miR-204-3P对二氧化硅粉尘所致大鼠矽肺纤维化的干预作用

[背景]长期暴露于游离二氧化硅颗粒会导致肺组织的纤维化,微小核糖核酸(miRNA)的异常表达可以影响纤维化的发生和进程。[目的]通过非暴露气管滴入二氧化硅粉尘悬液构建大鼠矽肺模型,通过尾静脉注射miR-204-3p过表达腺病毒观察其对二氧化硅粉尘所致矽肺纤维化的干预作用。[方法] 40只SD大鼠随机分为4组:对照组、矽肺模型组、miRNA-NC组和miR-204-3p干预组。在乙醚麻醉下,矽肺模型组、miRNA-NC组和miR-204-3p干预组的大鼠一次性气管非暴露注入游离二氧化硅粉尘悬液1 mL(50 mg·mL-1),而对照组则注入相同体积的生理盐水。染尘30 d时,miR-204-3p干预组尾静脉注射包装rno-mir-204的腺病毒载体过表达miR-204-3p,miRNA-NC组给予空病毒载体,并在正常饲养30 d后使用水合氯醛麻醉处死动物,取肺组织进行后续实验。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组大鼠肺组织中miR-204-3p的相对表达水平,苏木精伊红染色、马森染色、天狼星红染色进行病理学观察,免疫组织化学法检测纤连蛋白(Fibronectin)、Ⅰ型胶原蛋白(Collagen Ⅰ)在各组大鼠肺组织中的表达情况,RTqPCR检测各组大鼠肺组织中纤维化标志物Fibronectin、波形蛋白(Vimentin)、Collagen Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白(Collagen Ⅲ)的mRNA相对表达水平,采用Western blot法检测各组大鼠肺组织中纤维化标志物Fibronectin、Vimentin、Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ的蛋白表达水平。[结果]肺组织大体解剖结果显示:正常肺组织呈粉红色,质地柔软表面光滑,而矽肺模型组织呈灰白色,质地较硬,表面可见瘢痕和灰白色的矽结节。与矽肺模型组相比miR-204-3p干预组肺组织的颜色变得红润,表面较为光滑,质地也变得柔软。染色结果显示:正常肺组织组织肺泡壁薄、肺泡内有少量的毛细血管、肺泡结构清晰完整;矽肺模型组肺组织中肺泡壁变厚、肺间隔部分断裂、肺泡结构缺损并伴随大量胶原纤维的沉积;miR-204-3p干预组的肺组织肺泡结构比较清晰且有少量胶原纤维的沉积。RT-qPCR结果显示:与对照组相比,矽肺模型组和miRNA-NC组肺组织中miR-204-3p的相对表达水平均降低(P <0.05),miR-204-3p干预组肺组织中miR-204-3p的相对表达水平明显升高(P <0.05)。免疫组织化学结果显示:与对照组相比矽肺模型组肺组织中Fibronectin和Collagen Ⅰ的表达水平均升高(P <0.05),与矽肺模型组相比,miR-204-3p干预组大鼠肺组织中Fibronectin和Collagen Ⅰ的相对表达水平明显降低(P <0.05)。RT-qPCR和Western blot结果显示:与对照组相比矽肺模型组大鼠肺组织中纤维化因子Fibronectin、Vimentin、Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ的基因相对表达水平和蛋白相对表达水平上升(P <0.05),与矽肺模型组相比,miR-204-3p干预组大鼠肺组织中纤维化因子Fibronectin、Vimentin、Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ的基因相对表达水平和蛋白相对表达水平均有所降低(P <0.05)。[结论]二氧化硅粉尘可引起大鼠肺组织纤维化,体内过表达miR-204-3P可以减轻二氧化硅粉尘引起的大鼠矽肺纤维化。

2021年宁夏重点行业工作场所职业病危害因素检测现况分析

目的了解2021年宁夏重点行业工作场所职业病危害因素接触与检测现况。方法对2021年宁夏回族自治区内正常生产经营的重点行业进行调查和现场检测,采用统一编制的《工作场所职业病危害因素监测项目调查表》收集用人单位的劳动者接触职业病危害因素情况,现场检测严格按照国家标准进行采样,采样结果与国家现行标准进行比较,判定是否超标。结果宁夏重点行业用人单位主要分布在银川市、石嘴山市和吴忠市,占比分别为25.08%、28.76%和25.75%;企业规模以小型企业为主,占比为51.17%;2021年宁夏重点行业劳动者接触职业病危害因素人数最多的地区为银川市,为40576人;接触人数最多的行业为煤炭开采和洗选业,为27331人;接触人数最多的企业规模为大型企业,为44436人;粉尘与物理因素的超标率较高,岗位超标率分别16.43%和13.18%,场所超标率分别为12.20%和13.52%。结论宁夏回族自治区小微企业数量较多但接触危害因素劳动者主要分布在大型企业,今后职业病危害因素的治理工作应主要放在银川市、煤炭开采和洗选业以及大型企业。职业病危害因素则应以粉尘的治理为主。