hnRNPD在食管鳞状细胞癌的表达及意义

目的研究食管鳞状细胞癌(ESCC)组织异质性胞核核糖核蛋白D(hnRNPD)的表达与ESCC临床病理特征的关系,通过下调人ESCC细胞中hnRNPD水平,观察对ESCC细胞生长的影响及可能机制。方法用免疫组织化学染色法检测ESCC组织及癌旁组织中hnRNPD的蛋白表达;转染siRNA-hnRNPD下调hnRNPD基因表达,用Western blot法验证沉默效果;MTT法及克隆形成实验检测下调hnRNPD基因表达后ESCC细胞生长情况的变化;采用藻红蛋白标记的膜联素Ⅴ/7-氨基放线菌素D(annexinⅤ-PE/7-AAD)双染色法结合流式细胞术检测基因下调后细胞凋亡变化。结果 hnRNPD在ESCC组织中高表达;hnRNPD在ESCC组织中表达水平与肿瘤分期存在相关性;hnRNPD基因表达的下调能明显抑制ESCC细胞的生长和克隆形成能力;下调hnRNPD基因表达后,与对照组相比,ESCC细胞凋亡明显增加。结论下调hnRNPD基因表达通过增加细胞凋亡抑制ESCC细胞生长及克隆形成能力。

miRNA-126通过调节notch-1/Akt信号通路调控甲状腺癌细胞SW579增殖、凋亡及迁移

目的探索miRNA-126对甲状腺癌SW579细胞增殖、凋亡及迁移的影响,并进一步探索其机制。方法体外培养甲状腺癌SW579细胞,利用qPCR检测人甲状腺正常Nthy-ori3-1细胞和SW579细胞miRNA-126的表达;将细胞分为空白对照组、实验组及阴性对照组,分别不做任何处理、空质粒载体进行转染、转染miRNA-126表达质粒;通过转染质粒构建miRNA-126过表达的SW579细胞;利用CCK-8实验检测细胞增殖;Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡及活性氧水平变化;Western blot检测Notch-1/Akt通路相关蛋白表达,利用SPSS 21.0统计软件通过正态分布和t检验来印证。结果SW579细胞中miRNA-126表达量为(0.25±0.07),与Nthy-ori3-1细胞相比差异具有统计学意义(P<0.001);空白对照组、实验组及阴性对照组细胞存活率为(105.70±7.61)、(98.60±5.42)及(62.70±3.82);细胞凋亡率为(9.14±0.83)、(12.28±1.34)及(36.39±3.21)(P均<0.05);细胞迁移率为(34.51±2.45)、(33.29±3.17)及(11.22±1.23)(P均<0.05);活性氧水平为(1.02±0.07)、(1.08±0.11)及(6.54±0.74)(P均<0.05)。结论过表达miRNA-126能通过上调细胞内活性氧水平抑制Notch-1/Akt通路,抑制SW579细胞的增殖、迁移、诱导SW579细胞发生凋亡,为miRNA-126在甲状腺癌的研究中提供一定的理论基础。