小鼠肠急性缺血再灌注模型中芳香烃受体活化对肠黏膜屏障功能的影响

目的观察吲哚并[3,2-B]咔唑-6-甲醛[6-formylindolo(3,2-b)carbazole,FICZ]活化芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AhR)对C57BL/6小鼠肠急性缺血再灌注(I/R)后肠道屏障功能的影响。方法取C57BL/6小鼠18只,分成假手术组、I/R组和FICZ干预(I/R+FICZ)组,每组6只。小鼠肠I/R模型:肠系膜上动脉夹闭30 min,再灌注6 h。苏木精-伊红(HE)染色观察小肠组织形态学的变化。蛋白质印迹和免疫荧光检测观察肠黏膜AhR与ZO-1的表达与分布情况。结果与假手术组比较,I/R组肠黏膜明显肿胀,部分绒毛脱落、变粗,甚至倒伏、断裂,而I/R+FICZ组肠黏膜无明显肿胀,绒毛结构相对完整,形态接近正常;免疫荧光显示I/R后肠上皮表面ZO-1连续性明显破坏,而I/R+FICZ组肠上皮ZO-1连续性明显恢复。肠上皮蛋白定量分析显示:与假手术组比较,I/R组和I/R+FICZ组小鼠小肠上皮ZO-1表达分别下降50.7%和32.3%(P<0.05);I/R+FICZ组较I/R组小肠上皮ZO-1表达上调37.2%(P<0.05)。结论 FICZ预处理可有效缓解小鼠急性I/R对肠黏膜结构与功能的损伤,可能机制是上调ZO-1的表达。

6甲酰基吲哚并[3,2-b]咔唑通过下调角质细胞生长因子受体抑制结肠癌细胞增殖

目的研究芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AhR)及其配体6甲酰基吲哚并[3,2-b]咔唑(6-formylindolo[3,2-b]carbazole,FICZ)对结直肠癌上皮细胞表面角质细胞生长因子受体(keratinocyte growth factor receptor,KGFR)的调控和对细胞增殖的影响。方法选用免疫组化和荧光定量PCR技术分别检测KGFR在结直肠正常组织和相应癌组织中的表达和定位,免疫荧光观察AhR在两种结肠癌细胞株(Lo Vo,Caco-2细胞株)中的分布,使用蛋白免疫印迹和荧光定量PCR检测AhR、细胞色素P4501A1(CYP1A1)、KGFR在FICZ处理组和对照组中的表达差异,使用细胞计数板分别检测对照组,KGF处理组,KGF+FICZ处理组和FICZ处理组各组的细胞数。结果 12个结直肠癌临床样本中有11个患者样品中KGF高表达,8个患者样品中KGFR显著增高且KGFR主要高表达于上皮细胞。体外实验发现,FICZ处理后的Lo Vo细胞中KGFR的蛋白水平和mRNA水平分别降低了50%和58.8%。在Caco2细胞中分别降低了52.6%和62.5%。这种调节过程能被AhR抑制剂CH223191阻断。同时,在两种结肠癌细胞系中,FICZ能够降低KGF对癌细胞的增殖作用(Lo Vo:34%;Caco-2:37%)。结论 AhR通过下调KGFR的表达,抑制KGF对癌细胞的增殖效应。