HBV感染对肝癌细胞脂类代谢相关蛋白表达的影响

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)是非细胞病变的病毒,其持续感染造成的肝脏损伤逐步引起肝脏炎症,进而导致肝纤维化、肝硬化,最终引发了80%的肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)。肝脏是机体代谢的重要器官,癌基因的异常活化以及抑癌基因的抑制失活会造成细胞代谢水平以及代谢方式的改变,此过程被称为细胞代谢重编程(metabolism reprogramming),代谢重编程是肝脏炎症向癌症转化的关键步骤。本研究通过逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)、酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)、多重荧光免疫组化等方法检测HBV阳性细胞(或组织)与对照细胞(或组织)中脂质代谢关键基因的表达,在此基础上分析其功能和脂代谢的关系。结果显示,在稳定表达HBV的HepG2.2.15及HBsAg的Hep3B细胞中,脂代谢相关基因HMGCR、SREBP-2以及PSCK9的mRNA表达量显著上调,且在肝细胞癌患者的临床病理结果中相应蛋白表达水平也同步提高,提示HBV感染导致了相应代谢基因的高表达,且HBsAg是调控脂质代谢酶基因紊乱的关键蛋白。通过分析365例大样本肝癌患者的病理资料,本文发现脂代谢相关基因在肝癌组织中的高表达有预后变差的趋势,提示脂质代谢的紊乱可能是影响肝癌患者总生存期的危险因素。

复元骨愈汤辅助外固定支架术治疗创伤性胫腓骨骨折疗效及对血清TNF-α、IL-6、hs-CRP水平的影响

目的 探讨复元骨愈汤辅助外固定支架术治疗创伤性胫腓骨骨折的疗效及对血清炎症因子的影响。方法 选择2020年12月—2021年12月空军军医大学第一附属医院收治的90例创伤性胫腓骨骨折患者,随机分成对照组和观察组。2组患者均接受外固定支架术治疗,对照组术后给予西医常规治疗,观察组术后联合复元骨愈汤口服8周。观察比较2组症状缓解时间,治疗4周后血清炎性因子[白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)]水平,治疗8周后骨痂影像学评分及临床疗效、术后并发症发生情况。结果 观察组肿胀消失时间、疼痛消失时间、瘀斑消失时间及骨折愈合时间均明显短于对照组(P均<0.05);2组治疗4周后血清IL-6、TNF-α、hs-CRP水平均明显降低(P均<0.05),且观察组均明显低于对照组(P均<0.05);2组治疗后骨痂量、骨痂密度、骨痂边缘、断端边缘评分均明显升高(P均<0.05),且观察组各项评分均明显高于对照组(P均<0.05);观察组总有效率为95.6%(43/45),高于对照组的82.2%(37/45),差异有统计学意义(P<0.05);观察组并发症总发生率为8.9%(4/45),低于对照组的24.4%(11/45),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 复元骨愈汤能够减轻创伤性胫腓骨骨折患者术后炎症反应,有助于促进骨折愈合进程,快速缓解患者临床症状,减少术后并发症发生。

汉中红茶互联网营销模式研究与实践

随着电子商务的发展,许多传统行业的销售难题得到了解决,其中包括很多茶企业。我国是茶的故乡,拥有几千年的茶文化历史,我国的茶叶深受国内外朋友的喜爱。文章以汉中红茶为例,着重讨论互联网时代背景下,茶企业的电子商务模式的发展背景、面临的困难及发展方向,文章认为平台建设、品牌重塑和专业化推广是汉中红茶进行互联网营销模式探索的改进方向。

肠道病毒71型感染诱导细胞程序性死亡形态学及分子生物学特征的初步研究

肠道病毒71型(enterovirus type 71,EV71)感染常可引起婴幼儿手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD),还可引起中枢神经系统并发症等重症,甚至死亡。研究认为,EV71诱发重症的原因主要与病毒感染诱导细胞程序性死亡(programmed cell death,PCD)及诱导细胞产生大量炎症因子有关。病毒感染可通过激活不同的信号通路触发细胞程序性死亡,主要包括含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cysteinyl aspartate specific proteinase,caspase)依赖的细胞凋亡、细胞焦亡,以及非caspase依赖的细胞坏死性凋亡。本研究旨在探讨EV71感染诱导细胞程序性死亡的形态学和分子生物学特征,利用显微镜和免疫荧光技术检测EV71感染后细胞形态变化,JC-1染色检测感染后细胞线粒体膜电位变化,流式细胞术及Annexin VFITC/PI双染法、乳酸脱氢酶释放量法检测感染细胞的细胞膜损伤程度,结合蛋白免疫印迹法检测病毒感染后细胞中多聚ADP核糖聚合酶[poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]、caspase-9、caspase-3等凋亡因子,以及细胞焦亡关键效应蛋白Gasdermin D、坏死性凋亡效应蛋白MLKL的磷酸化情况。结果显示,EV71感染后细胞主要呈现凋亡特征,并伴随少量细胞坏死。与细胞凋亡相关的PARP被剪切,caspase-9和caspase-3等相关因子被激活。经泛caspase抑制剂处理后,细胞程序性死亡被抑制,但仍有部分细胞坏死。结果提示,EV71感染以细胞凋亡为主,也可能存在非caspase依赖的细胞程序性死亡。

超声波协同复合酶提取兰州百合多糖

为获得一种高效的兰州百合多糖的提取方法,采用超声波协同复合酶法,以兰州百合粉为原料,对复合酶的配比、酶解过程及超声提取过程进行了优化。结果表明,兰州百合多糖提取的最佳工艺条件是:凝乳酶加量1.5%,纤维素酶加量2.0%;超声温度50℃,超声时间25 min,料液比1∶25,超声功率225 W。此条件下兰州百合多糖提取率为39.860%,与超声波法、复合酶法提取兰州百合多糖相,比多糖提取率明显提高。

黑果枸杞叶槲皮素的制备及其体外抗氧化活性研究

采用超声波-微波协同提取黑果枸杞叶醇提物,利用大孔吸附树脂分离富集黑果枸杞叶总黄酮,采用Sephadex LH-20,分离纯化槲皮素。利用高效液相色谱-质谱联用法(high performance liquid chromatography and mass spectrometry,HPLC-MS)对所得的槲皮素进行结构鉴定。通过考察槲皮素的总抗氧化活性、清除DPPH自由基、ABTS+自由基、超氧阴离子自由基以及脂质过氧化体系中脂质过氧化抑制率5个指标,由此评价槲皮素的体外抗氧化活性。研究结果表明,槲皮素在5种自由基中清除ABTS+自由基能力最强,浓度在300 nmol/L～400 nmol/L时清除率达68.0%。清除DPPH自由基能力和清除超氧阴离子自由基能力基本持平。

孤岛工作面回采巷道护巷小煤柱合理宽度的确定

为了确定1402孤岛工作面护巷小煤柱的合理宽度,通过相关计算得出,煤帮内支承压力峰值距煤壁12.04m。为确定合理支护宽度,建立了煤柱宽度为5m、7m、9m和11m四个模型,分析其塑性区域分布图、垂直应力分布图,并结合经济合理性,最终确定煤柱宽度为7.0m。

新型自体T细胞回输治疗晚期实体肿瘤的安全性及疗效分析

目的:探讨采用程序性死亡因子-1(programmed cell death-1,PD-1)单克隆抗体、白细胞介素2(IL-2)及IL-15诱导制备的新型自体T细胞免疫治疗晚期实体肿瘤的疗效及安全性。方法:前瞻性入组2018年3月至2020年12月复旦大学附属中山医院收治的进行单独新型自体T细胞治疗及新型自体T细胞治疗联合标准治疗的晚期实体肿瘤患者10例,进行Ⅰ期临床研究。主要观察指标为安全性,即治疗相关不良反应的发生率和严重程度;次要观察指标为有效性,包括生活质量评分、无进展生存期等,并分析治疗后患者免疫状态变化。结果:10例患者中包括肝细胞肝癌3例、肠道肿瘤5例、胰腺癌1例和肺癌1例。细胞治疗后28 d内,未发生与治疗有关的严重不良事件。生活质量调查问卷显示,细胞治疗后,患者生活质量改善。其中,躯体功能、总体健康状况、疲倦改善较明显(P<0.05)。3例单用新型T细胞治疗的患者均短期内出现疾病进展;联合治疗患者的疾病控制率为71.4%。联合治疗无效患者的外周血调节性T细胞(Treg)处于较高水平,治疗后28 d高于治疗有效患者(P=0.03)。结论:新型自体T细胞治疗实体肿瘤安全可靠,具有一定的抗肿瘤作用,联合标准治疗可显示良好的疗效,值得进一步扩大研究。

RNA编辑酶ADAR1对EV71感染及变异的影响

目的研究RNA编辑酶腺苷酸脱氨酶(adenosine deaminase acting on RNA,ADAR1)对新型肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)感染及变异的影响。方法运用RNAi技术筛选ADAR1基因沉默稳定细胞株,通过MTT分析病毒感染后细胞活力变化、噬斑形成分析病毒滴度及细胞对病毒的敏感性,以及Western blot测定病毒蛋白表达水平等,分析ADAR1对EV71感染的影响。由于ADAR1介导的RNA编辑可使基因形成A-G或T-C突变,为确定ADAR1影响EV71感染是否与其编辑EV71基因组导致病毒变异有关,对EV71流行区EV71的突变特征进行分析;并利用EV71感染ADAR1基因沉默细胞,通过对病毒基因组测序分析,研究ADAR1是否直接编辑EV71基因组。结果 ADAR1基因沉默后,与对照细胞相比,病毒感染细胞的存活率下降更快,并形成更多、更大的噬斑。病毒感染细胞中的VP1蛋白和细胞培养基上清中的病毒滴度均明显增加。EV71突变特征分析表明,虽然A-G和T-C之间的变异是病毒突变的主要类型,但EV71感染实验初步证明,ADAR1并不直接编辑EV71病毒基因组。结论 ADAR1可能具有抗EV71感染的作用,但ADAR1可能并不直接编辑EV71基因组。

高效溶剂萃取法提取黑果枸杞花色苷及其颜色稳定性研究

为了提高黑果枸杞花色苷的提取效率以及颜色稳定性,采用高效溶剂萃取法进行提取,考察静态萃取温度、乙醇浓度、静态萃取时间、静态萃取压力和循环次数对提取效果的影响,通过响应面法优化提取工艺,并对提取的花色苷溶液进行颜色稳定性研究。结果表明:最佳提取条件为温度48℃,乙醇浓度60%,提取时间4 min,静态萃取压力8 MPa,循环2次,在此条件下,花色苷的提取得率为1.989%;保存温度为4℃、pH值为2.5时,黑果枸杞花色苷溶液较为稳定。

姜黄素预处理缓解小鼠脓毒症心肌病的作用和机制研究

目的探究姜黄素(Cur)预处理对脓毒症小鼠心肌损害的保护作用以及SIRT1信号通路是否介导Cur心肌保护作用。方法通过小鼠盲肠结扎穿孔法(CLP)建立脓毒症模型。术前3 d每日给予Cur(100 mg/kg,灌胃)和SIRT1特异性抑制剂Sirtinol(5 mg/kg,腹腔注射)。CLP 48 h后,通过Millar导管技术检测小鼠心脏收缩与舒张功能,通过试剂盒检测丙二醛含量、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性,通过TUNEL染色检测心肌凋亡率,通过Western Blotting检测SIRT1信号通路和凋亡相关蛋白的表达情况。结果与Sham组相比,CLP后小鼠心脏收缩与舒张功能均明显受损,心肌组织丙二醛含量增加,而超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性明显降低,凋亡率和Bax、Caspase 3表达量显著增加,Bcl-2的表达量明显降低(P <0.05)。Cur预处理可以明显改善心脏功能,抑制心肌氧化应激损伤和凋亡,伴随SIRT1信号通路的激活。用Sirtinol抑制SIRT1信号通路后Cur的心肌保护作用明显减弱。结论 Cur通过激活SIRT1信号通路,抑制氧化应激损伤和凋亡,从而改善脓毒症引起的心肌损害。

开封:让公平正义在“最后一公里”提速

作为社会正义最后一道防线的最后一个环节,执行工作关系到生效法律文书确定的权益能否兑现,对维护当事人的合法权益、树立司法公信力和司法权威起到关键作用。面对执行工作的新形势、新任务,河南省开封市祥符区人民法院迅速行动,以“努力让人民群众在每一个司法案件中感受到公平正义”为工作目标,牢固树立“公正司法、一心为民”的服务宗旨,勇于担当,主动作为,出重拳用实招,多措并举,工作成效显著,工作亮点频现,用实际行动践行着对人民群众的庄严承诺。