量子点荧光技术标记口腔鳞癌细胞中bcl-2的研究

【目的】利用量子点(QD)优良的光学性质对人舌癌Tca8113细胞内bcl-2进行特异性荧光标记,并与异硫氰酸荧光素(FITC)进行光稳定性比较。【方法】分别利用QD605nm和FITC,通过间接免疫荧光法,在激光共聚焦显微镜下观测人舌癌Tca8113细胞内bcl-2的表达,并激光连续照射1h,用激光共聚焦显微镜自带软件Leica Confocal Software测量量子点QD605nm和FITC的荧光信号强度。【结果】激光共聚焦显微镜下可见人舌癌Tca8113细胞内bcl-2明显表达,量子点QD605标记的荧光信号比FITC更具特异性,且激光连续照射1h,QD605nm标记的荧光未见明显衰减,而FITC标记的荧光1h内已基本淬灭。【结论】量子点荧光标记技术能对细胞内bcl-2进行标记,比传统的有机荧光具有更显著的优点。

两种粒径量子点在人舌鳞癌细胞中双色荧光成像的应用研究

目的研究粒径655 nm和525 nm的两种量子点(quantum dots,QDs)对人舌癌Tca8113细胞内2种热休克蛋白(heat shock protein,HSP)进行特异性荧光标记的成像效果和稳定性,为今后的连续动态观察提供实验依据。方法利用QD655nm和QD525nm,对人舌癌Tca8113细胞内HSP90蛋白和HSP70蛋白进行特异性双重荧光标记,激光连续照射2 420 391 ms,在共聚焦显微镜下同时观测人舌癌Tca8113细胞内的HSP90蛋白和HSP70蛋白表达及分布,用软件Leica Confocal Software测量量子点QD655nm和QD525nm的荧光信号强度变化。结果激光共聚焦显微镜下可见人舌癌Tca8113细胞内HSP90蛋白和HSP70蛋白均有明显表达,分别表现为红色和绿色荧光,两种蛋白重叠处呈黄色荧光,在激光连续照射中,两种荧光有所衰减,其中QD655nm的荧光强度值下降相对较快、幅度相对较大。结论量子点荧光标记技术能同时对人舌鳞癌细胞中HSP90蛋白和HSP70蛋白进行双重标记,而且QD655nm与QD525nm都具有较强的光稳定性,均可用于蛋白的长时间动态监测,其中QD525nm的稳定性更好。

血管化游离组织瓣移植在口腔颌面部缺损修复中的应用

目的:探讨血管化游离组织瓣移植在口腔颌面部缺损修复中的应用价值。方法:自2005年10月至2011年3月,应用119块血管化游离组织瓣修复118例口腔颌面部缺损患者,分析选择游离组织瓣的类型、受区血管和组织瓣成活情况,并探讨影响血管化游离组织瓣成功率的相关因素。结果:119块血管化游离组织瓣为游离前臂皮瓣58块,游离腓骨肌皮瓣50块,游离股前外侧皮瓣10块,游离背阔肌皮瓣1块;口腔颌面部缺损部位为舌缺损49例,颊及口咽缺损10例,口底缺损7例,下颌骨缺损38例,上颌骨缺损12例,下颌骨和口咽复合型缺损1例,偏侧颜面萎缩1例。117块游离组织瓣成活,1块游离腓骨肌皮瓣和1块游离股前外侧皮瓣坏死,游离组织瓣临床成功率为98.3%;术后血管危象发生率为4.2%(5/118),抢救成功率60%。结论:合理地应用血管化游离组织瓣移植修复口腔颌面部缺损,能较好地恢复患者的面部外形和口腔功能,且较为安全可靠,值得临床推广应用。

京尼平交联丝素蛋白—壳聚糖缓释微球的制备与表征

目的研究不同浓度京尼平和不同丝素蛋白（silk fibroin，SF）与壳聚糖（chitosan，CS）比例制备的SF—CS复合微球包载和缓释牛血清白蛋白（bull serum albumin，BSA）的效能。方法无机乳化交联法制备SF-CS微球，取其中SF：CS=1：1比例的微球包载BSA，并与单纯的CS微球进行对比，考察微球的包载效能和缓释效能。扫描电镜观察微球表面形态，激光粒度分析仪测定微球直径，X射线衍射、傅里叶红外光谱及热重分析对微球表征进行分析，BCA法测定微球的包封率、载药率和累积缓释率。结果以m（CS）：m（SF）为1：0．5和京尼平0．1g或0．5g、m（CS）：m（SF）为1：1和京尼平0．05g或1g、m（CS）：m（SF）为1：2和京尼平0．5g，制备的微球形态较为规则、圆滑，粒径分布在70～150μm。以M（CS）：m（SF）为1：1和京尼平0．05g，按投药量10mg、20mg或50mg的BSA制备微球，包封率分别为（50．16±4．32）％、（56．58±3．58）％和（42．19±7．47）％，傅里叶红外光谱、X射线衍射和热重分析的结果证明SF和CS发生交联，BSA、CS和SF间没有发生任何化学反应。投药量10mg、20mg和50mg组微球缓释结果显示，第1天分别爆释总量的（30．79±3．43）％、（34．41±4．46）％和（41．75±0．96）％，21d累积释放（75．20±2．52）％、（79．16±4．31）％和（89．04±4．68）％，以同样方法制备的BSA投入量为10mg纯CS微球，第1天爆释总量的（39．53±1．76）％，21d爆释（83．57±2．33）％。结论SF-CS复合微球比单纯的CS微球有更佳的缓释效能，可能是一种有效的药物转运系统。

量子点荧光探针在人舌鳞状细胞癌组织中的应用研究

目的通过免疫荧光技术,利用量子点荧光探针在人的舌鳞状细胞癌组织中检测特定蛋白,探讨量子点荧光探针在人舌鳞状细胞癌组织中的应用。方法相同粒径的量子点通过间接免疫荧光技术分别对人舌鳞状细胞癌组织中的P53及Bcl-2蛋白进行特异荧光标记,荧光显微镜观察蛋白定位表达;不同粒径的量子点通过间接免疫荧光技术,在同一张舌鳞状细胞癌组织切片上分别标记P53蛋白与Bcl-2蛋白,并对其定位表达进行观察。结果相同粒径的量子点荧光探针可分别与组织中的P53、Bcl-2蛋白结合,在紫外荧光激发下发出特异红色荧光,P53蛋白结合物主要分布于细胞核;Bcl-2蛋白结合物主要分布于细胞质;不同粒径的量子点荧光探针在同一张组织切片上可同时对P53蛋白与Bcl-2蛋白进行标记,在紫外荧光激发下2种蛋白结合物发出2种不同颜色的荧光形成鲜明对比,显示量子点荧光探针标记的蛋白定位准确,特异性高。结论量子点荧光探针可应用于人舌鳞状细胞癌组织中的2种蛋白的特异免疫荧光标记。

涡轮机联合微创拔牙器械在拔除低位阻生智齿中的临床应用

目的比较涡轮机联合微创拔牙器械法与传统拔牙法在下颌低位阻生智齿拔除术中的临床应用,比较分析其优缺点。方法选择需要拔除的下颌低位阻生智齿82例,按照随机分配原则分为实验组与对照组,每组41例。实验组为微创拔牙器械结合高速涡轮牙钻拔牙法,对照组为传统拔牙器械拔牙法。比较两组的断根率、拔牙窝不完整率、牙科畏惧症发生率、手术时间以及术后张口受限度方面的差异。结果实验组均为一期愈合,而对照组有4例因感染致延期愈合;实验组的断根率为7.3%,而对照组为22%;实验组拔牙窝不完整0例,对照组拔牙窝不完整18例;实验组的牙科畏惧症发生2例,对照组发生5例。与对照组相比,实验组的手术时间明显缩短,术后张口受限度更轻,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论与传统拔牙法相比,涡轮机联合微创拔牙器械法在下颌低位阻生智齿拔除术中可达到无痛、安全以及微创的目的,具有较好的临床应用前景。

量子点对口腔鳞癌细胞活性的影响

目的探讨量子点对口腔鳞癌活细胞的影响。方法通过MTT法检测不同浓度量子点对口腔鳞癌细胞活性的影响。结果在4、8h时各实验组与空白对照组比较无统计学意义(P>0.05);在12、16及20h时,除量子点终浓度为20nmol/L组与空白对照组比较无统计学意义(P>0.05),其他各组与空白对照组比较均有统计学意义(P<0.05)。结论量子点浓度低于20nmol/L时,对口腔鳞癌细胞活性无明显的影响。

口腔鳞癌细胞中bcl-2、bax的量子点双标免疫荧光成像研究

目的:利用量子点对口腔鳞癌细胞内bcl-2、bax蛋白进行双标免疫荧光成像研究。方法:利用量子点QD605和QD545通过双标免疫荧光法,在激光共聚焦显微镜下对人舌癌Tca8113细胞内bcl-2、bax蛋白同时观察识别。结果:不同粒径量子点可同时对舌癌细胞bcl-2、bax蛋白特异性识别,在激光共聚焦显微镜下观察到舌癌细胞bcl-2和bax蛋白高表达。QD605标记的bcl-2蛋白表现为红色荧光,QD545标记的bax蛋白表现为绿色荧光,2种蛋白在细胞内同一位置重叠呈现黄色荧光。激光连续照射1 h,3种颜色的荧光均未明显衰减。结论:量子点能同时对细胞内的2种蛋白进行双标免疫荧光成像。

下颌骨喙突骨母细胞瘤1例

患者,男,19岁,因左下颌肿痛伴张口受限1年余于2011年3月5日入院。1年前,患者自觉左下颌区肿胀,疼痛,张口疼痛加重,并出现张口困难,曾于广东省中医院进行诊治,具体诊疗不详,给予药膏敷左面部1年,治疗效果不明显。期间2010年9月左下颌区再次肿胀,曾在当地县级医院行输液治疗,肿胀略有好转但无法根治。专科检查：患者左面部及左下颌骨肿胀,触痛,

应用蛋白质芯片技术筛选人舌鳞癌细胞株差异性炎症因子的初步研究

目的研究应用蛋白质芯片(抗体芯片)技术筛选、分析人舌鳞状细胞癌细胞株中差异性炎症因子的效果,为进一步探讨口腔癌与炎症的关系奠定基础。方法体外培养人舌鳞癌细胞株UM-1、CAL-27、Tca-8113和人正常口腔黏膜上皮细胞,消化后分别提取胞内、胞外蛋白,上芯片孵育,封闭,清洗。采用激光扫描仪扫描芯片,Axon GenePix Pro6.0软件提取芯片数据,对获得的80种炎症因子表达数据采用AAH-CYT-G5软件分析,上调因子信号值以大于200、比值大于2.0为纳入标准;下调因子信号值以大于200、比值小于0.66为纳入标准,分别对3种人舌鳞癌细胞株(UM-1、CAL-27、Tca-8113)与人正常口腔黏膜上皮细胞,以及高侵袭性细胞株(UM-1、CAL-27)与低侵袭性细胞株(Tca-8113)进行两两比较,筛选出差异性炎症因子。挑选3种显著差异性炎症因子,用酶联免疫吸附法再次检测其蛋白表达,所得结果用单因素方差分析进行统计学分析,进一步验证芯片法所获得的结果。结果根据纳入标准,从检测的80种因子中筛选出有表达的炎症因子9个,包括干扰素诱导蛋白10(inter-feron inducible protein10,IP-10)、巨噬细胞炎症蛋白-1β(macrophage inflammatory protein1β,MIP-1β)、巨噬细胞炎症蛋白-3α(macrophage inflammatory protein-3α,MIP-3α)、骨保护素蛋白(osteoprotegerin,OPG)、调节活化蛋白(regulated upon activation normal T-cell expressed and secreted,RANTES)、白细胞介素1β(interleukin1β,IL-1β)6种舌鳞癌细胞株中高表达的细胞因子,及单核细胞趋化因子4(monocyte chemoattractant protein4,MCP-4)、胰岛素样生长因子结合蛋白4(insulin-like growth factor binding protein-4,IGFBP-4)、转化生长因子-β3(transforminggrowth factor-β3,TGF-β3)3种舌鳞癌细胞株中低表达的细胞因子。鳞状细胞癌细胞和正常口腔鳞状上皮细胞之间比较,胞内IL-1β呈高表达,MCP-4呈低表达,胞外OPG呈高表达;高、低侵袭性细胞株之间比较,胞内RANTES呈高表达,IGFBP-4、TGF-β3呈低表达,胞外IP-10、MIP-1β、MIP-3α呈高表达。酶联免疫吸附法检测发现UM-1和CAL-27胞外IP-10、MIP-1β、MIP-3α的表达量和Tca-8113相比呈高表达,差异有统计学意义(P<0.05)。其结果与芯片筛选结果一致。结论蛋白质芯片技术能够较为准确地筛选出不同舌鳞癌细胞株之间差异性炎症因子,这些差异性炎症因子可能与肿瘤细胞的生物学行为有一定的联系。

α亚族趋化因子受体3在人舌鳞癌细胞株的表达及其配体干扰素诱导蛋白-10对CAL-27细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨α亚族趋化因子受体3(CXC-chemokine receptor 3,CXCR3)在不同人舌鳞癌细胞株的表达以及其配体干扰素诱导蛋白-10(interferon induced protein 10,IP-10)对人舌鳞癌细胞株CAL-27增殖和凋亡的影响。方法采用蛋白印迹法和免疫荧光染色对3种人舌鳞癌细胞株(CAL-27、UM-1、Tca-8113)IP-10的相应受体CXCR3的表达进行检测。CAL-27细胞被分为3个实验组和1个对照组,3个实验组根据IP-10的刺激浓度,分为10 ng/mL组、20 ng/mL组、40 ng/mL组,对照组不予刺激。12 h、24 h、48 h时检测4组细胞的增殖;24 h时用流式细胞仪检测细胞的凋亡。结果 CXCR3在3种人舌鳞癌细胞株均有表达,并且CXCR3在3株细胞的胞膜及胞质内均有染色。和对照组相比,12 h、24 h时,3种浓度的IP-10均能够促进CAL-27细胞增殖(P<0.05);在48 h时,只有40 ng/mL的IP-10能够促进CAL-27细胞增殖(P<0.05),10 ng/mL、20 ng/mL的IP-10对CAL-27细胞的增殖无促进作用(P>0.05)。在24 h时,对照组、10 ng/mL组、20 ng/mL组和40 ng/mL组的细胞凋亡率分别为(0.053 3±0.472 6)%、(3.236 7±0.940 0)%、(4.516 7±1.115 4)%和(3.363 3±0.571 2)%,3种浓度IP-10均能够促进CAL-27细胞的凋亡(P<0.05),但3个实验组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论CXCR3在3种人舌鳞癌细胞株的胞膜及胞质内均有表达;IP-10既能促进CAL-27细胞的增殖,又能促进其凋亡。随着时间的延长,IP-10的促增殖作用减弱,而这种减弱可能是由IP-10的促凋亡作用的逐步发挥所引起的。

应用量子点荧光探针检测裸鼠舌癌组织中bcl-2表达

目的探讨应用量子点荧光探针检测裸鼠舌鳞癌移植瘤组织中bcl-2蛋白的可行性及其研究价值。方法 10只BALB/c-nu裸鼠皮下接种舌鳞癌Tca8113细胞悬液,待瘤体长至约1cm3时处死裸鼠,取瘤组织制成石蜡包埋组织切片和冰冻切片,经病理诊断证实为瘤组织后,应用量子点荧光探针通过间接免疫荧光法标记,在荧光显微镜下观察组织切片中的bcl-2蛋白,并与免疫组织化学检测的bcl-2蛋白进行比较。结果量子点荧光探针可分别与石蜡和冰冻组织切片中的bcl-2蛋白结合,在紫外荧光激发下发出特定荧光,主要分布于细胞浆,与免疫组织化学检测的bcl-2蛋白定位相同。结论量子点荧光探针可应用于裸鼠舌鳞癌移植瘤组织中检测特定蛋白。

以量子点为载体转染Survivin siRNA至人舌鳞癌Tca8113细胞中的实时观察

目的通过量子点(quantum dot,QD)为载体将靶向Survivin基因的siRNA转染至人舌鳞癌Tca8113细胞中,并通过激光共聚焦显微镜实时观察转染过程,以期在肿瘤治疗的同时对其进行实时影像学观察。方法表面带正电荷的水溶性量子点,通过正负电荷的吸引力与表面带负电荷的Survivin siRNA以1∶2比例结合成QDsiRNA复合物。QD-siRNA复合物通过内吞作用进入人舌鳞癌Tca8113细胞,用激光共聚焦显微镜对QD-siRNA复合物转染至细胞中的过程和分布情况进行实时动态观察。结果激光共聚焦显微镜观察显示QD成功将Survivin siRNA转染至人舌鳞癌Tca8113细胞中,QD-siRNA复合物加入培养皿15 min后开始吸附至细胞膜上,并慢慢穿透胞膜到达胞浆,直至6 h可见QD-siRNA复合物充分进入细胞,QD主要分布在细胞质中,而siRNA在细胞质和细胞核中均有分布。来自QD的红色荧光强度大于来自siRNAFAM的绿色荧光。结论激光共聚焦显微镜观察QD成功将Survivin siRNA转染至人舌鳞癌Tca8113细胞中,QD相对于羧基荧光素更适于进行细胞动态观察。

量子点联合Cy5双重荧光标记人舌鳞状细胞癌细胞蛋白质的应用研究

目的比较以量子点(quantum dots,QDs)与Cy5荧光染料对人舌鳞癌细胞株Tca8113细胞中热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)和survivin蛋白质进行双重免疫荧光标记时蛋白质的分布及荧光的稳定性。方法以QDs和Cy5荧光染料对Tca8113细胞内HSP70和survivin蛋白质进行双重免疫荧光标记,在激光共聚焦显微镜下同时观察Tca8113细胞内的HSP70和survivin蛋白质表达及分布。激光连续照射2 420 391 ms,用激光共聚焦显微镜自带软件Leica Confocal Software测量QDs和Cy5的荧光信号强度变化。结果激光共聚焦显微镜下可见Tca8113细胞内HSP70和survivin蛋白质均有明显表达,分别表现为绿色和红色荧光,其中两种蛋白质重叠处呈黄色荧光。激光连续照射2 420 391 ms,QDs标记的绿色荧光未见明显衰减,而Cy5荧光染料标记的红色荧光基本淬灭,随着Cy5荧光的淬灭,绿红黄三色通道下所见的红绿黄3种颜色的荧光也逐渐消退直至变成单色的绿色荧光。结论 QDs对光漂白的抵抗能力强,比Cy5荧光染料具有更高的光稳定性,更加适用于细胞内蛋白质的长时间动态监测的研究。

Foxp3在4-亚基硝氧喹啉诱发大鼠舌黏膜癌变中的表达

目的观察叉状头转录因子P3(forkhead box P3 transcription factor,Foxp3)基因在4-亚基硝氧喹啉(4-ni-troquinoline-1-oxid,4NQO)诱发大鼠舌黏膜癌变过程中转录水平的动态变化,探讨其在大鼠舌黏膜癌变中的作用。方法应用本课题组前期实验获得的4NQO诱发的大鼠舌黏膜癌变标本24例,包括正常黏膜组织(正常对照组)、异常增生组织(异常增生组)、鳞状细胞癌组织(鳞癌组)各8例,采用实时荧光定量PCR技术检测Foxp3mRNA表达水平,并进行统计学分析。结果 Foxp3 mRNA的相对表达量在正常对照组中为1.78±0.76,异常增生组中为3.58±1.00,鳞癌组中为6.06±2.54。鳞癌组的Foxp3 mRNA相对表达量与正常对照组之间的差异有统计学意义(P=0.005),异常增生组与正常对照组之间的Foxp3表达水平差异有统计学意义(P=0.004),而鳞癌组与异常增生组相比,Foxp3 mRNA的表达水平差异无统计学意义(P=0.081)。结论在4NQO诱发大鼠舌黏膜癌变过程中,Foxp3基因转录水平在异常增生组织和鳞状细胞癌组织中升高,提示Foxp3基因转录水平的变化可能与大鼠舌黏膜癌变过程相关。

大鼠舌黏膜癌变中转化生长因子-β和叉状头转录因子P3的表达变化及相关性研究

目的观察在大鼠舌黏膜癌变过程中转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)和叉状头转录因子P3(forkhead box P3 transcription factor,FOXP3)的mRNA表达变化情况及两者的相关性,初步探讨两者在大鼠舌黏膜癌变中的作用。方法应用前期实验获取的4-亚基硝氧喹啉(4-nitroquinoline-1-oxid,4NQO)诱发大鼠舌黏膜癌变标本,包括正常黏膜组织(对照组)、异常增生组织(异常增生组)和鳞癌组织(鳞癌组)各8例。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测各标本中TGF-β、FOXP3 mRNA表达水平,并对二者表达的相关性进行分析。结果 TGF-β、FOXP3的mRNA相对表达量在对照组中分别为3.0±1.6、1.8±0.8,异常增生组中分别为5.2±1.6、3.6±1.0,鳞癌组中分别为13.6±3.0、6.1±2.5。与对照组相比,TGF-β、POXP3在异常增生组中表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);在鳞癌组中两者的表达水平进一步增强。随病理分级增加,TGF-β、POXP3的表达呈现递增趋势。并且,在异常增生和鳞癌组中,TGF-β与FOXP3 mRNA表达呈正相关关系(相关系数r=0.686,P<0.001)。结论 TGF-β、POXP3基因表达异常可能与4NQO诱发的大鼠舌黏膜癌变相关。

长链非编码RNA在舌鳞癌中的表达谱特征

【目的】观察长链非编码RNA(lncRNA)在正常舌组织和舌鳞癌组织中表达谱的变化。【方法】利用lncRNA表达谱芯片检测技术,筛查3例舌鳞癌组织及3例正常舌组织中lncRNA表达谱的变异,通过对原始数据进行预处理达到均一化后,确定舌鳞癌组织中2倍以上变化并有显著差异(P<0.05)的lncRNA为差异表达lncRNA,筛选出差异表达的lncRNA;分别在scc-9、cal-27、um-1和um-2共4种人舌鳞癌细胞和1种人正常舌细胞以及在35例舌鳞癌组织和12例正常舌组织中,利用实时荧光定量逆转录-多聚酶链反应(qRT-PCR)对芯片结果进行验证;对筛选所得的部分差异表达的lncRNA,利用lncRNA与mRNA特异性表达的标准化信号强度,构建基因共表达网络,并进行分析。【结果】芯片共筛选差异表达lncRNA 3590条,其中上调的共1785条,降低的共1805条;选取其中部分lncRNA,qRT-PCR进一步证实了芯片结果的准确性;共表达网络构建提示某些lncRNA可能在参与舌鳞癌发生发展过程中发挥重要调控作用。【结论】与正常舌组织比较,舌鳞癌组织lncRNA表达谱发生显著变化,提示差异表达的lncRNA可能与舌鳞癌的多种恶性表型有着密切联系。

巨噬细胞炎症蛋白-1β对人舌鳞癌细胞CAL-27增殖和凋亡的影响

目的探讨β亚族趋化因子受体5(CCR5)在不同人舌鳞癌细胞株的表达情况以及其配体巨噬细胞炎症蛋白-1β(MIP-1β)对人舌鳞癌细胞株CAL-27增殖和凋亡的影响。方法采用蛋白印迹法和免疫荧光染色对3种人舌鳞癌细胞株(CAL-27、UM-1、Tca-8113)MIP-1β的相应受体CCR5的表达进行检测;根据MIP-1β刺激浓度的不同,细胞被随机分为4组:0 ng/m L组(对照组)、10 ng/m L组、20 ng/m L组、40 ng/m L组。用CCK-8试剂盒(Cell Counting Kit-8)检测MIP-1β在刺激12、24、48 h时,对CAL-27细胞增殖的影响;实验分组同前,分别用0、10、20、40 ng/m L IP-10处理24 h后收集细胞,用Annexin V/PI双染流式细胞仪检测CAL-27细胞的凋亡情况。结果 CCR5在3种人舌鳞癌细胞株均有表达,并且CCR5在3株细胞的胞膜及胞质内均有染色;和对照组相比,MIP-1β对CAL-27细胞有促进增殖的作用。在12 h、24 h时,3种浓度的MIP-1β均能够促进CAL-27细胞增殖(P<0.05);48 h时,10 ng/m L、20 ng/m L的MIP-1β均能够促进CAL-27细胞增殖(P<0.05),但40 ng/m L的MIP-1β对CAL-27细胞的增殖无影响(P>0.05);在24 h时,40 ng/m L MIP-1β组的细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05),而10 ng/m L、20 ng/m L MIP-1β组细胞凋亡率和对照组之间均无显著差异(P>0.05)。结论 CCR5在3种人舌鳞癌细胞株的胞膜及胞质内均有表达;MIP-1β对CAL-27细胞有促进增殖的作用,但相对较高浓度的MIP-1β对CAL-27细胞的凋亡也有促进作用。随着较高浓度MIP-1β作用时间的延长,促增殖作用减弱,而这种减弱可能是由MIP-1β的促凋亡作用的逐步发挥所引起的。

FRMD4A在舌鳞状细胞癌中的表达及意义

目的观察FRMD4A在口腔舌鳞状细胞癌(简称鳞癌)中的表达情况,探讨其在舌鳞癌发生发展中的作用。方法实时定量qRT-PCR检测10例舌鳞癌组织和相应10例癌旁正常舌组织中FRMD4A mRNA的表达;免疫组化检测FRMD4A蛋白在78例舌鳞癌、15例舌白斑和15例癌旁正常组织中的表达情况;t检验分析FRMD4A mRNA表达差异,2检验分析FRMD4A蛋白表达情况与临床病理特征之间的关系。结果 FRMD4A mRNA的表达在舌鳞癌组织中显著高于癌旁正常舌组织;FRMD4A蛋白的表达在舌鳞癌组织中明显高于舌白斑组织和癌旁正常组织;阳性表达主要在基底层,随肿瘤恶性程度增加,有向棘层扩散的趋势;FRMD4A蛋白高表达多出现于发生淋巴结转移和TNM分期晚的患者,差异有统计学意义(P<0.05)。FRMD4A蛋白在舌鳞癌组织中的高表达,但与肿瘤分化程度、患者性别和年龄无关。结论 FRMD4A高表达与舌鳞癌的发展及转移有关,可作为临床预后危险因素和潜在治疗靶点。

特异性沉默FRMD4A基因对人舌癌CAL-27细胞生物学行为的影响

目的:观察siRNA沉默FRMD4A基因的表达对舌癌CAL-27细胞生物学行为的影响。方法:通过脂质体将FRMD4A-siRNA转染进CAL-27细胞,应用qRT-PCR检测转染后CAL-27细胞FRMD4A mRNA的表达情况,CCK-8检测其细胞增殖情况,流式细胞仪检测FRMD4A基因沉默后对CAL-27细胞周期分布的影响。结果:与对照组相比,FRMD4A-siRNA干扰组FRMD4A mRNA表达显著下降(94%),干扰组细胞增殖指数下降(P<0.05),细胞周期出现G1期阻滞(P<0.05)。结论:FRMD4A-siRNA能有效抑制舌癌CAL-27细胞FRMD4A mRNA的表达,并影响细胞周期分布,降低细胞增殖能力。