去泛素化酶OTUD3调控胆固醇酯化酶SOAT1蛋白稳定性的机制

目的鉴定胆固醇酯化酶甾醇O-酰基转移酶1(SOAT1)的去泛素化酶(DUB),探讨维持SOAT1蛋白稳定性的分子机制。方法采用Western blot方法检测多种肝癌细胞系中SOAT1的表达,在SOAT1表达较低的肝癌细胞系HCCLM3中加入蛋白酶体抑制剂MG132后检测SOAT1蛋白水平的变化,筛选人源卵巢肿瘤相关蛋白酶(OTU)家族中与SOAT1相互作用的DUB分子,通过泛素化实验检测其对SOAT1的去泛素化效应。结果SOAT1蛋白稳定性受到泛素-蛋白酶体系统的调控,对人源OTU家族进行无偏性筛选,显示OTUD3可以与SOAT1特异性结合,通过去除SOAT1的多聚泛素化,维持SOAT1的蛋白稳定性。结论在肝癌细胞中OTUD3是SOAT1的一个DUB,参与调控SOAT1蛋白稳定性。