基于核磁共振技术的小青龙汤证的证本质研究

目的通过分析各组大鼠尿液代谢物图谱,发现小青龙汤证的生物标志物,为临床诊断和治疗提供客观依据。方法对正常组和模型组大鼠的尿液进行核磁共振氢谱检测,图谱经Me-stRec预处理和积分后,所得数据用SIMCA-P+进行主成分分析(PCA),得到相应的散点图和载荷图,进行比较后找出差异性代谢物。结果与正常组比较,模型组中肌酸酐、胍基乙酸、三甲胺、牛磺酸、尿囊素等代谢物含量升高(P<0.05),琥珀酸、α-酮戊二酸、乳酸、甘氨酸、甲基烟碱等代谢物含量降低(P<0.05)。结论模型组大鼠尿液中与能量代谢有关的小分子化合物与正常组有明显差别,提示基于核磁共振技术和模式识别的代谢组学方法可以揭示小青龙汤证的证本质。

代谢组学技术在中医证型研究中的应用

1中医＂证＂的概念及现状 中医学理论体系的主要特点,一是整体观念,一是辨证论治。辨证论治是中医学认识疾病和处理疾病的基本原则,中医治病讲理、法、方、药,其中的理就指的是证。证指的是在内外致病因素作用下,机体内外环境各系统之间相互关系发生紊乱在机体的综合反应,是反映疾病处于某一阶段病因、病性、病位、病势等病理要素的综合性诊断概念,

小青龙汤证大鼠血液的代谢组学研究

目的:通过分析各组大鼠血液代谢物图谱,发现小青龙汤证血液的生物标志物,为临床诊断和治疗提供客观依据。方法:对空白对照组、模型组和小青龙汤组大鼠的尿液进行核磁共振氢谱检测,图谱经MestRec预处理和积分后,所得数据用SIMCA-P+进行偏最小二乘法判别分析分析(PLS-DA),得到相应的散点图和载荷图,进行比较后找出差异性代谢物。结果:空白对照组与模型组比较,模型组中肌酸、3-羟基丁酸、牛磺酸、天冬氨酸、瓜氨酸、谷氨酰胺升高(P<0.05),乳酸、醋酸(δ1.9)、酪氨酸、脯氨酸、甘氨酸降低(P<0.05),小青龙汤组经治疗后肌酸、牛磺酸仍升高,但和模型组相比有所降低(P<0.05),酪氨酸、脯氨酸仍低于空白对照组,但较模型组升高,瓜氨酸和谷氨酰胺在较模型组更高(P<0.05)。结论:血液中的代谢标志物主要与能量代谢紊乱、机体免疫力以及机体应激有关,尤其与能量代谢和免疫相关的代谢物变化较明显。

小青龙汤证大鼠尿液的代谢组学研究

目的:运用代谢组学核磁共振技术找出小青龙汤证大鼠尿液中的生物标志物,为小青龙汤证的临床诊断和治疗提供客观依据。方法:对空白对照组、模型组和小青龙汤组大鼠的尿液进行核磁共振氢谱检测,经MestRenova预处理和积分后,再用SIMCA-P+进行偏最小二乘法判别分析,得到相应的散点图和载荷图,进行比较后找出差异性代谢物。结果:与空白对照组比较,模型组中肌酸酐、胍基乙酸、三甲胺、牛磺酸、尿囊素等代谢物含量升高,琥珀酸、2-酮戊二酸、乳酸、甘氨酸、甲基烟碱等代谢物含量降低。用药后小青龙汤组中肌酸酐、三甲胺、尿囊素、牛磺酸与空白对照组比较明显升高,但与模型组比较明显降低;乳酸与空白对照组比较明显降低,但与模型组比较明显升高,胍基乙酸、2-酮戊二酸、N-甲基烟碱的改变则无统计学意义。结论:经分析可以看出,所找出的这些物质主要与能量代谢、炎症反应和免疫抵抗力有关,与能量代谢相关的物质变化尤为明显。

基于气相色谱-质谱技术的小青龙汤证大鼠血液代谢组学研究

目的采用气相色谱-质谱法(GC-MS)测定小青龙汤证大鼠血液中内源性代谢物,为小青龙汤证本质研究提供依据。方法将36只雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组10只、模型组13只和小青龙汤组13只,模型组和小青龙汤组制作外寒内饮(小青龙汤证)模型,小青龙汤组灌胃小青龙汤,空白对照组不作任何处理。15 d后,3组大鼠腹主动脉取血,进行GC-MS检测。图谱经预处理后采用偏最小二乘法-判别分析进行多元统计分析。结果发现13种小分子标志物,分别为乳酸、3-羟基丁酸、甘氨酸、丝氨酸、赖氨酸、葡萄糖、花生四烯酸等代谢物质。结论乳酸、甘氨酸等标记物集中表现为能量代谢、免疫功能和炎症反应,为小青龙汤证本质研究提供了物质基础。

基于GC/MS技术的小青龙汤证大鼠尿液代谢物的动态分析

目的:采用GC-MS技术检测造模及治疗前后大鼠的尿液并进行比较,寻找小青龙汤证的小分子标记物。方法:随机将36只雄性Wistar大鼠分为空白对照组10只、模型组和小青龙汤组各13只,在饲养1 w后,制作小青龙证模型。分别于造模前、造模后和灌药后,即在第7天、第36天及第51天取大鼠尿液进行GC/MS技术检测。通过对尿液数据进行PLS-DA分析,得到散点图和载荷图,结合NIST软件谱库及相关文献,找到与小青龙汤证相关的小分子标记物。结果:找出乳酸、甘氨酸、松醇、反丁烯二酸、脯氨酸、山梨醇、尿苷、琥珀酸、亚麻酸、丙氨酸等10个显著性标记物,这些标记物在大鼠尿液动态观察过程中发生了明显的变化。结论:小青龙汤证的病理机制主要与能量代谢、机体免疫和炎症反应三方面相关。标记物为小青龙汤证本质的研究奠定了物质基础。

基于核磁共振的小青龙汤证大鼠肺组织的代谢组学研究

目的:通过分析各组大鼠肺组织代谢物图谱,发现小青龙汤证肺组织的生物标志物,为临床诊断和治疗提供客观依据。方法:对空白对照组、模型组和小青龙汤组大鼠的肺组织进行核磁共振氢谱(1HNMR)检测,图谱经MestRec预处理和积分后,所得数据用SIMCA-P+进行PLS-DA分析,得到相应的散点图和载荷图,进行比较后找出差异性代谢物。结果:模型组与空白对照组相比,亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸、组氨酸、丙氨酸和牛磺酸增高(P<0.05),赖氨酸、苏氨酸和甲硫氨酸降低(P<0.05),醋酸无统计学意义。小青龙汤组与空白对照组、模型组相比,较空白对照组缬氨酸、精氨酸、牛磺酸、丙氨酸和组氨酸仍增高,较模型组缬氨酸、牛磺酸和丙氨酸有所降低,精氨酸比模型组中的含量还高;苏氨酸和甲硫氨酸较空白对照组低,较模型组高。结论:所找出的物质主要与能量代谢、炎症反应和免疫抵抗力有关,但与炎症及免疫相关的物质变化较明显。