牛fabp3和fabp4基因真核表达载体的构建及在小鼠成肌细胞中的表达

【目的】分别构建牛fabp3和fabp4基因真核表达载体,并观察载体转染小鼠成肌细胞后基因的表达以及对内源fabp3和fabp4基因表达的影响,检测肉质性状形成相关基因在转基因细胞中的表达及对内源功能基因的影响。【方法】以pDsRED质粒为骨架载体,分别将人肌红蛋白启动子与目的基因相连、CMV启动子与红色荧光蛋白报告基因相连构建肌肉特异性表达fabp3基因的载体pDsHF3和表达fabp4基因的载体pDsHF4;用脂质体瞬时转染小鼠成肌细胞,72 h后用2%孕马血清诱导成肌细胞向肌管的分化;利用real-time PCR技术检测转染前后成肌细胞中外源牛fabp3和fabp4基因和内源小鼠fabp3和fabp4基因的表达量。【结果】与对照组相比,小鼠成肌细胞分别转染pDsHF3和pDsHF4表达载体,24 h后外源牛fabp3和fabp4基因均获得高水平的表达,48 h后有所回落;而内源小鼠fabp3和fabp4基因在成肌细胞和诱导分化的肌管细胞中的表达均受到不同程度的影响。【结论】构建的真核表达载体能在成肌细胞中高效表达,外源牛fabp3或fabp4基因的转入能够影响小鼠成肌细胞及肌管中内源fabp3和fabp4基因的表达。

密度梯度离心法对辅助生殖患者精子DFI的改善作用及精子DFI与AIH妊娠率的相关性研究

目的分析密度梯度离心法对行夫精人工授精(AIH)患者精子DNA碎片率(DFI)的改善作用,以及精子DFI与AIH妊娠率的相关性。方法选取2019年9月至2021年10月在内蒙古自治区妇幼保健院实施AIH治疗患者的320个周期作为研究对象,采用流式细胞法获得密度梯度离心法优选前后的精子DFI,并进行统计学分析。结果AIH周期患者精子DFI异常(≥15%)率为25.94%;精子优选处理后DFI得到了显著改善(P<0.01),经密度梯度离心法处理后DFI≥15%的精液标本占比从25.94%下降到了9.07%,经随访95.24%的妊娠个案来自优选处理后精子DFI<15%的分组。结论密度梯度离心法对精子的DFI有显著改善作用;AIH周期的男性患者处理前精子DFI与该周期妊娠率无显著相关性;优选处理后较低精子DFI对应较高的妊娠率,优选处理后的精子DFI对患者的妊娠结局更有预测价值。

胎盘嵌合对无创产前筛查假阳性影响

目的探讨胎盘嵌合对无创产前筛查(NIPS)假阳性的影响。方法2018年—2020年NIPS检测结果高风险、在本院行介入性产前诊断、引产或生产后追踪到胎盘组织的样本35例。通过荧光原位杂交(FISH)、染色体微阵列分析(CMA)或基因组拷贝数变异测序(CNV-seq)技术对35例NIPS高风险病例的胎盘组织进行检测,并结合临床资料分析胎盘嵌合对NIPS假阳性的影响。结果35例NIPS高风险病例,与胎盘检测结果的一致率(82.9%)高于与产前诊断结果的一致率(71.4%)。35例样本中10例为NIPS假阳性,胎盘检测后6例为限制性胎盘嵌合(CPM),其中5例孕期胎儿发育未见异常,1例产前诊断结果异常,胎儿生长受限;其余4例胎盘结果正常,其中1例母亲孕期罹患胰腺尾部肿瘤,1例母亲性染色体单体嵌合。结论胎儿与胎盘染色体一致性较高,NIPS技术对于评估胎儿染色体情况具有重要意义,但CPM是引起NIPS假阳性的主要原因,NIPS不能替代产前诊断。