医养结合背景下中职护生老年护理养老院实践教学效果评价

目的评价中职护生开展老年护理养老院实践教学的效果。方法随机选择重庆市渝东卫生学校2022级护理专业47名学生作为观察组,开展医养结合养老院实践教学。选择同年级护理专业未开展养老院实践的45名学生作为对照组。比较实践教学前后观察组与对照组学生Kogan老年人态度量表(KAOP)、观察组实践教学后理论考试成绩与对照组理论考试成绩,分析观察组学生实践后的平行笔记。结果医养结合养老院实践结束后,观察组KAOP得分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组理论考试成绩高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);实践教学后,收集观察组平行笔记47份。结论开展老年护理学医养结合养老院实践教学为护生提供真实的学习环境,有利于护生对老年人认知态度的积极转变,有助于提高中职护生老年护理的教学效果。

浅谈老年护理实践教学现状

随着我国人口老龄化现状逐渐加剧,老年护理人才供不应求的趋势日益明显,这对老年护理教育事业提出了更高的要求。本文通过对老年护理实践教学模式进行综述,为不断探索适合我国护理教育的老年护理实践教学模式提供思路。

肺炎克雷伯菌耐药性和毒力相关因子研究进展

肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）为院内感染的重要条件致病菌。当机体抵抗力降低时,存在于人体上呼吸道和肠道的肺炎克雷伯菌,便由呼吸道到达肺内,从而引起肺大叶或者肺小叶的融合性病变,导致肺炎。此外,肺炎克雷伯菌还会造成泌尿道、血液系统、消化道以及皮肤软组织等多个部位的感染。近年来,由于广谱抗生素的大量不规范使用,

肠球菌万古霉素耐药基因和毒力基因的研究进展

肠球菌作为医院感染的主要菌群,可引起菌血症、尿道感染、外科伤口感染等各种感染。由于抗生素的不规范使用,已出现具有多重耐药性的肠球菌,给临床治疗带来诸多挑战。本文就耐万古霉素肠球菌的耐药基因、毒力基因以及多位点序列分型(MLST)作一综述,为肠球感染的临床治疗及新药研发提供科学依据。

布鲁氏菌比较基因组学研究进展

依据宿主偏好性的不同,布鲁氏菌分为6个经典种。根据生物学特性又将其分为19个亚型。包括：B.melitensis（羊种,主要感染绵羊和山羊种,

布鲁杆菌Cu-Zn SOD和GroEL的克隆表达及细胞免疫特性比较分析

目的分析比较布鲁杆菌两种外膜蛋白Cu-Zn SOD和GroEL的细胞免疫特性。方法以布鲁杆菌16M基因组为模板,PCR扩增Cu-Zn SOD和GroEL蛋白的基因序列。采用Gateway方法构建表达载体,在大肠埃希菌中诱导表达并纯化,用获得的纯化蛋白刺激减毒活疫苗S19免疫小鼠的脾细胞,并测定细胞上清中IFN-γ的水平。结果成功克隆表达了Cu-Zn SOD和GroEL蛋白,用这两种蛋白刺激S19免疫小鼠脾细胞后,细胞上清中的IFN-γ水平明显升高,并且GroEL刺激后的IFN-γ水平高于Cu-Zn SOD刺激后的IFN-γ水平。结论 GroEL和Cu-Zn SOD蛋白均具有细胞免疫反应特性,且GroEL的细胞免疫反应特性强于Cu-ZnSOD。

布鲁菌抗原的快速克隆与高效表达

目的:通过Gateway技术构建布鲁菌抗原表达载体,并筛选出高效可溶性表达载体。方法:以山羊布鲁菌16M株染色体DNA为模板,扩增4个布鲁菌抗原基因BMEI2002、BMEI1069、BMEI1483和BMEI0748,利用GatewayBP反应将基因克隆到入门载体pDONR201中,构建重组质粒,然后用Gateway LR反应将基因重组到3种表达载体(pDEST17、pHXGWA、pHGGWA)中,构建相应的重组表达质粒,将重组质粒转化大肠杆菌ER2566(DE3)并诱导表达,分析利用3个不同载体所表达蛋白的表达量及表达形式。结果:利用BP反应构建了4个基因的重组质粒,用LR反应将这些基因分别克隆到表达载体,构建得到了相应的表达载体;诱导表达后的可溶性分析显示,含6×His和TRX标签的pHXGWA所表达的蛋白在表达量和可溶性方面均优于pDEST17和pHGGWA。结论:通过Gateway技术实现了布鲁菌抗原的快速克隆,筛选到的pHXGWA可作为后续大规模克隆表达载体,为布鲁菌抗原的大规模克隆表达和保护性抗原的筛选奠定了基础。

70株临床分离肠球菌的毒力基因检测与耐药性分析

目的研究临床分离肠球菌的毒力基因分布与药物敏感性,分析粪肠球菌和屎肠球菌毒力基因分布与药物敏感性差异及相互关系,为临床选择抗菌药物提供参考和指导,为进一步研究肠球菌感染的致病机制奠定基础。方法选取苏州大学第一附属医院2014年3月~2018年7月分离得到的70株肠球菌,采用纸片扩散法(K-B法)或vitek 2 compact 60仪器法进行药敏试验,聚合酶链式反应检测毒力基因。结果临床分离得到的70株肠球菌有39株粪肠球菌和31株屎肠球菌,所占比例分别为55.71%、44.29%。屎肠球菌对环丙沙星、青霉素G、氨苄西林、万古霉素、替考拉宁的耐药率明显高于粪肠球菌(P<0.05)。70株肠球菌对cylL-L、cylL-S、cylL-A、ace、asa-I、acm、cpd、esp、gel-E 9个毒力基因的携带率最高的是esp(61.43%),其次是acm(47.14%);cylL-L、cylL-S、cylL-A、ace、cpd、gel-E的携带率均为粪肠球菌高于屎肠球菌(P<0.05)。毒力基因及耐药性相关分析显示二者无相关性(P>0.05)。结论粪肠球菌所含毒力基因更多,而屎肠球菌有更强的耐药性。粪肠球菌和屎肠球菌的耐药性与毒力基因之间无相关性,临床治疗应注意合理应用抗菌药物,以防耐药性的产生与传播。

肠球菌氨基糖苷类高水平耐药基因与毒力基因研究进展

肠球菌是引起医院感染常见的重要条件致病菌。近年来随着抗菌药物在临床的广泛使用,肠球菌的耐药水平迅速上升,肠球菌耐药机制的研究备受关注。本文就肠球菌氨基糖苷类高水平耐药基因与毒力基因研究综述如下。

利用T载体克隆快速构建布鲁氏菌缺失突变株

目的:建立一种基于T载体快速克隆构建布鲁氏菌突变株的方法,提高布鲁氏菌突变株构建的效率。方法:采用融合PCR的方法,将待缺失基因上下游的同源臂与卡那霉素抗性基因融合起来,构建突变盒,然后将突变盒直接与T载体连接,构建突变载体,将载体转入布鲁氏菌感受态细胞并筛选抗性克隆,进而获得布鲁氏菌的缺失突变株。结果:结合融合PCR和T载体快速克隆,能够在48h之内构建好突变载体,与传统的酶切连接相比,效率高、周期短。结论:基于T载体快速克隆是一种非常高效的构建突变株的方法,为布鲁氏菌突变株的构建提供了一种新方法。

布鲁菌进化和分类学研究进展

布鲁菌属革兰氏阴性兼性胞内寄生菌,能感染多种宿主动物和人。该属可分为6个典型种,包括羊种、牛种、猪种、沙林鼠种、绵羊附睾种以及犬种布鲁菌等。此分类是基于其致病性以及宿主偏好性的差异划分。尽管6个种通过传统表型试验能区分,但布鲁菌种内采用DNA-DNA杂交证明DNA同源性高度一致(相似性大于90%)。因此有人提议布鲁菌由单一种组成,即布鲁菌属中只有羊种布鲁菌,其他种都是羊种菌的生物亚型之一。然而基于其他分子技术的基因分型表明其DNA多态性表现明显,说明目前对这个种的分型还是比较准确。而最近分离的海洋种布鲁氏菌分离株(鳍型和鲸型)采用传统分型标准和一些特异的分子标记也证明这种分型比较正确。本文对目前布鲁菌种属进化和分类学进行综述,希望对研究其进化和分类有所帮助。

布鲁氏菌全基因组DNA芯片研制及比较基因组杂交方法的建立

为利用布鲁氏菌强毒株马耳他布鲁氏菌(B.melitensis)16M和流产布鲁氏菌(B.abortus)9-941全基因组序列,构建布鲁氏菌全基因组DNA芯片,并将其应用于比较基因组学分析,从基因库下载马耳他布鲁氏菌16M和流产布鲁氏菌9-941中的3 218个基因设计引物,经过条件优化和重新设计引物等方法进行大规模PCR扩增,成功扩增3 212条基因。产物纯化后点制醛基修饰玻片,每个基因2个点,加上阳性和阴性对照,芯片上合计6 912个探针。囊括了布鲁氏菌3 212条基因和阳性、阴性对照点。采用Cy3/Cy5双色荧光杂交技术,分别以马耳他布鲁氏菌16M和流产布鲁氏菌9-941作为参照和待测样本进行荧光双色杂交分析,成功建立了布鲁氏菌比较基因组杂交分析方法。若干质控杂交结果表明,建立的全基因组DNA芯片杂交结果与全基因组测序结果完全一致。证明成功建立了基于全基因组DNA芯片的布鲁氏菌比较基因组学技术平台。

布鲁氏菌vjbR突变株的构建及其毒力表型分析

为分析vjbR在布鲁氏菌毒力中的作用,构建了vjbR的突变株和互补株,并分析了它们在巨噬细胞和小鼠体内的存活能力。利用同源重组的方法,用卡那抗性基因替换了16M的vjbR(BMEII1116)基因,得到了vjbR的缺失突变株16M△vjbR。将vjbR基因的ORF克隆到pMD18-T载体中,然后将其转入到突变株16M△vjbR中得到互补株16M△vjbR-C。用16M、16M△vjbR和16M△vjbR-C侵染巨噬细胞和感染小鼠,比较分析它们在巨噬细胞内的生存能力及小鼠毒力。研究结果表明vjbR突变株在巨噬细胞和小鼠体内的毒力减弱,存活能力下降,说明vjbR基因是布鲁氏菌16M的毒力相关基因,对于布鲁氏菌建立慢性感染是必要的。