ATIC对乳腺癌细胞MB231迁移和增殖能力的影响

目的探讨5-氨基咪唑-4-羟酰胺核糖核酸甲酰基转移酶(ATIC)在乳腺癌中的表达情况及其对乳腺癌细胞系MB231生物学功能的影响。方法运用实时荧光定量PCR法(qPCR法)和蛋白印迹法(Western blot法)检测ATIC在9例乳腺癌患者癌组织以及癌旁组织中的表达情况;通过慢病毒干扰技术构建ATIC低表达的乳腺癌细胞系MB231并通过qPCR法和Western blot法检测ATIC的干扰效果;采用CCK-8法、平板克隆实验和EDU染色法联合检测细胞增殖情况;采用Transwell实验和划痕实验测定细胞迁移能力;Western blot法检测ATIC对上皮间质转化关键蛋白(E-cadherin和Vimentin)以及增殖相关蛋白PCNA表达的影响。结果ATIC在乳腺癌组织中的表达明显高于癌旁组织;ATIC在MB231细胞和T47D细胞中表达较高;sh-ATIC-MB231细胞系构建成功,sh-ATIC组ATIC的蛋白和mRNA水平均明显低于sh-NC组;敲低ATIC表达明显减弱乳腺癌细胞MB231的增殖和迁移能力;ATIC下调导致E-cadherin表达水平上调而Vimentin、PCNA相对表达水平下调。结论ATIC可以影响乳腺癌细胞的增殖和迁移,减缓乳腺癌的发展,有望成为乳腺癌治疗的新靶点。

ATIC在结直肠癌中的临床价值及对其细胞生物学功能的影响

目的 探讨5-氨基咪唑-4-羟酰胺核糖核苷酸甲酰转移酶(ATIC)在结直肠癌中的临床价值及其对结直肠癌细胞生物学功能的影响。方法 利用GEO、TCGA、GTEx数据库和结直肠癌患者肿瘤组织标本,对结直肠癌中ATIC的表达情况及其与患者临床病理特征的关系进行分析;利用TIMER生物数据库对结直肠癌组织中ATIC的mRNA表达水平与肿瘤组织中免疫细胞浸润情况进行分析;联合TCGA和GTEx生物数据库评估ATIC在结直肠癌患者中的预后判断价值。建立稳定敲低ATIC表达的结直肠癌细胞系sh-ATIC-SW480,通过CCK-8实验和克隆形成实验检测ATIC对结直肠癌细胞增殖能力的影响,通过Transwell实验和划痕实验分析ATIC对结直肠癌细胞迁移能力的影响。结果 ATIC在结直肠癌组织中的表达水平明显高于正常结直肠组织;在结直肠癌中,ATIC的mRNA表达水平与肿瘤的TNM分期(P<0.05)、淋巴结转移(P<0.05)密切相关;结肠癌患者的无病生存期与ATIC的表达显著相关;敲低ATIC表达后,结直肠癌SW480细胞的增殖和迁移能力受到抑制。结论 ATIC在结直肠癌组织和细胞中高表达,具有影响结直肠癌细胞增殖和迁移的作用,其表达水平与结直肠癌患者临床病理特征相关,并对结肠癌具有评估预后的价值。

NUAK2在乳腺癌诊疗中的价值及其对乳腺癌细胞MCF-7生物学功能的影响

目的利用生物信息学数据库探究NUAK2基因在乳腺癌诊疗中的临床价值并分析其对乳腺癌细胞MCF-7生物学功能的影响。方法通过TCGA和GTEx数据库分析NUAK2基因在乳腺癌中的表达水平及其与乳腺癌患者临床病理特征的相关性;以人乳腺癌细胞MCF-7为细胞模型,合成NUAK2的特异性siRNA(si-NUAK2)并转染MCF-7细胞,通过qRT-PCR和Western blot检测NUAK2的表达情况;干扰人乳腺癌MCF-7细胞NUAK2的表达,利用平板克隆实验和CCK-8实验检测细胞增殖水平,Transwell实验和划痕实验检测细胞迁移能力;通过String数据库得到NUAK2相互结合蛋白并进行功能富集分析。结果TCGA数据库和GETx数据库分析结果及患者组织标本检测结果显示NUAK2在乳腺癌中高表达且与患者临床病理分型密切相关;平板克隆实验和CCK-8实验结果显示si-NUAK2组细胞增殖能力显著低于对照组;Transwell实验和划痕实验结果显示si-NUAK2组细胞的迁移能力明显低于对照组;String数据库分析结果显示NUAK2与蛋白水解、生理节律以及Wnt等信号通路密切相关。结论NUAK2可能与乳腺癌的发生发展密切相关,有望成为乳腺癌治疗的新靶点。