中兔同源红细胞最高融合率达到39.3%,而蟾蜍红细胞由于体型远大于其余两类红细胞,其融合率也相应较大。

实时定量PCR检测技术研究进展

传统定量PCR检测方法如内参照法和竞争PCR法,因为在达到平台期后才能对其进行检测,由于PCR扩增已经过了对数期,其检测重复性相对较差。而实时荧光定量PCR技术可直接监测PCR过程中荧光信号的变化,以获得目的区段扩增产物定量的结果,直接可以进行定性分析和定量分析,操作简便无污染。本文通过对实时荧光定量PCR检测技术的原理、分类、方法和应用4个方面阐述实时定量PCR检测技术研究进展。

甜菜乙醇发酵条件的研究

以甜菜为原料,利用酿酒酵母对经过预处理后得到的汁液进行酒精发酵试验。通过单因子试验和正交试验,探讨最优发酵条件。试验结果显示的最佳发酵条件:初始糖浓度为10.4%,营养盐添加量分别为K2HPO40.2%,NH4Cl0.2%,MgSO40.01%,种龄24h,接种量15%,初始pH值为5,温度为32℃,摇床转速为175r/min。

环境微生物学精品课程建设探索与实践

精品课建设是高等学校教学一项重要工程,师资队伍建设、课程体系和课程内容改革、教学方法和教学手段建设、实践内容建设是环境微生物学精品课建设四个主要方面。环境微生物学精品课程建设,必须打造高水平教学队伍,使其知识结构、年龄结构和师资配置合理化;立足农业院校,加大课程教学体系和课程内容的改革,传统教学手段与多媒体教学手段相结合,采用案例教学法,注重教学理论联系实际,采用问题式教学,加强综合性和设计性思考题的训练,积极开展网络教学,促进师生交流与教学互动,鼓励多种教学法和教学手段的灵活运用和尝试,不断创新多种教学方法。高度重视实践教学,培养创新型专业人才,加强实践教学改革,完善实践教学体系,大力搞好实验室与教学实习基地的建设。

RTK与全站仪在城镇地籍调查中的联合应用

在巴彦托海镇第二次土地调查过程中,根据国家二调规范和测区设计方案,采用GPS与全站仪联合测图方法,应用南方CASS软件成图,并对采集的数据进行检核,实践证明该方法可以快速准确的获得界址点、地物点的定位信息,满足国家二调中对于界址点的精度要求。

优化教学方法 提高细胞生物学教学质量

细胞生物学是高等院校生物类专业的重要专业基础课程,要使学生掌握好这门课,教学方法运用是否恰当是成功的关键。本文探讨了通过更新教学理念、优化教学方法,培养学生创新意识,不断提高细胞生物学教学质量,达到理想的教学效果。

利用农业废弃物对青霉菌进行固态发酵生产纤维素酶

筛选出1株产纤维素酶菌株并进行鉴定,为微生物肥料生产筛选菌种资源。采用刚果红染色、综纤维素、滤纸、微晶纤维素培养基等方法,从土壤中分离出1株产纤维素酶菌株ZH1,经形态学分析、18S r DNA分子进化树分析,鉴定菌株为赭绿青霉(Penicillium ochrochloron);采用单因素试验对产纤维素酶的青霉菌菌株进行固体发酵条件优化。结果表明,当温度为30℃、发酵液初始p H值为4、料水体积比为1.0∶3.0、接种量为0.5 m L及氮源为花生饼粉时,滤纸酶(FPase)在发酵3 d时有最大的产酶活性;通过优化试验,赭绿青霉达到了较高的产纤维素酶能力,为纤维素酶进一步工业化生产奠定了一定的基础。

辽宁省慢生根瘤菌的系统发育多样性

花生是重要的豆科经济作物,能与慢生根瘤菌属的根瘤菌共生固氮,辽宁省的花生种植较广泛,但是对该地区花生根瘤菌的研究并不全面。采用16S r DNA和nif H基因的序列分析方法从遗传学角度对17株分离自辽宁省不同地区的花生根瘤菌的特性进行研究。根据16S r DNA基因的序列分析将所有菌株分为4个类群,而nif H基因的序列分析方法将供试菌株分成两大类群,2种方法的分类结果大体一致,测序结果表明所有菌株都属于慢生根瘤菌属。说明辽宁省花生慢生根瘤菌的分布可能与该地的地理环境存在一定的相关性。

局域定位系统拟应用于工程测量系统自定位法

提出了一种系统自定位方法.该方法采用控制点坐标进行约束,按照非线性最小二乘的Levenberg-Marquardt算法求解系统自定位参数.以双发射站为例,给出了新的系统自定位参数的解算模型.通过试验证明此方法是可行的,解算模型是正确有效的,其系统自定位精度完全能够满足工程测量的要求.

基于wMPS测量刚性结构振动频率的可行性研究

工作空间定位系统(wMPS)是一种基于光电扫描的新型网络式大尺寸三维坐标测量系统,具有精度高、动态性好、并行测量的优势,是针对工业测量中大尺度结构开发的仪器。针对全球卫星导航系统(GNSS)、自动全站仪(RTS)等大地测量设备无法完全满足人形天桥等小型刚性结构的固有参数测量的问题,把wMPS引入结构健康监测领域中。采用逆向工程法建立试验台模拟结构振动频率,应用快速傅里叶变换(FFT)分析随时间序列变化获取的位移数据来确定wMPS测量结构固有参数的可行性及其测量范围,并采用GNSS-RTK进行对比试验分析。试验结果表明,wMPS能识别结构固有参数,当位移幅值大于3 mm小于30 mm时可以识别到4 Hz的频率,为相对刚性结构健康监测提供了新的参考途径。