沙棘果渣总黄酮提取工艺及抗氧化活性分析

利用超声波辅助提取技术对河西走廊沙棘榨汁提油后的果渣下脚料总黄酮提取工艺进行优化,同时考察果渣黄酮提取液的还原力和清除羟自由基和超氧阴离子自由基的能力。通过单因素试验和L9(34)正交试验,得到影响黄酮得率的主要因素及其影响力大小为乙醇体积分数>提取时间>料液比;确定最佳提取条件为乙醇体积分数60%、提取时间40 min、料液比1∶50(g/m L);此条件下,河西走廊沙棘果渣中总黄酮提取率为2.55%,果皮渣中总黄酮提取率为0.651%,沙棘籽粕中总黄酮提取率为1.901%。当质量浓度大于0.151 4 mg/m L时,沙棘果渣黄酮提取液的还原力大于VC的还原力;沙棘果渣黄酮提取液对羟自由基和超氧阴离子自由基均有一定的清除作用,其对羟自由基的清除率为39.07%~42.01%,大于同等质量浓度VC的清除作用,而对超氧阴离子自由基的清除率为47.17%~60.38%,小于同等质量浓度VC的清除作用,说明沙棘果渣黄酮提取液对羟自由基有更强的清除能力。

光质对甜椒幼苗生长生理及抗氧化性的影响

采用基质培养法,研究了LED蓝光和紫光对黄色甜椒幼苗生长及其光合特性、叶绿素荧光参数和抗氧化能力等生理生化特征的影响。结果表明:(1)与白光处理相比,蓝光处理使黄色甜椒的幼苗株高、茎粗、鲜重、干重、叶片气孔开度、蒸腾速率、气孔导度、光合速率、胞间CO2浓度、瞬时水分利用效率、瞬时羧化效率、瞬时光能利用率、PSⅡ光合性能指数(PI)、抗坏血酸(ASA)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量明显增加,其中增加幅度较大的是植株干重、叶片蒸腾速率、光合速率、瞬时光能利用率和抗坏血酸(ASA)含量,其值均在白光处理的2倍以上。与此同时,叶片中超氧阴离子(O_2^-·)产生速率、过氧化氢(H_2O_2)和膜质过氧化产物(TBARS)积累分别降低到白光处理的50.26%、44.60%和55.88%;(2)紫光处理使黄色甜椒幼苗叶片中的类胡萝卜素含量增至白光处理的近2倍,增幅显著,但使其株高、根长、茎粗、鲜重、干重、叶片数、叶面积、叶绿素a含量、叶绿素b含量、叶绿素a+b含量、蒸腾速率、气孔导度、光合速率、胞间CO_2浓度、瞬时羧化效率、瞬时光能利用率和最小荧光(Fo)值明显降低,其中干重、蒸腾速率、气孔导度和SOD活性降幅较大,分别为白光处理的11.36%、47.44%、35.86%和49.04%;(3)蓝光和紫光都没有影响叶片的叶绿素荧光参数PSⅡ最大量子产额(Fv/Fm)和PSⅡ潜在活性(Fv/Fo)。综上,在3种LED光中,蓝光更有利于黄色甜椒幼苗的生长,紫光具有明显的抑制作用。

水杨酸在植物非生物胁迫中的作用研究进展

水杨酸是一类酚化合物,它除了诱导植物对病原菌等生物胁迫产生抗性外,还参与植物对非生物胁迫的响应.本文介绍了近10年来有关水杨酸在植物非生物胁迫中作用及其机理.

芸芥柱头总RNA提取方法比较研究

为了确立一种适合于芸芥柱头总RNA的提取方法,以芸芥柱头为材料,在常规异硫氰酸胍法的基础上提取和纯化总RNA。结果表明,采用常规异硫氰酸胍法提取的芸芥柱头总RNA,28SRNA和18SRNA条带的亮度之比接近于1∶1,而不是所要求的2∶1,产生了明显的降解。改进异硫氰酸胍法提取的芸芥柱头总RNA,28SRNA和18SRNA条带的亮度之比接近于2∶1,提取的RNA完整性好,但存在痕量DNA污染。用DNase降解痕量DNA,发现DNA去除较干净,且RNA没有发生降解,可作为反转录底物进行第一链cDNA合成。确立了一种适合于芸芥柱头总RNA的提取与纯化方法,为芸芥自交亲和基因的克隆及功能分析奠定了基础。

啤酒花组培苗的移栽技术研究

文章研究了田园土与水洗沙以不同的比例混合而成的不同基质对啤酒花组培苗网棚移栽效果的影响.结果表明:田园土:水洗沙的比例为3∶l的基质成活率最高,达92.5%.用田园土:水洗沙为3∶l的基质对啤酒花组培苗分别进行了苗根段、苗头段移栽,以整株苗移栽作对照.试验结果表明:移栽成活率分别为87.5%,80.0%,92.5%.说明啤酒花可以进行剪栽,这对于扩大啤酒花的繁殖率和降低成本具有重要意义.

RAPD标记技术及其应用进展

RAPD标记技术是在PCR技术的基础上发展起来的一种运用随机引物扩增,寻找多态性DNA片段遗传标记的分子生物学技术,具有操作简便、敏感性高,容易发现DNA的多态性和通用性等优点.文章简单介绍了RAPD技术在物种的亲缘关系、种质资源的多样性、DNA指纹和种子纯度的鉴定、构建分子标记连锁图、基因定位和数量性状的选择、居群及种系遗传分析和遗传连锁图的构建等方面的应用进展.

芸芥柱头总RNA提取方法及自交亲和性相关基因mRNA差异显示分析体系研究

以芸芥自交亲和系为材料,用改进异硫氰酸胍法提取芸芥柱头总RNA,所提取的RNA完整性好、没有DNA和蛋白质等污染,完全适用于后继实验。同时对影响DDRT-PCR扩增的参数进行了筛选研究,确定了Mg2+、dNTP、引物和TaqDNA聚合酶的浓度和扩增程序。结果表明,在25μL DDRT-PCR反应总体系中各组分的最佳量分别为:17.2μL DEPC-ddH2O;1.5μL 10×PCR Buffer(Mg2+);2.0μL dNTP(各2.5mmol/L);1.0μL锚定引物H-T11M(10μmol);1.0μL随机引物(5μmol/L);1.5μL cDNA;0.8μLTaqDNA Polymerase(2.5 U/μL)。PCR反应程序:①94℃4 min;②30℃1 min 30 s;③72℃1 min;④94℃30 s;⑤42℃1 min 30 s;⑥72℃1 min;从④到⑥35个循环;⑦72℃10 min。

自交不亲和植物自交亲和性研究进展

对高等植物自交亲和基因(资源)、自交亲和性的遗传、自交亲和性与蛋白表达的关系及自交亲和性产生的分子机理等方面的研究进行了综述,阐述了研究植物自交亲和性的意义。

情境创设法在“作物遗传学”课程教学中的初步运用

"作物遗传学"是高等农林院校动物、植物和微生物类各专业重要的专业基础课程,包括的内容抽象而难以理解,大多数学生对该门课的学习感到压力较大.笔者在"作物遗传学"课程教学中运用情境创设法,通过采用创设故事情境、创设图文资料情境、创设生活实例情境、提供视频动画情境等方式,激发学生思维,进而启发学生探究,最终达到提高教学效果的目标.

一种提取芸芥(E.Sativa Mill.)柱头组织总RNA的有效方法

以芸芥自交亲和系的柱头组织为试材,在常规异硫氰酸胍法的基础上,通过改变离心速度、离心时间、有些试剂的组分以及增加一些关键的提取步骤,探讨并提出了一种适合于芸芥柱头总RNA的提取方法.结果表明,用该方法提取的芸芥柱头总RNA完整性好、纯度高,可用于cDNA合成、mRNA差异显示和Northern杂交等分子生物学研究,而且操作技术简单,药品经济划算,实验结果稳定,重复性好.

油菜杂优利用的现状与展望

综述了油菜杂种优势的原理、表现其利用途径等,并对分子标记与油菜杂种优势研究之间的关系进行了展望.

混合盐碱胁迫对芸芥生长发育和生理性状的影响

为评价不同生长期芸芥对混合盐碱胁迫的耐受性及相应的生理机制,采用不同浓度的混合盐碱溶液分别进行种子萌发期、苗期及成株期胁迫试验。结果表明:(1)在种子萌发期,低浓度(20和30mmol·L^(-1))混合盐碱胁迫仅延迟了芸芥种子的萌发时间,对种子活力的影响较小;40mmol·L^(-1)盐碱胁迫下,发芽势和发芽率均显著低于对照值;≥50mmol·L^(-1)盐碱处理下,种子完全丧失活力。(2)苗期叶片相对含水量与盐碱浓度和胁迫时间均呈负相关,盐碱浓度≥40mmol·L^(-1),相对含水量显著下降,而丙二醛含量显著升高;随盐碱浓度增加及胁迫时间延长,叶片可溶性糖和脯氨酸含量总体呈增加趋势,而可溶性蛋白含量却逐渐降低,说明芸芥幼苗对盐碱胁迫的适应在一定程度上主要取决于可溶性糖和脯氨酸等有机物质的积累;(3)成株期低浓度胁迫对株高和开花期影响不显著,≥40mmol·L^(-1)盐碱胁迫时,株高降低,开花期延迟,单株角果数少,部分种子干瘪或败育。60mmol·L^(-1)胁迫下植株能存活,但不能开花结实,70mmol·L^(-1)胁迫则严重抑制了营养生长和生殖生长,甚至死亡。混合盐碱胁迫对芸芥根长、鲜重、干重和含水量均有一定的抑制作用,对根重影响显著,低浓度胁迫促进根的伸长,盐碱浓度≥40mmol·L^(-1)时,根长逐渐变短,显著低于对照。总之,萌发期和成株期芸芥对Na Cl+Na2SO4+Na HCO3+Na2CO3混合盐碱胁迫的耐受性不同,苗期可溶性糖和脯氨酸作为主要的调节物质在芸芥适应较高浓度盐碱逆境中起到了重要作用。

河西走廊5种沙棘果主要活性成分及对ROS清除作用比较分析

为了探明河西走廊沙棘果中的主要化学成分及对活性氧自由基的清除效应,本试验以5个沙棘品种,包括中国沙棘、西藏沙棘、肋果沙棘、中亚沙棘和蒙古沙棘为材料,对其鲜果中所含的总酚类、黄酮类和维生素C的含量分别进行了测定,并就沙棘果甲醇提取液对3种活性氧的抑制率进行了分析。结果表明:(1)5个沙棘品种中,肋果沙棘果中总黄酮含量最高,达5.25 g芦丁/kg鲜重,西藏沙棘果次之;总酚类含量介于8.25~13.26 g没食子酸/kg鲜重之间,Vc含量介于1.84~3.46 g/kg鲜重之间,其中肋果沙棘和西藏沙棘的总酚类和Vc含量均较高。(2)肋果沙棘和西藏沙棘果甲醇提取液对NO·、O_2^-·和·OH的清除作用均较高。(3)总黄酮类与3种ROS的清除率间的相关性最大。总之,肋果沙棘和西藏沙棘果不仅具有高含量的活性物质,其甲醇提取液对氧自由基的清除活性也较强。

26份芸芥种质的耐盐性评价

为了明确26份芸芥种质的耐盐性差异,本试验采用6个不同浓度盐溶液,包括0, 0.2%, 0.4%, 0.6%, 0.8%和 1.0% NaCl处理芽期芸芥,测定了发芽率、胚根长等指标;筛选出0.6%、0.8% NaCl溶液处理苗期芸芥,测定了幼苗生长及耐盐生理相关指标,并采用模糊数学隶属函数法评价不同芸芥材料的耐盐性。结果表明:(1) 0.6%盐胁迫所造成的芸芥萌发抑制率接近50%,0.8%盐胁迫基本造成了生长的停滞(发芽率8%),因此认为这两个浓度是盐胁迫抑制芸芥生长的阈值。(2)随着盐浓度的增加,正常种苗率变小,其均值变化为57.62%~34.45%;苗高、根长、根鲜重、苗鲜重均下降,其中各指标的变幅分别为0.99~0.77 cm,0.69~0.44 cm,0.0034~0.0023 g,0.0244~0.0176 g。(3)根据隶属函数总平均值大小将参试材料进行耐盐性分类:耐盐性较强的材料(0.6133≤隶属值总平均值≤ 0.7261 ),包括08武芸3-1等;耐盐性中等的材料(0.4274≤隶属值总平均值≤0.5911),包括临洮芸芥等;耐盐性较弱的材料(0.3894≤隶属值总平均值≤0.0280),包括13芸芥68-3等。(4)耐盐材料中游离脯氨酸和可溶性糖含量均显著高于耐盐性较差的材料。总之,26份芸芥种质材料对NaCl溶液胁迫的耐受性存在明显差异,通过模糊数学隶属函数法综合苗期各指标筛选出的耐盐材料,可进一步用于耐盐育种与耐盐基因挖掘。

白菜型油菜×白芥属间远缘杂交亲和性及杂交一代幼苗挽救技术的研究

为了探明白菜型油菜与白芥属间杂交亲和性,建立白菜型油菜与白芥属间的杂交一代壮苗及生根技术.以白菜型油菜为母本,白芥为父本进行杂交,统计杂交子房脱落率和杂交亲和指数,分析不同比例基本培养基、不同种类及浓度的生长素或细胞分裂素对诱导生根和壮苗培养的影响.结果表明:白菜型油菜与白芥属间杂交种,平均杂交亲和指数为0.5,表现为杂交不亲和;二者的杂交种子在滤纸床上萌发,只得到了缺少胚根的无根苗.将无根苗在1/2 MS培养基上进行挽救培养,能生长发育成完整植株.白菜型油菜与白芥属间杂交后代试管苗的最佳壮苗培养基为2 MS+1.5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA,最佳生根培养基为1/2 MS+0.3mg/L IBA,最佳移栽基质为草炭土+蛭石+灌漠土(1∶2∶1).白菜型油菜与白芥间存在杂交不亲和性,杂交后代壮苗及生根技术为:2MS+1.5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA培养基上壮苗培养,1/2 MS+0.3mg/L IBA培养基上生根培养,草炭土+蛭石+灌漠土(1∶2∶1)基质中驯化移栽.

芸芥自交亲和性的遗传及自交亲和基因mRNA差异显示分析

以8份芸芥自交亲和系与4份芸芥自交不亲和系为试验材料,通过正交和反交方式共组配了18个不同的杂交组合,调查了F1群体的自交亲和性与否,及1 424株F2群体和626株BC1群体的性状分离情况。同时,还采用mRNA差异显示技术研究了芸芥自交亲和基因的表达器官,分离、筛选了与自交亲和性相关的特异基因片段。结果表明:芸芥自交亲和性与细胞质遗传无关,而是由一对核基因控制的简单隐性遗传性状;芸芥自交亲和基因的表达不属于组成性表达,而属于组织特异性表达;在芸芥自交亲和系的柱头cDNA扩增中共得到3条差异cDNA片段,其与芸芥自交亲和基因有密切关系。

芸芥自交亲和性遗传变异（英文）

为了解芸芥的自交亲和性变异,采用田间套袋自交技术对不同来源的52份芸芥品种（系）的自交亲和指数（CI）、相对亲和指数进行了对比分析。结果表明,芸芥的自交亲和性存在较大幅度的变异,CI在0.00-4.98之间,这种变异不仅存在于品种间,而且存在于品种内不同个体间。52份参试材料中,自交亲和指数小于1的有43个品种;9个品种的CI〉1（1.03-4.98）,其中,CI〉3的材料有四川-2芸芥、06芸86-y和06芸86-87。依据亲和指数可将参试材料分为4种类型：高自交亲和类型（CI≥3.00）;自交亲和类型（CI为1.00-2.99）;自交不亲和类型（0.00〈CI〈1．000）；高自交不亲和类型（CI为0.00）。自交亲和性因地区而异，一般南部和西部地区的芸芥品种（系）自交亲和性高于其它地区的品种。综上，芸芥是一种高度自交不亲和植物，但其自交亲和性存在广泛变异，因此，从芸芥群体中选出的自交亲和系可用于将来的油菜及其近缘植物的遗传育种研究。

甘蓝型油菜优良性状选择与鉴定

为了在油菜生产上更好地运用甘蓝型油菜的优良性状,对8份参试甘蓝型油菜品系的单株产量以及相关农艺性状和含油量进行了选择与鉴定。结果表明,12甘蓝型油菜品系44的综合性状表现最好,12甘蓝型油菜50的综合性状表现次之。

不同生态型芸芥中有机物质对盐胁迫的响应

为了探明有机渗透调节剂在耐盐性中的作用,本研究以芸芥耐盐生态型和不耐盐生态型为试材,测定了盐胁迫下芸芥叶片可溶性蛋白、脯氨酸、可溶性糖等含量。结果表明:渗透势和可溶性蛋白含量在两种生态型间均无明显差异;叶片渗透势和有机渗透调节剂之间没有呈现一致性的变化趋势;不同盐胁迫下,耐盐生态型较不耐盐生态型含有较多的脯氨酸,而在高盐胁迫下,在耐盐生态型中还检测到了高浓度的可溶性糖和游离氨基酸。随着盐浓度的升高,耐盐生态型中可溶性蛋白的总量缓慢增加,但当盐浓度大于200 mmol/L时,可溶性蛋白的含量下降。这些结果初步证明,脯氨酸、可溶性糖和游离氨基酸在盐胁迫应答中起着关键作用,可作为选择耐盐芸芥的标准。

高等植物自交亲和性状之遗传学综合性实验的教学设计与实践

本文以自交亲和性状为实验对象,设计了"高等植物自交亲和性状表达特性与自交亲和性相关基因mRNA差异显示分析"实验,实验涉及RNA提取、cDNA链合成、DDRT-PCR及电泳分离一系列分子遗传学技术,鉴定出自交亲和基因表达器官;然后采用Photoshop和Image LabTM Software分析图片;最后以小组为单位按学术期刊文章格式完成实验报告。通过开放教学不仅让学生掌握分子遗传学实验技术和图片处理软件,还让学生自主设计实验方案,独立完成预实验,提高学生驾驭知识的能力。通过4年的教学探索与实践,建立了稳定的分子遗传学实验体系,实现了学生自主设计并完成实验的开放式教学,既能发挥实验课的实践教学价值,也能培养创新思维和动手能力强的高素质人才,获得了学生的好评,取得了很好的教学效果。总之,综合实验设计可直接推广应用于各高校农学类专业的遗传学实验教学,其教学理念和方法还可推广应用于其他生物学、医学等的实验教学。