烟曲霉硫氧还蛋白还原酶双抗体夹心ELISA法的建立及初步应用

目的建立检测烟曲霉硫氧还蛋白还原酶Gli T(thioredoxin reductase Gli T,TR)的双抗体夹心ELISA法,并用于几种真菌培养上清液中TR蛋白的检测。方法纯化鼠抗人TR单克隆抗体并进行辣根过氧化物酶(HRP)标记。以纯化羊抗TR多克隆抗体为包被抗体,HRP标记鼠抗人TR单克隆抗体为检测抗体,建立双抗体夹心ELISA法。用方阵滴定法确定包被抗体和检测抗体的最适浓度;对方法的精密度、特异性和最低检测限进行评价;比较分析其检测3种常见曲霉(烟曲霉、黄曲霉、黑曲霉)培养上清中天然TR蛋白的能力,并与3种常见假丝酵母菌(白假丝酵母菌、热带假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌)作比较。结果方阵滴定的结果显示最适包被抗体浓度为1μg/m L,最适检测抗体的稀释度为1∶3 000。抗原最低检测限达2.25ng/m L。重组TR浓度为5 ng/m L和20 ng/m L时,批内和批间变异系数分别为8.57%、12.69%和6.73%、10.45%。阻断实验显示该法有较好的特异性,阻断率达84.7%。该法可以检出烟曲霉24 h培养上清中的天然TR,TR含量与烟曲霉菌丝含量呈正相关。本法与另2种曲霉和3种假丝酵母菌培养上清无交叉反应。结论成功建立并优化了检测烟曲霉TR抗原的ELISA法。该法具有良好的精密度及特异性,对烟曲霉感染有潜在的诊断价值。

血清胆红素、糖化血红蛋白及血脂联合检验在2型糖尿病合并冠心病中的价值

目的探讨对2型糖尿病合并冠心病患者予以血清胆红素(TBil)、糖化血红蛋白(HbA1c)及血脂(TC、TG、LDL-C、HDL-C)联合检测的价值。方法选取2021年3月—2022年2月中国药科大学第一附属医院收治的107例2型糖尿病合并冠心病患者,纳入观察组;另选取同期本院健康体检者107名纳入对照组,均进行TBil、HbA1c及血脂水平检测。比较两组患者检测指标的差异,并分析联合检测的诊断价值。结果观察组TBil水平(4.56±1.73)μmol/L低于对照组,HbA1c水平(7.11±1.54)%高于对照组,差异有统计学意义(t=16.421、7.367,P<0.05)。观察组TC、TG、LDL-C分别为(5.79±0.61)、(2.59±0.31)、(3.30±0.53)mmol/L,均高于对照组;HDL-C为(1.05±0.25)mmol/L,低于对照组,差异有统计学意义(t=11.301、17.151、10.765、17.143,P<0.05)。联合检测诊断2型糖尿病合并冠心病的准确率为92.52%、灵敏度为85.98%、特异度为99.07%,与金标准诊断一致性较好(Kappa=0.85)。结论对2型糖尿病合并冠心病患者予以TBil、HbA1c及血脂联合检测能及时发现患者该类指标的异常,可用于辅助本病的诊断,且诊断效能高。

甲状腺癌差异表达基因的生物信息学分析

目的通过生物信息学方法筛选女性甲状腺癌(THCA)发生发展关键枢纽基因(Hub基因),探讨女性THCA发病机制。方法根据性别将1780例诊断为THCA患者分为男性组(n=300)和女性组(n=1480)。通过GEO芯片数据集GSE29265获取2组甲状腺癌及正常组织数据信息。分别筛选出2组癌组织、相对正常组织的差异表达基因(DEGs);构建DEGs的蛋白互作网络,并筛选Hub基因;采用基因本体(GO)数据库及京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析THCA女性组Hub基因。结果分析发现女性THCA发病率是男性的4.93倍。女性组和男性组分别筛选出163个、165个差异表达为4倍以上的DEGs,以及分别筛选出10个、8个Hub基因,其中2组共有Hub基因4个,女性组特有Hub基因6个。女性组163个基因中,参与女性THCA生物学过程及相关信号通路的Hub基因有8个。结论PROM1、EVA1A、PRSS23、ITGA2、NCAM1和KIT为女性THCA中特有的DEGs,其可能将成为女性THCA患者潜在的治疗靶点。

南京六合地区体检人群甲状腺结节发病率及影响因素分析

目的观察南京六合地区正常人群甲状腺结节的发病率及影响因素,为疾病防治提供依据。方法选择扬州大学医学院附属六合医院2019年1—12月接待的3240名体检者作为研究对象,统计并分析不同性别和年龄组甲状腺结节的发病率,比较不同性别受检者甲状腺结节的部位、数量、直径分布以及代谢相关指标;采用Logistic多因素分析对甲状腺结节的影响因素进行分析。结果共纳入3240名健康体检者,检出1322例甲状腺结节患者,发病率为40.80%;其中女性发病率明显高于男性〔45.15%(736/1630)比36.40%(586/1610)〕;随着年龄增长,男性和女性发病率均逐渐升高,且各年龄组女性发病率均明显高于男性。女性多发结节、大结节和小结节的检出率均明显高于男性〔26.01%(424/1630)比16.89%(272/1610),8.77%(143/1630)比6.46%(104/1610),36.38%(593/1630)比29.94%(482/1610),均P<0.05〕,双侧叶和右侧叶检出率明显高于男性〔20.98%(342/1630)比13.48%(217/1610),13.93%(227/1630)比11.30%(182/1610),均P<0.05〕。是否患甲状腺结节受检者总体和不同性别受检者代谢相关指标检测结果各有不同。消除年龄因素后,超重〔优势比(OR)=1.410,95%可信区间(95%CI)为1.090~1.824〕、肥胖(OR=1.890,95%CI为1.233~2.896)、空腹血糖受损(OR=1.941,95%CI为1.353~2.785)、糖尿病(OR=2.555,95%CI为1.692~3.858)、高血压(OR=1.946,95%CI为1.433~2.641)、估算的肾小球滤过率(eGFR)轻度下降(OR=2.306,95%CI为1.726~3.082)和明显下降(OR=3.401,95%CI为1.283~9.019)是男性患甲状腺结节的危险因素;糖尿病(OR=2.768,95%CI为1.242~6.170)、高血压(OR=2.072,95%CI为1.330~3.228)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)升高(OR=1.809,95%CI为1.278~2.560)、eGFR轻度下降(OR=2.149,95%CI为1.447~3.194)是女性患甲状腺结节的危险因素(均P<0.05)。结论南京六合地区女性甲状腺结节发病率高于男性,性别、年龄、超重、肥胖、高血压、糖尿病、高脂血症及eGFR降低是甲状腺结节发生的相关因素,且不同性别的影响因素稍有差别。