清肺口服液在特发性肺纤维化中的治疗作用及网络药理学研究

目的:考察清肺口服液在特发性肺纤维化中的治疗作用及机制。方法:72只SD大鼠分为正常对照组、模型对照组、吡非尼酮组(给予吡非尼酮50 mg·kg–1·次–1,每天2次)、清肺口服液组(给予清肺口服液3.6 mL/kg,每天1次)处理21 d,获取肺组织进行HE染色、马森染色和转化生长因子-β(TGF-β)免疫组织化学染色,其余组织进行匀浆后检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱苷肽(GSH)。采用网络药理学方法,利用BATMAN-TCM数据库检索清肺口服液组成药物的化学成分及其对应靶点,随后构建成分-靶点-疾病网络图,进行通路富集分析。结果:组织病理学结果提示,清肺口服液给药后可改善肺纤维化状态,且效果与吡非尼酮类似;清肺口服液可减少肺组织TGF-β表达,对SOD、MDA和GSH也有调控作用。成分-靶点-疾病网络构建及基因功能注释结果显示,清肺口服液与调控炎症、细胞外基质和细胞因子等通路相关。结论:清肺口服液可能通过调控炎症等信号通路发挥抗特发性肺纤维化作用。

基于网络药理学的清肺合剂抗肺癌作用机制研究

目的采用网络药理学方法阐明清肺合剂"多成分-多靶点-多途径"的作用理念,为进一步研究清肺合剂抗肺癌的药效物质基础和作用机制提供理论依据。方法通过检索TCMSP数据库,结合口服生物利用度(OB≥30%)、小肠上皮细胞渗透性(Caco-2≥-0.4)和类药性分析(DL≥0.18)参数,筛选清肺合剂的活性成分;通过TCMSP、STITCH、Swiss数据库预测活性成分的靶点;通过TCMSP、TTD、PharmGKB数据库筛选出肺癌疾病相关基因;利用Cytoscape软件构建"活性成分-靶点-疾病"网络图;运用String数据库进行蛋白相互作用分析,建立PPI网络图;运用DAVID数据库进行GO功能注释和KEGG通路富集分析。结果经筛选后得到清肺合剂的108个活性成分,对应357个靶点。挖掘得到肺癌靶点412个,其中成分-疾病交互靶点38个,参与细胞增殖和凋亡、血管生成、有丝分裂等生物过程,涉及多种肿瘤通路、焦点黏附通路、血管内皮生长因子信号通路、p53信号通路、ErbB信号通路。结论清肺合剂通过多成分、多靶点、多通路调控细胞的分化、增殖、凋亡,调节血管生成,调控有丝分裂和减数分裂以及调节炎症反应从而发挥抗肺癌作用。

清肺口服液的多指标成分含量测定及提取工艺考察

目的建立清合口服液的多指标含量测定方法,并对其提取工艺进行考察。方法采用HPLC测定清肺口服液中绿原酸、咖啡酸、对香豆酸、野黄芩苷、迷迭香酸、芹菜素的含量。色谱条件:流动相为0.3%甲酸溶液(A)和乙腈(B),梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(−1),进样量10μL;采用Agilent Zorbax SB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,柱温35℃,检测波长为310 nm(0~25 min)和330 nm(25~75 min)。通过正交试验设计考察水提方法的纯水用量、浸泡时间、回流提取次数及回流提取时间对清肺口服液中各指标提取工艺的影响。结果绿原酸、咖啡酸、对香豆酸、野黄芩苷、迷迭香酸、芹菜素分别在2.28~145.70μg·mL^(−1)(r^(2)=0.9984)、3.07~196.70μg·mL^(−1)(r^(2)=0.9989)、1.63~104.30μg·mL^(−1)(r^(2)=0.9990)、1.49~95.20μg·mL^(−1)(r^(2)=0.9988)、1.22~77.80μg·mL^(−1)(r^(2)=0.9993)、0.62~39.70μg·mL^(−1)(r^(2)=0.9990)有良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.82%,100.71%,100.06%,99.09%,98.73%,101.71%,相对标准偏差分别为1.89%,3.19%,1.61%,3.45%,3.09%,2.55%。最佳提取工艺为8倍量的纯水浸泡1 h,并连续回流提取2次,每次回流提取时间为1.5 h。结论本研究建立的清肺口服液多指标含量测定方法简便、准确、重复性好;优选的提取工艺稳定可行。

替吉奥仿制药与原研药的体外一致性评价

目的建立替吉奥制剂体外溶出曲线的测定方法,评价国内10种替吉奥仿制药与原研药体外溶出曲线的相似性。方法采用高效液相色谱法建立替加氟(tegafluorogen,FT)、吉美嘧啶(gemiracil,CDHP)和奥替拉西钾(oteracil potassium,OXO)的定量测定方法。色谱柱为Agilent ZORBAXSB-C_(18),流动相为磷酸盐缓冲液-乙腈(90∶10),等度洗脱,流速1 mL·min^(–1),检测波长在0~5 min为240 nm,5~9 min为288 nm,9~14 min为270 nm,进样量10μL。采用转篮法测定各制剂在pH 1.2盐酸溶液、pH 4.5醋酸盐缓冲液、pH 6.8磷酸盐缓冲液和水4种不同溶出介质中的标准溶出曲线,并通过相似因子(f_2)评价仿制药与原研药溶出曲线的相似性。结果其中8种替吉奥仿制药与原研药的体外溶出行为相似。结论该方法适用于替吉奥制剂的溶出曲线测定,可为替吉奥制剂质量一致性评价提供参考。