羊舍气载真菌的浓度及分布特征

采用6级Andersen空气生物采样器,以孟加拉红培养基为培养介质,测定并分析羊舍气载真菌浓度、分布特征及与环境的关系,以期为羊舍的环境控制提供依据。结果表明,羊舍内真菌气溶胶浓度为2 855(±1 806)~3 698(±3 087)CFU/m3;9∶00左右浓度最低,显著低于13∶00和17∶00(P<0.05);真菌粒子主要分布在采样器第3~5级,粒径<5μm的真菌粒子约占80%,可侵入肺泡;与环境因素的相关性分析表明,空气真菌含量与环境因素有显著的线性关系,与温度呈正相关,与相对湿度呈负相关。

奶牛场环境中气载金黄色葡萄球菌的耐药性分析与散播试验

为了解奶牛养殖场内、外环境中金黄色葡萄球菌的耐药情况和散播特点,以5%绵羊血琼脂平板为采样基质,应用Andersen 6级空气生物采样器采集奶牛场内、外环境空气及牛场内粪土样本,经细菌分离、纯化和16S rRNA保守序列分析鉴定金黄色葡萄球菌,并进行了菌株耐药性和ERIC-PCR亲缘性分析。结果:从奶牛场内、外环境和牛场粪土中分离鉴定出51株金黄色葡萄球菌。药敏试验发现,分离菌株表现出不同程度的耐药性和多重耐药性,其中青霉素P-G的耐药情况最为严重,耐药率为100%,多重耐药主要表现为2耐、3耐、4耐;对不同来源金黄色葡萄球菌进行亲缘性分析,结果显示,牛舍内空气中90.5%(19/21)、牛场外空气中50%(7/14)的金黄色葡萄球菌与粪土中的金黄色葡萄球菌遗传相似系数≥90%,表明粪土中的金黄色葡萄球菌可形成微生物气溶胶,向养殖场周围环境散播。

不同结构羊舍空气可培养真菌ERIC-PCR指纹图谱分析

为了解圈舍空气真菌菌群结构,为羊舍选择及环境控制提供依据,应用AGI-30液体空气采样器,以超纯水为采样基质,采集地面平养和高床平养2种结构羊舍的气载真菌,经马铃薯葡萄糖肉汤富集培养后提取DNA,进行ERIC-PCR指纹图谱分析。结果显示:2种结构羊舍的气载真菌菌群结构存在差异,但有一些相同的优势菌群;高床平养羊舍的多样性指数高于地面羊舍,但优势度指数偏低;相似性聚类分析显示,相同结构羊舍同一季节气载真菌菌群结构相对稳定,不同季节之间真菌菌群结构变化较大。结果表明,羊舍内气载真菌菌群结构变化较大,且受羊舍结构和季节的影响。

牛羊场环境气载葡萄球菌浓度及气溶胶粒谱特征分析

以5%绵羊血琼脂平板为采样基质,应用Andersen-6级空气微生物采样器,分别于春季、夏季、秋季和冬季采集牛场、羊场、牛运动场及养殖场外环境空气中的葡萄球菌,并分析葡萄球菌气溶胶的空气动力学特性,为反刍动物养殖场的环境控制提供依据。结果显示,牛、羊场环境气载葡萄球菌浓度随季节变化波动较大,夏、冬两季较高,春季最低;牛、羊场环境气载葡萄球菌浓度在养殖场下风向均随与场区距离增大而逐渐减小,下风向100 m处浓度均高于上风向10 m处。牛场和羊场环境葡萄球菌气溶胶颗粒在采样器Ⅲ~Ⅵ级占比为53.33%~84.73%,牛场葡萄球菌气溶胶颗粒的峰值分布在采样器第Ⅳ级,羊场峰值分布在采样器第Ⅰ级;羊场及外环境葡萄球菌气溶胶粒子中值直径(CMD)大于牛场,细菌粒径分布的离散度(GSD)值小于牛场。

晋北 晋中 晋南地区冬季舍饲羊场真菌气溶胶差异分析

应用Andersen 6级空气生物采样器和AGI-30液体采样器于冬季分别采集晋北、晋中、晋南3个地区的9栋半封闭式羊舍内、外环境的空气样本,测定并分析气载真菌浓度、组成和粒径分布差异,鉴定优势菌属,并应用ERIC-PCR技术对羊场空气、饲料、粪土中真菌菌群多样性进行分析,以期为羊场真菌气溶胶危害评估和环境控制提供依据。结果显示,羊舍外环境气载真菌浓度由北向南逐渐升高,舍内气载真菌浓度为外环境的2.1~9.4倍,但南北差异不显著(P>0.05)。舍内、外真菌粒子均集中分布在采样器Ⅲ~Ⅴ级(1.1~4.7μm),所占比例为63.4%~81.5%,峰值均出现在Ⅳ级(2.1~3.3μm),由北向南逐渐增高;带菌粒子中值直径(CMD)由北向南逐渐减小;共鉴定出25个菌属,其中晋北优势菌属为Cladosporium、Trichophyton、Penicillium和Aspergillus,晋中优势菌属为Penicillium、Aspergillus和Alternaria,晋南优势菌属为Penicillium和Aspergillus;ERIC-PCR图谱分析结果显示,3个地区羊舍内、外环境中气载真菌、粪土中真菌菌群的Shannon-wiener指数均由北向南增大,Simpson优势度指数由北向南逐渐减小,饲草中则呈现相反规律;各舍内气载真菌种类与该舍内粪土相似度最高。

鲜牛乳生产中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性与散播

探求生鲜牛乳生产中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药情况和散播特点,采集山西某奶牛养殖区的内外环境、挤奶间环境及乳等各生产环节样本,经细菌分离、纯化培养、16S rRNA鉴定、苯唑西林和头孢西丁药敏纸片法及mecA基因扩增筛选MRSA,测定了其对14种抗生素的药物敏感性,利用mecA基因序列和ERIC-PCR指纹图谱分析鲜牛乳生产中MRSA的遗传相似性。结果显示,从721份生鲜牛乳生产样本中分离鉴定出184株金黄色葡萄球菌,其中90株为MRSA,检出率为48.9%;药敏试验显示,MRSA表现不同程度的耐药性和多重耐药性,对青霉素G的耐药率为95.6%,多重耐药种数主要集中在6~8耐;mecA基因序列分析显示,MRSA的mecA耐药基因同源性为95.22%,不同序列有程度不一的碱基位点缺失和突变;ERIC-PCR同源性分析显示,90株MRSA的DNA指纹图谱相似性为52%~100%,其中牛乳中MRSA与牛场(15株)、挤奶间(3株)、居民区空气(1株)的同源性在90%以上。提示在生鲜乳生产环节中均存在大量MRSA的污染,且呈多重耐药性,并可在牛场、挤奶间和附近环境通过直接接触和形成微生物气溶胶污染生鲜牛乳。