基于1H-核磁共振代谢组学研究黄药子乙醇提取物致肝损伤的潜在生物标志物

目的采用基于1H-核磁共振（NMR）的代谢组学方法,分析黄药子乙醇提取物（RDB）致肝损伤大鼠血清和尿液中代谢产物随时间的动态变化,探寻RDB肝毒性早期的潜在生物标志物。方法大鼠ig给予RDB5 g·kg-1,连续给药28 d,于给药后3,7,14和28 d及停药后7 d（恢复期）取6只大鼠采血,进行常规血液生化分析;取肝组织,计算肝指数,并用HE染色进行肝组织病理观察。收集给药后0,3,7,14和28 d及停药后7 d血清和尿液,进行1H-NMR的代谢组学研究,采用主成分分析和正交偏最小二乘法分析对早期潜在生物标志物进行筛选和鉴别。结果与正常对照组相比,RDB组血清总胆红素（TB）和总胆固醇（TC）于给药后3~28 d显著升高（P〈0.05）,总胆汁酸（TBA）于7~28 d显著升高（P〈0.05）,TB,TC和TBA于停药后7 d恢复正常,谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性以及葡萄糖含量均无显著变化。RDB组给药后肝指数显著升高（P〈0.01）,停药后7 d恢复正常;肝组织于给药后7 d开始出现单细胞坏死和肝细胞肿大,随给药时间延长,病变程度加重;停药7 d后有所恢复。代谢组学检测显示,RDB给药早期血清脂质〔低密度脂蛋白（LDL）/极低密度脂蛋白（VLDL）〕、谷氨酸、磷酸胆碱和甘油磷酸胆碱等升高（P〈0.05）,尿液丙酮酸盐和N-乙酰谷氨酸等降低（P〈0.05）;上述代谢产物在停药7 d后均恢复正常。结论早期肝损伤与糖脂代谢、能量代谢和胆汁淤积有关。随着RDB给药的持续,产生了组织过氧化损伤。线粒体损伤导致体内能量代谢不足。血清脂质（LDL/VLDL）、谷氨酸、磷酸胆碱和甘油磷酸胆碱,及尿液丙酮酸盐和N-乙酰谷氨酸均可作为RDB致肝损伤的早期潜在生物标志物。

山豆根致大鼠肝损伤外周血microRNA早期变化特征研究

目的探讨山豆根致肝损伤外周血微小RNA(microRNA,miRNA)的早期变化特征,寻找肝损伤早期外周血miRNA标志物。方法 60只Wistar大鼠随机分为山豆根组和对照组,每组30只,分别给予山豆根水煎液12g/kg(2mL/100g)和等容量蒸馏水灌胃。于给药3、7、14、28天和停药后28天分批处理动物,取血清,测定常规血液生化指标ALT、AST、TBIL、碱性磷酸酶(ALP)、总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)水平,计算球蛋白(GLO)水平;取肝组织进行HE染色,观察病理形态学变化。同时分别取两组大鼠给药7、14、28天全血进行miRNA芯片检测,筛选差异表达miRNA,并进行RT-PCR验证。结果山豆根组给药7～28天ALT明显升高(P<0.05),组织病理学检查显示肝组织于给药28天出现肝细胞变性肿大。外周血miRNA芯片检测中,给药7、14、28天上调差异表达miRNA分别有11个、22个、13个,下调差异表达miRNA分别有1个、13个、2个。对给药7、14、28天共有差异表达miRNA通过靶基因预测和pathway分析发现,参与调控信号转导、细胞间相互作用、细胞骨架、免疫相关的差异表达miRNA可能参与了肝损伤的进程。时效高峰在7天的miR-291a-5p的RT-PCR验证显示,miR-291a-5p在外周血和肝组织的表达基本一致。结论 miR-291a-5p可在早期提示肝脏的损伤,可作为山豆根致肝损伤早期标志物之一。

川楝子色谱指纹图谱的研究

目的:建立不同产地川楝子药材的色谱指纹谱,为其质量综合评价提供依据。方法:采用RP-HPLC梯度洗脱技术进行分离分析,色谱柱:Inertsil ODS-3 C18柱;流动相:乙腈-水梯度洗脱;检测波长:270nm;柱温:25℃;流速:1.0mL/min;进样量:20μL。结果:建立了川楝子的色谱指纹谱,制定了控制川楝子质量的技术参数,其中标示39个峰为其特征指纹。结论:不同产地川楝子药材在组分的分布上差异不大,但在成分的比例和量上差异较大。同一产地川楝子在组分的分布和含量上差异较小。该法重现性好,简单,易行,可为川楝子的质量控制提供依据。

酶生物标志物在肝毒性评价中的应用

在新药研发过程中,很多候选药物由于严重的不良反应而遭淘汰,各类不良反应中药物引起的肝毒性最多。肝脏是体内含酶最丰富的器官,通过联合检测血清中酶的变化可以及时了解肝脏的病理生理状态。现就肝毒性传统血清酶生物标志物和潜在的血清酶生物标志物在肝毒性评价中的应用予以综述,以期通过联合检测血清酶,做到早期发现毒性,早采取措施。

基于药代动力学的山豆根抗炎作用机制研究

目的基于药代动力学研究山豆根对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀模型的抗炎作用及机制。方法雄性SD大鼠分为空白对照组、氢化可的松组(40 mg·kg^-1)、山豆根水提浸膏粉高剂量组(生药0.6 g·kg^-1)和低剂量组(生药0.3 g·kg^-1),测定致炎前和致炎后0.5、1、2、和3 h足跖肿胀度、致炎组织中炎症因子TNF-α、IL^-1β和IL-6含量及血中苦参碱、氧化苦参碱药代动力学参数。结果氢化可的松组致炎后肿胀率明显降低(P<0.01),山豆根水提浸膏粉组致炎后肿胀率亦降低(P<0.05)且体内苦参碱含量呈剂量依赖性,高剂量组AUC值约为低剂量组两倍,达峰时间与抗炎作用高峰时间一致;山豆根水提浸膏粉可显著下调炎症因子含量(P<0.01),抑制其表达的作用呈剂量依赖性。结论山豆根对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀模型具有抗炎作用,且呈剂量依赖性,与体内苦参碱系统暴露量成正相关,抗炎机制与抑制炎症因子表达有关。

药酶诱导剂对生附子急性毒性的影响

目的:考察典型肝脏细胞色素氧化酶P450酶系(肝药酶)诱导剂苯巴比妥钠干预给药对生附子毒性的影响,评价生附子毒性表现过程中的CYP450因素。方法:(1)测定小鼠单独给予生附子水煎液后的LD50;(2)测定苯巴比妥钠干预3天后,小鼠给予生附子水煎液的LD50;(3)Wistar大鼠经苯巴比妥钠(PB)干预给药3天后,十二指肠给予生附子水煎液,以出现频发室性早搏为其心脏毒性指标,观察PB干预及未干预的大鼠给予生附子后频发室性早搏发生率、出现时间及恢复率情况。结果:(1)小鼠给予生附子水煎液的LD50值为7.15g/kg,95%可信限为6.19～8.29g/(kg·d);(2)苯巴比妥钠诱导后,小鼠给予生附子水煎液的LD50>12.08g/(kg·d);(3)与单用生附子水煎液相比,苯巴比妥钠诱导后可显著减少生附子水煎液致大鼠频发室性早搏的发生率(P<0.01),延长出现时间(P<0.01),缩短持续时间(P<0.01)。结论:肝药酶诱导剂可显著降低生附子的毒性。

TSP技术在黄龙寺隧道施工中的应用

结合石武客运专线黄龙寺隧道工程实践,介绍了采用隧道地质超前预报系统TSP 203PLUS对黄龙寺隧道进行地质情况预测,对预测成果进行分析,为工程设计提供依据,指导工程安全施工。

急性肾小管坏死中化学介质的作用

急性肾小管坏死(ATN)是广义急性肾衰竭综合征的主要病因,其发病率和病死率均很高,不仅给家庭带来了沉重的经济负担和心理压力,对国家也造成了巨大的资源消耗和社会负担。然而,ATN的病理生理过程十分复杂,因此治疗手段缺乏针对性。近年来大量研究发现细胞因子、炎性因子及生长因子等化学介质在ATN的发生发展过程中发挥着十分重要的作用,通过干预某些化学介质的表达可以达到治疗目的,这对于肾脏疾病是一个很有发展前景的方法。现从化学介质的角度对目前ATN的研究予以综述。

吴茱萸化学成分、药效及肝毒性的研究进展

吴茱萸为芸香科植物吴茱萸的干燥近成熟果实,主要含有的化学成分有生物碱、苦味素、挥发油和黄酮类成分,其中生物碱为其主要活性成分。吴茱萸药理作用较为广泛,临床上主要功效为止痛,止呕。药典记载吴茱萸有小毒,动物试验研究发现,大剂量给予吴茱萸水煎液能造成实验动物明显肝损伤,其机制可能与过氧化损伤、炎性反应因子介导、线粒体损伤、药物-蛋白质加合物的形成等相关。本文通过对近年来国内外与吴茱萸相关的文献进行整理分析,概述了吴茱萸化学成分、药理作用和肝毒性及其机制的研究进展,为深入研究吴茱萸的药理作用机制、肝毒性物质及致毒机制,指导临床合理用药提供依据。

商陆利尿作用与肾毒性研究进展

商陆为商陆科植物商陆或垂序商陆的干燥根,功效主要为逐水消肿、通利二便。商陆临床常用于治疗水肿、肾炎、腹水等疾病,发挥利尿作用;利尿作用机制与肾脏水通道蛋白表达下调及体液代谢相关激素水平改变进而降低肾小管和集合管的重吸收功能相关。动物试验研究发现,长时间大剂量给予商陆水煎液,会诱发实验动物肾损伤;体外试验表明商陆主要活性成分商陆皂苷甲对人肾小管上皮细胞具有显著的细胞毒性作用;其肾毒性机制与氧化应激、炎性反应、细胞凋亡等相关。商陆临床可通过发挥利尿作用治疗肾小球肾炎、水肿等疾病,但长时间大剂量使用又会造成肾损伤,因此进一步深入探索商陆利尿作用与肾毒性之间的关系,结合早期生物标志物预警肾毒性,加强商陆质量控制标准,对提高商陆临床应用安全性与有效性有重要意义。

雾化丙三醇气液界面云暴露对人肺上皮细胞的毒性

目的采用气液界面暴露方式考察丙三醇气溶胶对人肺腺癌细胞(A549)的毒性,为丙三醇在吸入药物辅料和电子烟中的安全应用提供参考。方法采用VITROCELL云暴露系统对气液界面培养的A549细胞进行暴露,利用荧光素钠验证系统的递送效率。丙三醇气溶胶气液界面暴露试验,设置阴性对照组(1%PBS),丙三醇高、中、低剂量组(10%、6%、4%),考察细胞存活率,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的释放,以及白介素-6(interleukin-6,IL-6)的表达。结果暴露系统递送剂量准确,递送效率高,沉积率为53.4%,重复性(14.8%)和孔间差异(5.2%)等结果良好。丙三醇暴露后,与阴性对照组相比,A549细胞的存活率、LDH释放量、IL-6的表达均无显著性差异。结论本研究建立了一种可靠且快速的体外呼吸道急性暴露模型,单次短时间暴露丙三醇对细胞存活率和细胞毒性以及炎症因子表达无显著影响。

气液界面培养小鼠气管上皮细胞模型构建

目的构建小鼠气管上皮细胞原代培养模型,应用于外源化合物等的吸入暴露毒性评价。方法通过优化培养基配比成份,分离小鼠气管,蛋白酶低温消化得到上皮细胞,接种到预先包被胶原的Transwell半透膜中,通过细胞跨上皮电阻值与紧密连接蛋白的检测,评估细胞间紧密连接与细胞极化的形式。转换气液界面培养,标记纤毛蛋白,拍摄纤毛形态特征。结果MTEC分离分化培养后,MUC5AC蛋白,乙酰化α-微管蛋白(α-tubulin),β-微管蛋白-Ⅳ(β-tubulin-Ⅳ),闭合小环蛋白(ZO-1)的表达及紧密连接的形成与假复层上皮的形成均与小鼠体内气管组织结构类似,扫描电镜观察小鼠气管上皮细胞表面纤毛形态。结论本研究构建的小鼠气管上皮细胞培养方案,体外培养成功获得具有类似组织结构和生理功能的假复层纤毛柱状上皮,为气道上皮细胞的分离、分化和检测提供了稳定、可靠地方法。

电子烟雾化剂丙三醇90天大鼠吸入毒性研究

【目的】了解电子烟雾化剂丙三醇的吸入毒性。【方法】选择120只Wistar大鼠进行90天吸入毒性试验(恢复期28天)。按照大鼠体重随机分为阴性对照组、低剂量组(10 mg/kg)、中剂量组(100 mg/kg)和高剂量组(750 mg/kg),每组动物30只,雌雄各半。试验期间检测大鼠体重和耗食量变化;在染毒期和恢复期结束后,解剖大鼠进行血液学、血生化、尿液等指标检测和肺部支气管灌洗液分析,并对大鼠脏器进行组织病理学检查。【结果】与阴性对照组相比,①体重与耗食量:中剂量组雄性大鼠第3周耗食量降低(P<0.05),高剂量组雌性大鼠第6和11周耗食量降低(P<0.05);②血液学:恢复期中剂量组雄性大鼠,MCH(平均红细胞血红蛋白)水平上升(P<0.05);PLT(血小板数)水平下降(P<0.05);③血生化:处理组的各项指标均未见显著性差异(P>0.05)④尿液:恢复期低剂量组雄性大鼠的尿比重升高(P<0.05),⑤脏器重量及系数:染毒期高剂量组雌性大鼠肝脏重量、肾脏重量均低于阴性对照组(P<0.0);恢复期中剂量组雄性大鼠肺重量低于阴性对照组(P<0.01),⑥肺部支气管灌洗液分析:处理组的各项指标均未见显著性差异(P>0.05)⑦组织病理学检查:阴性对照组和高剂量组中大鼠的脏器组织未见明显病变。经分析以上的指标变化未呈现量效关系。【结论】大鼠鼻吸入丙三醇90天,暴露剂量750 mg/kg情况下未对大鼠产生明显的毒性作用。

电子烟雾化剂丙二醇的大鼠90天吸入毒性研究

【目的】研究电子烟雾化剂1,2-丙二醇(PG)的大鼠90天吸入毒性,为长期吸食电子烟的安全性评价提供试验依据。【方法】成年Wistar大鼠按其体重随机分为阴性对照组和PG暴露的低、中、高3个剂量组(剂量分别为100 mg/kg、500 mg/kg和1500 mg/kg),每组16只大鼠,雌雄各半。试验分为90天暴露期和停止暴露后1个月恢复期。试验期间观察动物体重和耗食量变化;分别在暴露期和恢复期结束后,每组各取一半动物进行血生化、血液学和尿液等指标检测,并对动物脏器进行组织病理学检查。【结果】与阴性对照组相比,①雌性大鼠体重仅低剂量组第8周有显著降低(P<0.05),其它组别试验期间未出现显著性差异;雄性大鼠低、中剂量组的体重试验期间未出现显著性差异,但高剂量组雄性大鼠在暴露后4周后的体重显著降低(P<0.05或P<0.01),直至恢复期结束;②低、高剂量组动物在4周的恢复期内耗食量下降幅度显著,雌性和雄性动物降幅范围分别达到12.7%~40.8%和13.9%~35.9%,其它组别和试验期间摄食量波动较小;③低、中、高剂量组的部分生化指标钠离子、氯离子和钾离子等水平发生变化,恢复期结束后恢复正常水平;④中、高剂量组雄性大鼠的红细胞数显著降低(P<0.05或P<0.01),且低、中、高剂量组有量效关系,恢复期后该指标恢复正常,其它血液学指标未见显著异常;⑤暴露期和恢复期各剂量组尿液指标均未见显著异常(P>0.05);⑥各剂量组脏器重量和脏器系数均未见显著差异(P>0.05),仅恢复期结束后中剂量组雌性大鼠胸腺重量增大,胸腺的脏脑比系数显著升高(P<0.05)。【结论】大鼠90天吸入PG的NOEL值为100 mg/kg,长期吸入较低剂量PG无显著毒性作用。

枯草芽孢杆菌制剂对仔猪生长及免疫的影响

试验旨在通过研究枯草芽孢杆菌制剂对断奶仔猪生长和免疫指标的影响,探明枯草芽孢杆菌制剂在仔猪上的应用效果和适宜添加量。试验选用240头同批断奶及体质量和日龄相近的(杜×长×大)三元杂交断奶仔猪,随机分为4个处理组,每处理3个重复,每重复20头猪,公母各半。对照组饲喂基础饲粮,试验组Ⅰ、试验组Ⅱ和试验组Ⅲ在饲喂基础饲粮的基础上分别添加0.5%、1.0%和1.5%的枯草芽孢杆菌制剂(等量的沸石粉被替换),试验期30 d。结果表明:与对照组相比,试验组Ⅱ和试验组Ⅲ平均末质量和平均日增质量分别提高10.73%和11.27%及19.58%和22.13%,均差异显著(P<0.05);料重比、病死率和腹泻率则分别降低0.16和0.17、5.00%和5.00%及4.32%和4.05%,均差异显著(P<0.05)。以上指标试验组Ⅱ和试验组Ⅲ间均差异不显著(P>0.05)。与对照组相比,试验组Ⅱ和试验组Ⅲ的血清免疫球蛋白A(Ig A)、免疫球蛋白G(Ig G)、补体C3和补体C4分别提高了18.23%和22.05%、6.69%和5.95%、23.94%和22.18%及62.96%和85.19%,均差异显著(P<0.05)。试验组Ⅱ和试验组Ⅲ间除补体C4外,其他免疫指标均差异不显著(P>0.05)。枯草芽孢杆菌制剂可显著提高仔猪的生长性能和免疫力,且适宜添加剂量为1.0%。

嘉兴市规模猪场副猪嗜血杆菌感染规律研究

[目的]研究嘉兴市规模猪场副猪嗜血杆菌病对保育猪的感染规律.[方法]对发病死亡的176头3～10周龄的保育猪,无菌采集关节液、心包液、心血、脑脊液等病料,应用细菌学、细菌生化反应及PCR技术,检测不同周龄保育猪副猪嗜血杆菌的感染情况.[结果]结果表明,在3～10周龄之间的保育猪均可检出副猪嗜血杆菌的感染,检出率高峰分布在5～8周龄之间,总检出率达到78.98％.[结论]该研究初步摸清了嘉兴市规模猪场保育猪副猪嗜血杆菌的感染规律,为在嘉兴市范围内预防和控制副猪嗜血杆菌病提供了理论依据.

浅析岩土工程勘察与地基处理的常见问题及对策

近年来,我国综合国力的提升随之让建筑工程项目逐渐变得越来越多.岩土工程勘察与地基处理作为建筑工程中必不可少的环节之一,两者最终的处理效果对建筑工程效益与质量更是有着直接影响.因此,面对当前岩土工程勘察与地基处理中存在的问题,有关人员必须即刻采取有效措施解决.

CFG桩复合地基在高速公路软土地基加固中的应用

本文简要探讨了CFG桩加固地基的特点及加固原理,结合武汉某高速公路软土地基的加固案例,分别从CFG桩复合地基的加固设计、施工工艺、质量检测等方面进行了论述。

2种饲喂模式对生长肥育猪生长性能的影响

选择180头（杜×大×长）生长肥育猪,分为人工喂料组和自动喂料组,开展25~90 kg体质量阶段饲养对比试验。结果表明,在生长速度上,日增质量自动喂料组比人工喂料组高64.62 g,提高10.11%（P〈0.05）;在日采食量上,自动喂料组比人工喂料组多75.1 g/头,增加4.10%（P〉0.05）,但有增加的趋势;在饲料转化率上,自动喂料组比人工喂料组低0.15,饲料转化率降低5.17%,（P〈0.05）;在猪群均匀度上,自动喂料组比人工喂料组变异系数低4.27%,自动喂料组猪群大小更均匀;在经济效益上,自动喂料组比人工喂料组头均毛利润高51.9元,养殖效益提高22.72%。

浅析市政道路软土地基处理方案比较与应用

城市进程脚步的加快让市政道路施工项目逐渐变得越来越多。然而,市政道路施工中却存在有软土地基的情况,软土地基若没有处理好,建设的道路易出现路基下沉和表面开裂等问题,因此,必须对市政道路软土地基采取有效处理措施,以提升施工效率,确保工程质量。文章就此展开论述,仅供参考。