川芎挥发油对大鼠大脑皮层神经细胞体外存活及脑缺血再灌注损伤的影响

目的考察川芎挥发油对大鼠大脑皮层神经细胞的体外存活及脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法取出生1d内的乳鼠大脑皮层制成细胞悬液,接种于经多聚赖氨酸包被的培养板。于培养6 d后,加入不同浓度的川芎挥发油,继续培养1 d,采用MTT比色法测量其存活细胞的吸收值,同时行NSE检查。采用线栓法阻塞大脑中动脉(MCA)致大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,测定大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、一氧化氮合酶(NOS)含量。结果 NSE检查结果表明,培养6 d的存活细胞大部分均为神经元。MTT比色法结果表明,与对照组比较,川芎挥发油较低浓度均能明显增加存活细胞数(P<0.05)。且川芎挥发油能明显提高GSH-Px、NOS、SOD的活性,降低MDA的含量及大鼠脑梗塞比率(P<0.05或P<0.01)。结论川芎挥发油能促进体外培养的大脑皮层神经细胞存活,可通过增加脑缺血再灌注模型大鼠SOD、GSH-Px、NOS活性,降低MDA含量,降低大鼠脑梗塞比率等途径产生脑缺血保护作用。

阿魏酸及其酯化产物与体外培养大鼠大脑皮质神经元的存活

背景:大量体外筛选中得到的中药脑神经保护活性成分,多因脂溶性低难以透过血脑屏障而限制了其临床应用。目的:比较阿魏酸及其酯化产物阿魏酸甲酯、乙酯对原代培养的大鼠大脑皮质神经元体外存活的保护作用。方法:出生1d内的乳鼠采用酶消化法分离培养大脑皮质神经元。培养6d后,分别进行阿魏酸、阿魏酸甲酯及乙酯干预,继续培养1d。结果与结论:形态学观察结果显示细胞生长良好,NSE染色检查表明培养6d的存活细胞大部分均为神经元。MTT比色法测量结果显示,与空白对照组比较,阿魏酸仅在质量浓度为200mg/L时有明显促进大脑皮质神经元存活的作用,而阿魏酸甲酯、乙酯在质量浓度为0.16～20mg/L时均能明显促进神经元体外存活,且作用趋势、作用强度相近。表明阿魏酸的酯化产物阿魏酸甲酯和阿魏酸乙酯均能促进原代培养的大脑皮质神经元体外存活,显示出较好的脑神经元保护作用,且活性比阿魏酸更强。

中药新复方愈肠宁的组方研究

目的筛选中药新复方愈肠宁的有效组分配伍。方法采用三硝基苯磺酸大鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型对愈肠宁处方进行拆方及最佳配比的优选实验;采用两种UC模型大鼠对饮片配伍和有效组分配伍的愈肠宁药效进行比较。结果初步确定愈肠宁药味组成为:黄芪、苦参各15 g;拆方实验表明,二药合用疗效优于单用,且以黄芪:苦参为1:1时,疗效最佳;饮片配伍与有效组分配伍的疗效无明显差异,证实黄芪皂苷、黄芪多糖、苦参碱、氧化苦参碱为该方起效的物质基础,并确定了愈肠宁日服处方量为:黄芪多糖239 mg,氧化苦参碱150 mg,苦参碱50 mg,黄芪皂苷25 mg。结论筛选出以有效组分配伍的中药新复方愈肠宁,为中药新复方的开发提供了新思路。

灯盏细辛有效组分对体外培养大鼠大脑皮层神经细胞的影响

目的：研究灯盏细辛有效组分对体外培养鼠大脑皮层神经细胞存活的影响。方法：取出生1d内的乳鼠大脑皮层制成细胞悬液,接种于经多聚赖氨酸包被的96孔板中。于培养6d后,分别加入培养液及不同浓度的灯盏细辛提取物和灯盏乙素继续培养1d,采用MTT比色法测量其存活细胞的吸收值,同时行NSE检查。结果：NSE检查结果表明,培养6 d的存活细胞大部分均为神经元。与空白对照组比较,提取物浓度在0.1~1.6mg/ml,灯盏乙素高浓度时,存活细胞数均明显增加,且有一定的量效关系。结论：灯盏细辛两组分均能促进体外培养的大脑皮层神经细胞存活,且提取物活性较强。

灯盏花素对体外高压致视网膜神经节细胞凋亡的影响

目的考察灯盏花素对体外高压诱导的视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)凋亡的影响,探讨灯盏细辛视神经保护作用的物质基础。方法用胰酶消化法将20只出生2～3d的SD(Sprague-Dawley)乳鼠视网膜制成细胞悬液,接种于经多聚鸟氨酸(HA)和层粘连蛋白(LN)包被的血盖片中。培养72h后,将覆有细胞的血盖片转入加压装置中,加入灯盏花素溶液,继续培养24、48h,采用Caspase-3蛋白免疫组化染色法及原位末端脱氧核苷酸转移酶标记(Tunel-POD)法进行检测,每天观察细胞形态,同时对部分细胞行NSE染色检查。结果细胞生长良好,NSE染色表明,85%以上的细胞为RGCs。给药组的Caspase-3蛋白阳性表达指数和凋亡指数均明显低于模型组(P<0·05,P<0·01)。结论灯盏花素能对抗压力诱导的RGCs凋亡,为灯盏细辛视神经保护的有效组分。

谈药理学教学现状及改革

本文从扩招引发就业难这一问题入手,分析发现当前大学教育仍存在重理论而轻实践的现象。同时对目前药理学教学现状及存在的主要问题进行了全面分析,并提出了相应的改革措施。

激光共聚焦显微镜技术在心脑血管疾病实验研究中的应用

激光扫描共聚焦显微镜技术已经成为形态学、分子细胞生物学、神经科学、药理学等领域新一代的研究工具,近年来已在治疗心脑血管疾病的药物研究中得到了越来越广泛的使用。本文主要综述了激光共聚焦显微镜在心脑血管疾病实验研究中的应用现状。

中药视神经保护作用的研究进展

采用中药治疗视神经损伤较西药存在综合优势,灯盏细辛、川芎、葛根、银杏叶、丹参、刺蒺藜及不少中药复方均有视神经保护作用,研究它们的作用机制,开发具有临床使用价值的中药视神经保护药具有重要意义。

灯盏细辛有效组分的钙拮抗作用研究

目的考察灯盏细辛有效组分的的钙拮抗活性。方法采用45Ca跨膜内流测量技术与兔离体肠肌实验,观察了灯盏细辛中水提物和总黄酮的钙拮抗活性。结果45Ca跨膜内流测量实验中,与空白对照组比较灯盏细辛总黄酮(0·25、1·0g·L-1)均有明显的抑制钙离子内流作用(P<0·05,P<0·01),水提物浓度为1·0g·L-1时无钙拮抗作用反而促进钙离子内流。兔离体肠肌实验中,与空白对照组比较水提物组(1·0g·L-1)的频率,总黄酮组(1、0·5g·L-1)的频率及张力均有显著抑制作用(P<0·05)。结论灯盏细辛总黄酮有明显的钙拮抗作用,而其水提物的钙拮抗作用还有待进一步研究证实。

灯盏细辛黄酮类成分对压力诱导的视网膜神经节细胞凋亡的影响

目的考察灯盏细辛中黄酮类成分（总黄酮、灯盏花素）对体外高压诱导的视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells，RGCs）凋亡的影响，探讨其视神经保护作用的物质基础。方法采用胰酶消化法将24只出生2～3d的SD（Sprague—Dawley）乳鼠视网膜制成细胞悬液，接种于经多聚乌氨酸（HA）和层粘连蛋白（LN）包被的盖玻片中。培养72h后，将覆有细胞的血盖片转入加压装置中，加入黄酮类成分，继续培养48h，采用Fas蛋白免疫组化染色法及原位末端脱氧核苷酸转移酶标记（Tunel—POD）法进行检测，每天观察细胞形态，同时对部分细胞行NSE染色检查。结果细胞生长良好，NSE染色表明，85％以上的细胞为RGCs。给药组的Fas蛋白阳性表达指数和凋亡指数均明显低于模型组（P〈0．05。0．01）。结论黄酮类成分均能对抗压力诱导的RGCs凋亡，为灯盏细辛视神经保护的有效组分。

溃疡性结肠炎动物模型在药效研究中的应用

目的:对近年来溃疡性结肠炎动物模型在药效实验研究中的应用情况进行了总结,并对其中主要的几种动物模型进行了分析和评价,指出了目前存在的一些不足,并提示今后的研究方向。

灯盏细辛化学成分及视神经保护活性成分的研究

目的研究灯盏细辛视神经保护的活性成分。方法采用植物化学分离方法,结合体外视网膜神经节细胞存活影响实验,从灯盏细辛视神经保护有效部位分离化学成分,运用现代波谱方法进行结构鉴定,并进行化合物的视神经保护活性测定。结果从灯盏细辛乙酸乙酯部位分离得到7个化合物,经鉴定为:槲皮素(1)、芹菜素(2)、飞蓬苷(3)、东茛菪素(4)、咖啡酸(5)、3-O-咖啡酰基-奎宁酸(6)和野黄芩苷(灯盏乙素,7)。结论其中东莨菪素(4)、咖啡酸(5)、野黄芩苷(7)具有视神经保护活性。

灯盏花中单体成分对体外培养大鼠视网膜神经细胞的影响

目的:考察咖啡酸、东莨菪内酯、野黄芩苷对体外培养视网膜神经细胞存活的影响,探讨灯盏花中具视神经保护作用的有效成分。方法:采用胰酶消化法将18只出生2-3d的乳鼠视网膜制成细胞悬液,接种于经多聚鸟氨酸(HA)和层粘连蛋白(LN)包被的96孔板中。于培养3d后,分别加入PBS液及不同含量的咖啡酸、东莨菪内酯、野黄芩苷溶液继续培养2d,采用MTT比色法测量其存活细胞的吸收值,同时对部分细胞行Nissel体染色检查。结果:Nissel体染色检查结果表明,培养5d的存活细胞大部分均为神经细胞。与空白对照组比较,咖啡酸含量在3.9-1000μg·mL-1、东莨菪内酯、野黄芩苷含量在250-1000μg·mL-1时,其吸收值均明显增加(P<0.05,P<0.01),且有一定的量效关系。结论:咖啡酸、东莨菪内酯、野黄芩苷三者均能促进体外培养的视网膜神经细胞存活,且咖啡酸活性最强。

不同来源黄芪多糖提取物对淋巴细胞增殖的影响及其化学组成分析

目的考察不同来源黄芪多糖提取物对体外脾淋巴细胞增殖的影响,明确其活性差异,对比分析其化学组成。方法 MTT法分别检测黄芪多糖提取物对正常脾淋巴细胞、ConA活化脾淋巴细胞增殖的影响;硫酸苯酚法结合重量法分别测定样品中总糖、多糖、醇不溶组分含量。结果各批样品对正常脾淋巴细胞均有显著的促增殖作用(P<0.01或P<0.05),除SSK外,各样品在低浓度时促增殖作用较强,促增殖率为39.4%～186.4%;XZX、XHS、SLH1对ConA诱导的脾淋巴细胞增殖具有显著抑制作用(P<0.01),且在4 mg.ml-1时抑制作用最强,抑制率为52.9%～104.0%,作用大小为XZX>XHS>SLH1,其余各批样品无明显抑制作用;各批样品醇不溶组分含量为18.74%～60.67%,多糖含量为7.22%～44.74%,大小顺序为XZX>XHS>SLH1>SLH2>SSK。结论不同来源黄芪多糖提取物的质量差异十分显著。

溪黄草的研究进展

溪黄草为唇形科植物线纹香茶菜的干燥全草。该文对溪黄草的化学成分,以及其增强免疫、抗肿瘤、保肝利胆、抗氧化、抗菌防腐等药理作用进行综述,并介绍了溪黄草治疗黄疸型肝炎、胆囊炎、胆囊炎、胆结石、代谢综合征等的效果。

民族药材白花丹体外抗肿瘤活性研究

目的探讨白花丹体外抗肿瘤作用的活性部位。方法MTT染色法对白花丹五种溶剂提取物体外抗肿瘤活性进行了初步的研究。结果氯仿提取物对乳腺癌细胞(Bre-04)、神经癌细胞(N-04)、肺癌细胞(Lu-04)有较好的抑制生长作用,IC_(50)分别为0.2699 mg/ml、0.2634 mg/ml、0.4961 mg/ml,对肝癌细胞HepG2抑制作用差,IC_(50)为0.9379 mg/ml;白花丹石油醚提取部位对乳腺癌细胞(Bre-04)、神经癌细胞(N-04)、肺癌细胞(Lu-04)、肝癌细胞HepG2的IC_(50)分别为0.5902 mg/ml、0.5725 mg/ml、0.7938 mg/ml、0.6374 mg/ml;乙酸乙酯提取物对肺癌细胞(Lu-04)有一定的抑制作用,IC_(50)为0.7343 mg/ml;水溶性提取物以及正丁醇提取物无明显抑制肿瘤作用。结论白花丹氯仿提取部位、石油醚提取部位体外抗肿瘤作用较好,值得对其提取部位进一步分离纯化并研究其抗肿瘤作用机制。