以β-伴大豆球蛋白免疫新西兰兔,制备抗β-伴大豆球蛋白多克隆抗体。利用正辛酸-硫酸铵沉淀法纯化多抗血清,并分析纯化前后多抗血清蛋白含量、纯度、效价、敏感性及特异性。结果表明,经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析纯化后血清纯度得到提高;间...以β-伴大豆球蛋白免疫新西兰兔,制备抗β-伴大豆球蛋白多克隆抗体。利用正辛酸-硫酸铵沉淀法纯化多抗血清,并分析纯化前后多抗血清蛋白含量、纯度、效价、敏感性及特异性。结果表明,经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析纯化后血清纯度得到提高;间接ELISA法检测多抗血清效价及敏感性无明显变化;与大豆Gly m Bd 28K蛋白和花生蛋白的交叉反应率分别由25.28%、1.16%降至为0.79%、0.2%。制得的抗β-伴大豆球蛋白多克隆抗体特异性高。为β-伴大豆球蛋白致敏蛋白的检测,和大豆β-伴大豆球蛋白致敏亚分子结构的定位奠定了基础。展开更多
建立表面增强拉曼光谱法定性定量检测保健食品中非法添加物硝苯地平。采用柠檬酸三钠法制备胶体金,探索最优金胶浓度及粒径范围,确定以100 mL纯水中加入3 mL 1%氯金酸溶液及2.7 mL 1%柠檬酸三钠制备的金胶具备良好的信号增强效果,经粒...建立表面增强拉曼光谱法定性定量检测保健食品中非法添加物硝苯地平。采用柠檬酸三钠法制备胶体金,探索最优金胶浓度及粒径范围,确定以100 mL纯水中加入3 mL 1%氯金酸溶液及2.7 mL 1%柠檬酸三钠制备的金胶具备良好的信号增强效果,经粒径仪结果显示金溶胶粒在85 nm左右。利用拉曼光谱的特异性进行硝苯地平定性检测,结果发现部分降血压药物在(1334±3)cm^(-1)和(1642±3)cm^(-1)处有明显特征峰,用三聚氰胺作为内标物进行硝苯地平定量检测,以硝苯地平特征峰1334 cm^(-1)与三聚氰胺特征峰707 cm^(-1)的峰高比为纵坐标,硝苯地平浓度为横坐标进行线性拟合,结果发现硝苯地平质量浓度在0~100 mg/L有良好线性关系,相关系数为R^(2)=0.9957,定性检测线为5 mg/L,其固体、液体样品加标回收率分别为88.8%~96.5%和90.2%~96.6%,标准偏差分别为4.17%和3.49%。试验方法准确、灵敏、快速,可用于保健品中非法添加硝苯地平药物的定性定量检测。展开更多
利用生物信息学软件SWISS-MODEL和Deep View 4.1对Gly m Bd 28K进行同源建模并对做出的模型进行评估。利用DNAStar和SOPMA分析Gly m Bd 28K的亲水性、柔韧性、表面可及性、抗原指数和二级结构,预测出Gly m Bd 28K的4个B细胞线性表位5-13...利用生物信息学软件SWISS-MODEL和Deep View 4.1对Gly m Bd 28K进行同源建模并对做出的模型进行评估。利用DNAStar和SOPMA分析Gly m Bd 28K的亲水性、柔韧性、表面可及性、抗原指数和二级结构,预测出Gly m Bd 28K的4个B细胞线性表位5-13,75-77,175-177,200-203。根据三级结构模型,通过Disco Tope 2.0预测出Gly m Bd 28K的6个与构象表位相关的区段11-14,40-41,43,114-115,185-192,194-207。展开更多
文摘以β-伴大豆球蛋白免疫新西兰兔,制备抗β-伴大豆球蛋白多克隆抗体。利用正辛酸-硫酸铵沉淀法纯化多抗血清,并分析纯化前后多抗血清蛋白含量、纯度、效价、敏感性及特异性。结果表明,经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析纯化后血清纯度得到提高;间接ELISA法检测多抗血清效价及敏感性无明显变化;与大豆Gly m Bd 28K蛋白和花生蛋白的交叉反应率分别由25.28%、1.16%降至为0.79%、0.2%。制得的抗β-伴大豆球蛋白多克隆抗体特异性高。为β-伴大豆球蛋白致敏蛋白的检测,和大豆β-伴大豆球蛋白致敏亚分子结构的定位奠定了基础。
文摘利用生物信息学软件SWISS-MODEL和Deep View 4.1对Gly m Bd 28K进行同源建模并对做出的模型进行评估。利用DNAStar和SOPMA分析Gly m Bd 28K的亲水性、柔韧性、表面可及性、抗原指数和二级结构,预测出Gly m Bd 28K的4个B细胞线性表位5-13,75-77,175-177,200-203。根据三级结构模型,通过Disco Tope 2.0预测出Gly m Bd 28K的6个与构象表位相关的区段11-14,40-41,43,114-115,185-192,194-207。