缓激肽对内皮祖细胞存活、迁移及凋亡的影响

目的观察不同浓度的缓激肽对人脐血来源的内皮祖细胞存活、迁移及凋亡的影响。方法采用密度梯度离心法从人脐带血获取单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被的培养板上,培养7天后,收集贴壁细胞。通过免疫荧光法鉴定,FITC标记的异凝集素和DiI标记的乙酰化低密度脂蛋白染色双染色阳性细胞为正在分化的内皮祖细胞,并经流式细胞仪检测技术进一步确定内皮祖细胞。以不同浓度缓激肽(1、10、100 nmol/L)或缓激肽B2受体阻断剂艾替班特+10 nmol/L缓激肽干预内皮祖细胞16 h。分别采用MTT比色法、Transwell小室和膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶流式细胞术及Hoechst33342染色法观察缓激肽对人内皮祖细胞的存活、迁移以及凋亡影响。结果缓激肽在1、10 nmol/L浓度时可促进人内皮祖细胞存活、迁移,抑制其凋亡(P<0.05)。然而100 nmol/L缓激肽无促人内皮祖细胞存活、迁移和抑制其凋亡的作用(P>0.05)。缓激肽促人内皮祖细胞存活、迁移,抑制其凋亡的作用可被艾替班特阻断(P<0.05)。结论缓激肽在一定范围内可促进内皮祖细胞的存活、迁移,并抑制其凋亡,此作用主要由缓激肽B2受体介导。

缓激肽预适应人内皮祖细胞移植治疗裸鼠急性心肌梗死

目的:研究内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)经缓激肽(bradykinin,BK)预适应后移植对急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)的治疗作用。方法 :细胞分为未经BK预适应人EPCs组(EPCs组)、BK预适应EPCs组(BK PC组)、BK预适应EPCs+艾替班特(HOE140)组(BK PC/HOE组),双染色法四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测各组增殖情况,予缺氧诱导后Annexin V-FITC/PI双染色法及Hoechst33342染色法检测各组凋亡情况,同时收集上清液予ELISA法检测血管内皮生长因子(VEGF)的表达。体内实验建立裸鼠急性心肌梗死模型,将羰花青荧光染料Di D标记的人EPCs通过心肌局部注射进行细胞移植到实验组,安慰剂组注入等量生理盐水。分为假手术组、MI+生理盐水组(安慰剂组)、MI+单纯干细胞治疗组(EPCs组)、MI+BK预适应EPCs治疗组(BK PC组)及MI+BK预适应EPCs+HOE140治疗组(BK PC/HOE组)。细胞移植后10 d行超声心动图检测心功能。移植后10 d处死动物,取心脏标本行相关检查。结果:1与EPCs组相比,BK预适应可促进人EPCs增殖;缺氧诱导凋亡后,BK PC组凋亡率低于EPCs组(P<0.01),且均可被HOE140阻断(P<0.01)。同时BK PC组上清液中VEGF的分泌高于EPCs组(P<0.01),同样可被HOE140所阻断;2细胞移植10 d后BK PC组左心射血分数(LVEF)明显高于安慰剂组(P<0.01)及EPCs组(P<0.01),且可被HOE140阻断(P<0.01)。与安慰剂组及EPCs组相比,BK PC组梗死周边区移植细胞存活明显增多,而细胞凋亡显著减少;同样可被HOE140所阻断。结论:BK预适应人EPCs后可显著改善裸小鼠AMI后的心功能,其疗效明显优于单纯人EPCs移植治疗。其治疗效应是通过促进移植细胞存活及抗移植细胞及宿主心肌细胞凋亡等而实现的。

罗格列酮对高胆固醇血症大鼠心肌脂联素与TNF-α水平的影响

目的:探讨高胆固醇血症大鼠心肌脂联素与TNF-α水平变化及罗格列酮对其的干预作用。方法:28只雄性Wistar-Kyoto大鼠,随机分为普通饲料组(Con组)、高胆固醇饲料组(Cho组)、高胆固醇饲料+罗格列酮组(Ros组),罗格列酮溶于生理盐水清晨灌胃,4 mg.kg-1.d-1。Ros组在高胆固醇饮食适应性饲养1个月后开始药物干预,持续5个月。采用全酶法全自动生化分析仪测定大鼠血脂,应用酶联免疫吸附法测定心肌脂联素和TNF-α水平。结果:Cho组血脂、心肌TNF-α水平高于Con组,心肌脂联素水平明显降低;罗格列酮可明显降低血酯、心肌TNF-α水平,升高心肌脂联素水平。且心肌酯联素与TNF-α呈明显负相关(r=-0.636,P<0.01)。结论:罗格列酮通过显著降低血脂及TNF-α水平,同时升高心肌脂联素水平而发挥心肌保护作用。

湖南省高校健康教育现状和展望

本文通过对湖南省部分高校的调查，讨论了省高校健康教育开设的必要及取得的成绩。提出了进一步开展湖南省高校健康教育需解决的几个问题：领导重视是搞好高校健康教育的关键；医学院校应开设健康教育课；师范院校在具备条件的情况下可以试点开设健康教育必修课以及高校健康教育急需健康教育专门人材。展望了湖南省高校健康教育的前景。

两种骨髓间充质干细胞移植途径治疗急性心肌梗死的比较研究

目的:探讨两种干细胞移植方式对心肌梗死后心功能的影响,为临床治疗急性心肌梗死探求更为理想的干细胞移植途径。方法:结扎法建立小鼠心肌梗死模型,然后将造模成功的小鼠分为心肌移植组、静脉移植组和对照组。体外培养扩增、纯化骨髓间充质干细胞,移植组干细胞分别经尾静脉和心肌内注射的方式移植入模型小鼠体内,对照组经尾静脉注射等量PBS溶液。2周后超声心动图评价心功能及病理学检测梗死面积。结果:2周后超声心动图心功能检测3组左室射血分数分别是(26.58±5.1)%、(16.90±3.4)%、(17.02±3.34)%;梗死面积分别为(52.15±4.22)%、(56.95±4.10)%、(57.12±3.89)%。结果显示,直接心肌内注射移植干细胞能够减少梗死面积,显著改善心脏功能;静脉移植方式未能改善心脏功能。结论:细胞移植方式是影响心脏干细胞治疗效果的重要因素,直接心肌内骨髓间充质干细胞移植途径在保护心功能方面优于静脉移植。

罗格列酮对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞增殖的影响

目的探讨罗格列酮对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞增殖的影响及可能的机制。方法原代培养大鼠血管平滑肌细胞,取第4～8代细胞进行实验。用终浓度为1μmol/L血管紧张素Ⅱ诱导6 h,随机分成对照组(含10%FBS的DMEM培养基)、1μmol/L血管紧张素Ⅱ组、不同浓度罗格列酮(20、30、40及50μmol/L)干预组,30μmol/L罗格列酮干预不同时间组(6、12、18及24 h)。分别采用MTT和流式细胞术观察血管平滑肌细胞增殖和增殖周期的变化;逆转录聚合酶链反应和免疫印迹法测定不同干预条件下血管平滑肌细胞血管紧张素Ⅱ2型受体mRNA和蛋白的表达水平。结果血管紧张素Ⅱ组吸光值明显高于对照组(P<0.01),20、30、40及50μmol/L罗格列酮干预12 h及30μmol/L罗格列酮干预6、12、18及24 h后,吸光值明显降低(P<0.05或P<0.01);血管紧张素Ⅱ组增殖指数和S期细胞分数明显高于对照组(P<0.01)。随着罗格列酮干预浓度的增加或干预时间的延长,增殖指数、S期细胞分数及处于S期分数均明显下降(P<0.05或P<0.01)。与血管紧张素Ⅱ组相比,不同浓度(20、30及50μmol/L)罗格列酮干预12 h及同一浓度(30μmol/L)干预不同时间(6、12及24 h)显著升高血管紧张素Ⅱ2型受体mRNA和蛋白的表达(P<0.05或P<0.01)。结论罗格列酮至少部分通过上调血管紧张素Ⅱ2型受体表达,阻止血管平滑肌细胞从G0/G1期向S期、G2/M期转化,从而抑制血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞的增殖、迁移,发挥血管保护作用。

调节移植干细胞功能促进梗死心肌修复的策略

目前干细胞移植治疗心肌梗死的研究已取得了重大进展。虽然干细胞具有持续自我更新并无限增殖的能力,且能够跨谱系接受不同表型,但移植中和移植后干细胞的大量死亡影响了干细胞疗法的有效性。造成移植细胞死亡现象的原因有很多,如宿主炎症反应、外界机械损伤、移植细胞对环境难以适应等。现阶段已有大量研究表明通过对干细胞预处理能够提高干细胞存活率,从而提高干细胞治疗心肌梗死的有效性。在本文中作者对当前的各种干细胞的预处理方法进行综述,旨在为解决干细胞移植后大量丢失这一难题提供参考。

厄贝沙坦对高胆固醇血症大鼠心肌脂联素系统的影响及其心肌保护作用

目的:探讨厄贝沙坦对高胆固醇血症大鼠心肌脂联素系统的影响及其心肌保护作用。方法:28只雄性WKY鼠随机分为3组:普通饲料组(n=8)喂以普通饲料;高胆固醇饲料组(n=10)喂以高胆固醇饲料;高胆固醇饲料+厄贝沙坦干预组(简称厄贝沙坦干预组,n=10)喂以高胆固醇饲料+厄贝沙坦[(50mg/(kg·d)]。高胆固醇饲料适应性喂养4周后开始药物干预,药物溶于1ml生理盐水于清晨灌胃。24周末处死动物前称体重,采用全自动生化分析仪测定血脂、苏木素伊红(HE)和Masson染色观察心肌组织形态学变化、测定心肌肥厚指数和平均心肌细胞直径、酶联免疫吸附法(ELISA)、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化法分别测定心肌脂联素水平及其受体mRNA和蛋白的表达。结果:与高胆固醇饲料组相比,厄贝沙坦干预组血清甘油三酯、总胆固醇、心肌肥厚指数、心肌细胞直径显著下降,心肌脂联素水平、脂联素受体1(AdipoR1)mRNA和蛋白表达的相对含量显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05～0.01)。与普通饲料组大鼠相比,显微镜下高胆固醇饲养组大鼠心肌细胞肥大,细胞内脂质空泡明显增多;然而厄贝沙坦干预组却未能观察到前述组织病理形态学改变。结论:厄贝沙坦至少部分通过改善脂质代谢、抑制体重增加、增加心肌局部脂联素水平及其受体1 mRNA和蛋白的表达参与拮抗高胆固醇血症致心肌损伤。

甲状腺内神经鞘瘤1例报告

患者女,22岁。1991年10月22日入院。患者十一年前于颈部甲状腺处发现一小结节,无疼痛及其它不适,生长缓慢。近一年间常疼痛,肿块增大较明显。起病后无消瘦、食欲亢进、情绪激动等表现,亦无声音嘶哑及吞咽障碍。

Fn14-PI3K-Akt介导TWEAK促人脐血内皮祖细胞血管生成研究

目的:探讨Fn14-PI3K-Akt信号通路介导的肿瘤坏死因子样弱凋亡因子(tumor necrosis factor-like weak inducer of apoptosis,TWEAK)对人脐血来源的内皮祖细胞(human endothelial progenitor cells,h EPCs)增殖、迁移、血管形成能力的影响。方法:体外培养、分离和鉴定h EPCs,以其受体成纤维细胞生长因子14 siRNA(Fn14 siRNA)及PI3K特异性抑制剂LY294002(LY)作干预处理。细胞分为对照组、TWEAK干预组、TWEAK+Fn14 siRNA阻断组和TWEAK+LY阻断组。分别采用CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell小室检测细胞迁移能力,Matrigel小管形成试验评价细胞血管生成能力,Western blot法测定细胞裂解液中p-Akt和T-Akt的表达。结果:h EPCs体外培养实验表明,TWEAK可明显促进h EPCs的增殖和迁移,并能提升h EPCs的血管形成能力,但在TEWAK+Fn14 siRNA及TWEAK+LY组中h EPCs的增殖、迁移及血管形成能力显著降低。且TWEAK组p-Akt表达较对照组显著增加,而TWEAK+Fn14siRNA组、TWEAK+LY组p-Akt表达较TWEAK组显著降低。结论:TWEAK具有调控h EPCs促血管新生的作用,其促血管新生的作用可能受到Fn14-PI3K-Akt信号通路的限制。

饮食紊乱与个人对体形重视程度之间的关系(文摘)

饮食紊乱与个人对体形重视程度之间的关系（文摘）Ｅ．Ｗ．Ｅｄｍｕｎｄｓｏｎ原著问题的提出：饮食紊乱阶段是由女性这个特定的性别角色作为前提确定的。这个前提包括一个具体的理想的身体形象，文化适应程度和对占支配地位的观念的认定起着调节作用。而且，性虐待史会往...

根据青少年风险行为调查的资料分析青少年风险行为结构的协方差(文摘)

根据青少年风险行为调查的资料分析青少年风险行为结构的协方差（文摘）Ｅ．Ｅｄｍｕｎｄｓｏｎ，Ｄ．Ｓｅｒｒｉｎｓ原著问题的提出：尽管有些研究人员提出了青少年异常行为的一般规律，但另外一些研究人员则认为青少年的行为结构要复杂得多。已经确认吸烟酒精和其他药品...

血清胱抑素C水平对老年冠状动脉介入术后患者造影剂诱导急性肾损伤发生及其远期预后的影响

目的探讨胱抑素C(CysC)水平对老年冠状动脉介入治疗(PCI)患者术后造影剂诱导的急性肾损伤(CI-AKI)发生及其远期预后的影响。方法前瞻性连续入选2015年3月至2017年12月间在我院心内科接受PCI治疗的老年患者848例,CI-AKI定义为应用碘造影剂48~72 h内血清肌酐升高≥44.2μmol/L,或较基础水平升高25%以上。采用受试者工作特征曲线分析评价CysC预测PCI术后CI-AKI发生的最佳截断值,根据最佳截断值(CysC=1.3 mg/L)分为高CysC组(CysC≥1.3 mg/L,178例)和对照组(CysC<1.3 mg/L,670例),比较两组患者PCI术后CI-AKI发生及随访1年主要心脏不良事件(MACE)发生率的差异,并进一步采用Cox回归模型分析PCI术后远期预后的预测因素。结果848例患者PCI术后发生CI-AKI的比例为9.4%。根据CysC水平,发现高CysC组PCI术后1年MACE发生率高于对照组[15.7%比9.3%,χ^(2)=6.524,(P=0.011)];Cox回归分析显示高CysC(≥1.3 mg/L)水平是PCI术后1年MACE发生的最强预测因素(HR=16.244,P<0.001)。结论基线高CysC水平(≥1.3 mg/L)是老年患者PCI术后CI-AKI的独立危险因素,也是老年患者PCI术后远期MACE发生的最重要预测因素。

罗格列酮和厄贝沙坦对高胆固醇血症大鼠血脂及心肌脂联素的干预作用

目的探讨高胆固醇血症大鼠血脂和心肌脂联素水平的变化及罗格列酮和厄贝沙坦的干预作用。方法采用高脂饮食建立高脂血症动物模型,36只雄性Wistar-Kyoto大鼠,随机分为普通饲料组(Con组,n=6)、高脂饲料组(Cho组,n=10)、高脂饲料+罗格列酮组(Ros组,n=10,4mg·kg^(-1)·d^(-1))、高脂饲料+厄贝沙坦组(Irb组,n=10,50 mg·kg^(-1)·d^(-1))。各药物组在高脂饲养1 mo后开始药物干预,持续5 mo。观察血脂、心肌组织脂联素、血管紧张肽Ⅱ和心肌组织形态学变化。结果高脂饲料饲养6 mo后,Cho组三酰甘油、胆固醇、低密度脂蛋白均明显高于Con组(P<0.01);罗格列酮和厄贝沙坦能显著降低高脂饲养诱发大鼠三酰甘油和胆固醇水平的升高(P<0.01);罗格列酮能显著降低低密度脂蛋白水平(P<0.01),而厄贝沙坦对低密度脂蛋白水平没有影响;罗格列酮与厄贝沙坦均可明显抑制高脂饮食诱发的心肌局部脂联素水平的下降和心肌局部血管紧张肽Ⅱ浓度的升高(P<0.01);形态学观察显示Cho组心肌组织可见明显的脂质沉积,罗格列酮与厄贝沙坦明显抑制这一病理改变。结论罗格列酮和厄贝沙坦均能通过改善脂质代谢、升高心肌组织脂联素水平、降低心肌局部血管紧张肽Ⅱ浓度,拮抗高脂饲养诱发心肌形态学的异常,从而发挥心肌保护作用。

整合素连接激酶在低氧诱导肺动脉高压发病机制中的作用

目的:通过了解整合素连接激酶(ILK)及心肌素(myocardin)在低氧性肺动脉高压(PAH)大鼠肺组织及肺血管中的表达,探讨ILK在低氧性肺动脉高压发病机制中的作用。方法:48只SD大鼠按随机数字表法分为常氧对照组和低氧1周、2周、4周组,低氧干预大鼠置于低氧仓内,氧浓度控制在(10.5±0.5)%,每日间断低氧8h(8:00~16:00)。测定各组大鼠肺动脉平均压(mPAP)、计算右室肥厚指数[右室/(左室+室间隔),RV/(LV+S)]、管壁厚度占血管外径的百分比(WT%)和管壁面积占血管总面积的百分比(WA%);采用髓鞘碱性蛋白为底物通过液体闪烁仪测定ILK活性;实时定量PCR法测定肺动脉内ILK、糖原合成激酶3β(GSK-3β)及myocardin mRNA相对表达量;Western印迹法检测肺动脉及培养的肺动脉平滑肌细胞(PASMC)胞质内ILK、GSK-3β及myocardin蛋白相对表达量。结果:低氧2周组mPAP、右室肥厚指数、WT%、WA%均显著高于常氧对照组(均P<0.05),低氧4周组差异更为显著。低氧1周组肺动脉内ILK活性即明显下降达36%(P<0.05),低氧2周、4周组ILK活性均较常氧对照组明显降低(均P<0.05)。低氧4周组ILK mRNA和蛋白相对表达量均显著低于常氧对照组(均P<0.05),myocardin mRNA和蛋白表达变化与ILK相似(均P<0.05),而GSK-3β的mRNA和蛋白表达量则呈相反趋势,显著高于常氧对照组(均P<0.05)。低氧培养PASMC 24h后ILK及myocardin蛋白表达明显低于常氧对照组,而GSK-3β蛋白水平则呈相反趋势,低氧可促进其表达增加(均P<0.05)。结论:慢性低氧引起ILK活性和表达下调,使其下游靶点GSK-3β表达上调,进而降低myocardin表达水平,可能是导致PAH形成的重要机制。

罗格列酮对高脂血症大鼠心肌脂联素系统的调节作用

目的探讨罗格列酮对高脂血症大鼠心肌脂联素及其受体表达的影响,阐述过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动药心肌保护的新机制。方法28只WKY大鼠随机分为普通饲料组、高脂饲料组和罗格列酮(4mg·kg-1.d-1)组。24wk处死动物,采用全自动生化分析仪测定血脂,HE和Masson染色观察心肌形态学变化、测定心肌肥厚指数和平均心肌细胞直径,ELISA、RT-PCR和免疫组化法测定心肌脂联素及脂联素受体1和2(AdipoR1和AdipoR2)的表达。结果罗格列酮显著抑制高脂饮食引起的血脂升高和体重增加、抑制细胞内脂质沉积及心肌细胞肥大、增加心肌组织局部脂联素水平及其受体1基因和蛋白的表达。结论罗格列酮通过改善脂质代谢、增加心肌局部脂联素水平及其AdipoR1基因和蛋白的表达拮抗高脂血症所致心肌损害,从而发挥心肌保护作用。

基质细胞衍生因子-1α对小鼠心脏干细胞凋亡的影响及其机制

目的 探讨基质细胞衍生因子-1α（stromal cell-derived factor-1 α,SDF-1α）对体外血清剥夺诱导的心脏干细胞（cadiac stem cells,CSC）凋亡的抑制作用,并探讨其机制.方法 体外分离培养小鼠CSC.免疫磁珠分选c-kit＋ CSC,纯化后分为5组,即正常对照组、饥饿组、饥饿＋SDF-1α组（又根据SDF-1α不同浓度分为10、50、100、200 ng/ml干预亚组）、饥饿＋SDF-1α＋ AMD3100组和饥饿＋ SDF-1α＋LY294002组.原位末端转移酶标记法（TUNEL法）和异硫氰酸荧光素/碘化丙啶（Annexin V-FITC/PI）流式双标法检测各组CSC凋亡情况,CCK-8法检测CSC活力,Westem blot法检测抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）以及磷酸化丝氨酸苏氨酸激酶（p-Akt）的表达水平,并使用比色法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（caspase-3）活性.结果 CSC经磁珠分选后c-kit阳性率可达85％以上.饥饿组细胞凋亡率明显高于正常对照组[（27.03±0.80）％比（1.51±0.54）％,P＜0.01].饥饿＋SDF-1α组各亚组细胞凋亡率均明显低于饥饿组（P均＜0.01）,CSC凋亡率在饥饿＋SDF-1α 10、50、100 ng/ml干预组渐次降低,以100 ng/ml干预组为最低[（10.67±1.06）％,与饥饿组比较P＜0.01].饥饿＋SDF-1α 100 ng/ml组p-Akt和Bcl-2的蛋白表达均明显高于饥饿组（P均＜0.01）,而caspase-3活性则均明显低于饥饿组（P均＜0.01）.饥饿＋SDF-1α＋ AMD3100组和饥饿＋SDF-1 α＋LY294002组p-Akt和Bcl-2的蛋白表达均较饥饿＋SDF-1α 100 ng/ml组低（P均＜0.01）,而caspase-3活性均明显高于饥饿＋SDF-1α100 ng/ml组（P均＜0.01）.结论 SDF-1α可抑制血清剥夺诱导的CSC凋亡,且该作用是通过SDF-1 α/CXCR4轴激活PI3K/Akt通路实现的.

TWEAK基因多态性与中国江苏地区急性心肌梗死的相关性研究

目的:探讨江苏地区急性心肌梗死与肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂(tumor necrosis factor-like weak inducer of apoptosis,TWEAK)基因多态性rs12937543、rs4968211、rs11552708位点单核苷酸基因多态性的相关性。方法:收集本院2016-07-2017-07收住急性心肌梗死患者267例为病例组,另选取健康体检者281例为对照组,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测TWEAK基因多态位点rs12937543、rs4968211、rs11552708的基因型和等位基因分布频率。结果:TWEAK基因多态性位点rs12937543基因频率在病例组与对照组中分布差异具有统计学意义(P<0.05);T等位基因能显著增加急性心肌梗死的危险,且与TWEAK血浆表达水平相关(P<0.05)。rs4968211、rs11552708位点均无统计学差异。结论:TWEAK基因多态性位点rs12937543与江苏地区急性心肌梗死存在相关性。