氟维司群注射液前处理及细菌内毒素检查方法研究

目的建立氟维司群注射液细菌内毒素的检查方法。方法取样品0.5 mL,加细菌内毒素检查用水(BET用水)5 mL,2000 r/min振荡5 min后,3000 r/min离心5 min,取水相,用BET用水稀释至所需倍数系列溶液。按2020年版《中国药典(四部)》通则1143细菌内毒素检查法,分别采用凝胶法、动态显色法、动态浊度法检测样品中的内毒素,考察水萃取液(水相溶液)的干扰及内毒素回收比。结果水相溶液稀释至2倍及以上时对鲎试剂均无干扰;外加20 EU/mL内毒素时回收比均在50%~200%范围内。结论氟维司群注射液经水萃取后,采用凝胶法、动态显色法、动态浊度法进行细菌内毒素检查均可行。

重组C因子法用于维生素B_(6)注射液细菌内毒素检测的研究

目的:探讨重组C因子法用于维生素B_(6)注射液中细菌内毒素检测的可行性。方法:分别使用凝胶法和重组C因子法对维生素B_(6)注射液中细菌内毒素的检测进行方法学研究。结果:凝胶法干扰试验结果显示,不同厂家生产的维生素B_(6)注射液,以及使用不同厂家的鲎试剂,干扰试验结果差异较大。重组C因子法用于维生素B_(6)注射液细菌内毒素检测的结果显示,样品稀释50~400倍时,回收率均符合规定。结论:使用凝胶法对维生素B_(6)注射液中的细菌内毒素进行检测可能存在较大干扰;经过方法学研究,重组C因子法可以用于维生素B_(6)注射液中细菌内毒素的检测。

积雪草酸对高脂血症金黄地鼠的血脂调节及肝脏保护作用研究

目的研究积雪草酸(asiatic acid,AA)对饮食性高脂血症金黄地鼠的血脂调节和肝脏保护作用,探讨其降脂机制。方法将48只叙利亚金黄地鼠随机分为6组,分别为正常对照组、高脂血症模型组、阳性对照药血脂康组(250 mg/kg)、AA低剂量组(8 mg/kg)、AA中剂量组(16 mg/kg)和AA高剂量组(32 mg/kg)。正常组给予普通饲料,其余各组均给予高脂饲料造模,自由进食和饮水。同时灌胃给药,正常组和模型组按体重给予溶媒(Tween 80:去离子水=1∶19),其余各组给予相应受试药物。4周后测定血清总胆固醇(total cholestrol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白(10w-density lipoprotein)、高密度脂蛋白(high-density lipoprotein)、谷草转氨酶(aspartate transaminase)和谷丙转氨酶(alanine aminotransferase)水平,肝脏超氧化物歧化酶(superoxide dismutase)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase)水平以及观察肝脏结构变化。同时采用实时荧光定量PCR方法考察肝脏中卵磷脂胆固醇酰基转移酶(lecithin cholesterol fatty acyl transferase)和B类Ⅰ型清道夫受体(class B typeⅠscavenger receptor)mRNA的表达。结果与模型组相比,除AA高剂量组外,其余各给药组TC、TG、LDL-C、TC/HDL、AST、ALT水平均显著降低,SOD活性及GSH-Px水平均显著升高(P<0.01)。HE染色结果显示AA给药后抑制了高脂血症金黄地鼠的肝脏脂肪性病变。荧光定量PCR结果显示AA各给药组金黄地鼠肝脏中LCAT和SR-BⅠmRNA表达水平增加。结论 AA可有效调节血脂,并通过降低AST、ALT水平和抗氧化作用减轻高脂血症金黄地鼠的肝脏损伤。AA的降血脂机制及保护肝脏作用,可能与其增强LCAT和SR-BⅠmRNA的表达有关。

注射用比伐芦定细菌内毒素检查法研究

目的建立注射用比伐芦定的细菌内毒素检查法。方法依据《中国药典》2020年版四部通则1143细菌内毒素检查法,采用凝胶法和光度法(动态显色法)进行试验。结果凝胶法在稀释至25倍时可排除抑制干扰。光度法在稀释至180倍时,回收率在104%~129%之间。3批样品的内毒素检查结果均符合规定。结论细菌内毒素检查法可用于注射用比伐芦定的质量控制。

外用联苯苄唑制剂对家兔皮肤刺激性研究

目的检测国内7个厂家外用联苯苄唑制剂对家兔皮肤刺激性。方法采用家兔多次皮肤刺激性试验,取7个厂家外用联苯苄唑制剂0.5 g分别涂抹于家兔完整皮肤和破损皮肤,持续7天,停药后观察3天,评价皮肤刺激性。结果7个厂家中有3个出现轻度皮肤刺激性,但停药后3天内均恢复正常。结论本次抽验的外用联苯苄唑制剂未见明显家兔皮肤刺激性。

双酚S的毒理学效应及其作用机制的研究进展

环境内分泌干扰物双酚S(bisphenol S,BPS)作为双酚A最普遍的替代物,已广泛应用于食品包装容器等塑料制品的生产制造中。研究发现,BPS对机体同样可产生负面影响,其应用安全性已引起越来越多的关注。本文对BPS的人群暴露风险及在食品中的污染现状进行总结,并对其一般毒性作用和对遗传物质、生殖发育、神经内分泌系统、物质代谢、循环和免疫系统等的影响以及与受体、酶等相互作用的机制进行概述,为评价BPS的健康危害和环境风险提供理论基础。

注射用美洛西林钠舒巴坦钠的细菌内毒素检查法研究

目的建立注射用美洛西林钠舒巴坦钠的细菌内毒素检查法。方法参照中国药典2010年版二部附录ⅪE细菌内毒素检查法进行试验。结果注射用美洛西林钠舒巴坦钠的最大不干扰浓度为5mg·m L-1,并确定其内毒素限值为0.05EU·mg-1。结论本品种可用细菌内毒素检查法代替家兔热原检查法,建议提高并统一其安全性检查标准。

细菌内毒素检测法用于枸橼酸焦磷酸铁溶液检测的可行性研究

目的:建立枸橼酸焦磷酸铁溶液的细菌内毒素检测方法。方法:按《中国药典》2015年版四部通则1143细菌内毒素检查法进行试验和结果判断,采用凝胶法,用不同厂家的鲎试剂对枸橼酸焦磷酸铁溶液3批样品进行干扰试验和细菌内毒素检查。结果:根据生产单位药品标准和临床实际应用情况,确定枸橼酸焦磷酸铁溶液的细菌内毒素限值为2EU·mL^(-1)。其最大不干扰浓度为0.17 mg·mL^(-1),可用灵敏度为0.06 EU·mL^(-1)及以上的鲎试剂检测其中的细菌内毒素。结论:枸橼酸焦磷酸铁溶液可进行细菌内毒素检测。

依诺沙星滴眼液渗透压测定

目的评价国内依诺沙星滴眼液的渗透压情况,为其现行标准的完善提供参考依据。方法采用冰点下降法对国内4家生产企业共50批样品进行渗透压考察,并考察其中部分批号的渗透压摩尔浓度稳定性。结果 50批样品的渗透压摩尔浓度在256~372m Osmol·kg^(-1)范围内,其中1家生产企业2批样品的渗透压摩尔浓度超出人眼舒适范围高限;相同生产企业不同批次样品的渗透压摩尔浓度在不同处理温度和时间下均较稳定。结论不同生产企业的渗透压摩尔浓度差别较大,建议增加渗透压摩尔浓度测定检查项,以保证依诺沙星滴眼液的产品质量。

注射用盐酸美法仑细菌内毒素检查法的研究

目的建立注射用盐酸美法仑的细菌内毒素检查法。方法按照《中国药典》2015年版四部通则1143细菌内毒素检查法进行试验和结果判断,对注射用盐酸美法仑进行干扰试验和细菌内毒素检查。结果根据临床实际应用情况,确定注射用盐酸美法仑的内毒素限值为1.0EU·mg^-1,其最大不干扰浓度为0.06mg·mL^-1,可用0.06EU·mL^-1以上的高灵敏度鲎试剂检测其中的细菌内毒素。按拟定标准检查,该品种3批样品的细菌内毒素检查结果均符合规定。结论本品种可采用细菌内毒素检查法控制其质量,以保证临床用药安全。

玛咖对维甲酸诱导的骨质疏松症的抑制作用

目的:探讨云南首次引种植物玛咖对维甲酸诱导的骨质疏松症的缓解作用。方法:维甲酸(70mg/kg)给药诱导15d建立SD大鼠骨质疏松模型,以云南种植玛咖块根的95%乙醇提取物(0.48 g/kg,0.24 g/kg,0.12 g/kg)给药至第30d,取腰椎骨切片做HE染色,测右股骨骨密度,测定血清中碱性磷酸酶(AKP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、及雌二醇(E2)活性。结果:云南种植玛咖的95%乙醇提取物3个剂量组(0.48 g/kg,0.24 g/kg,0.12 g/kg)均能够有效改善维甲酸引起的骨小梁稀疏、断裂及骨小梁间距变宽等现象,升高骨密度,降低碱性磷酸酶及抗酒石酸酸性磷酸酶活性并能显著升高雌二醇水平。结论:云南引种玛咖的95%乙醇提取物对维甲酸诱导的骨质疏松症有较好的抑制作用。

大麻素受体2在油酰乙醇胺抗动脉粥样硬化中的作用

观察PPAR-α激动剂油酰乙醇胺(N-oleoylethanolamine,OEA)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)抗炎相关受体大麻素受体2(cannabinoid receptor 2,CB2)的作用。从新生儿脐带中提取HUVECs,给予不同剂量OEA,RT-PCR及Western blotting检测CB2基因和蛋白表达。采用PPAR-α阻断剂MK886或CB2阻断剂AM630分别阻断PPAR-α或CB2信号通路,给药组和阻断剂组给予OEA,用TNF-α诱导模型组、给药组和阻断剂组炎症产生,Western blotting法测定各组VCAM-1蛋白表达或进行THP-1黏附实验。结果表明,OEA(10和50μmol·L-1)组的CB2表达上升,100μmol·L-1 OEA组较空白组无明显变化;OEA抑制VCAM-1蛋白表达及THP-1细胞黏附;分别给予PPAR-α、CB2阻断剂MK886/AM630后,OEA对VCAM-1及单核细胞黏附的抑制作用明显降低。结果提示,OEA可能通过激活CB2通路起到抗动脉硬化的作用。

双酚类化合物对BRL 3A肝细胞增殖、氧化应激和致突变作用研究

目的比较双酚A (BPA)、双酚S (BPS)、双酚F (BPF)和双酚AF (BPAF)对大鼠BRL 3A肝细胞增殖及氧化应激的影响,并研究其致基因突变作用。方法体外培养的BRL 3A肝细胞分别暴露于0、5、10、25、50、100、150和200μmol/L的BPA、BPS、BPF和BPAF,48 h后采用CCK-8法测定细胞存活率,计算半数抑制浓度(IC;);选择对细胞增殖有抑制作用的最低浓度,采用DCFH-DA荧光探针法检测BRL 3A肝细胞内活性氧(ROS)水平,反映细胞氧化应激程度;采用Ames试验研究1 000、200、40、8和1.6μg/皿的4种双酚类化合物对组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门菌(TA1535、TA97a、TA98、TA100和TA102)回变菌落的影响。结果 BPA和BPF在100~200μmol/L,BPAF在25~200μmol/L,肝细胞存活率随浓度增加而明显下降,BPS在5~200μmol/L,肝细胞存活率无明显变化;BPA、BPS、BPF和BPAF对BRL 3A肝细胞的IC;分别为131.7、>200、187.5和21.6μmol/L。BPS(100μmol/L)和BPAF(25μmol/L)未引起ROS水平明显变化;BPA (100μmol/L)和BPF (100μmol/L)显著升高ROS水平。Ames试验结果显示,4种双酚类化合物对TA1535、TA97a、TA98、TA100和TA102均未呈现致基因突变作用。结论 BPAF对BRL 3A肝细胞的毒性最大,BPS低剂量暴露的影响较小;双酚类化合物对肝细胞的毒性效应可能与诱导氧化应激有关。在本试验条件下,4种双酚类化合物均未呈现致基因突变性。