闰盘相关基因的研究进展

心肌纤维呈短柱状,多数有分支,相互连接成网状。相邻的两条心肌纤维的连接处称闰盘,是心肌细胞间的机电耦合,在心肌的兴奋传导中发挥重要作用。关于不同基因在心肌闰盘机电传导中的作用和影响,很多学者都做出了相应的研究,如发现ZO-1、Cx43和Cx45等及其之间可能存在的相互作用,在不同病理情况下各种连接蛋白的变化情况等。该文就ZO-1、Cx43的功能、联系及其在临床上的应用等相关研究进展予以综述。

ZO-1基因的慢病毒载体构建

目的:相邻两心肌纤维的连接处称心肌闰盘,它在心肌的机电活动中扮演重要角色。目前有关闰盘相关基因Cx43的研究已被广泛关注,而在不同心肌病理状态下,其变化及功能都与另一闰盘相关基因ZO-1有极为密切的联系。目前有关ZO-1的研究比较少,此次欲将猪ZO-1基因克隆到慢病毒表达载体并进行鉴定,为进一步研究其功能奠定基础。方法:利用聚合酶链反应(PCR)扩增猪ZO-1基因,并克隆到慢病毒表达载体,通过转化、抽提质粒、双酶切和测序鉴定构建的Lenti-EF1α-EGFP-TRE-ZO-1重组载体。结果:猪ZO-1基因片段重组到慢病毒载体;PCR和双酶切鉴定,电泳结果显示均能得到与理论大小相符的片段;经测序证实成功构建Lenti-EF1α-EGFP-TRE-ZO-1慢病毒表达载体。结论:通过一系列实验证实Lenti-EF1α-EGFP-TRE-ZO-1慢病毒表达载体构建成功,可利用其感染相关细胞或注入动物体内,为后续的体外及在体研究奠定基础,明确其在不同心肌病理状态下所发挥的独特作用。

mTOR基因启动子甲基化水平与光学相干显像证实的支架内皮化不全的关系

目的探讨哺乳动物雷帕霉素受体(mTOR)基因启动子甲基化水平与光学相干显像(OCT)证实的药物洗脱支架内皮化不全的相关性。方法选择接受依维莫司洗脱支架植入术的患者51例,术后12个月经OCT诊断为支架内皮化不全的患者24例及支架内皮化完全的患者27例。对每位患者进行mTOR基因启动子甲基化特异性聚合酶链反应和mTOR基因mRNA水平测定。统计并比较两组mTOR基因启动子甲基化水平及mTOR基因mRNA水平。结果支架内皮化不全组和支架内皮化完全组在性别(男性占比53.33%vs 63.33%)、年龄[(67.1±9.5)岁vs(66.1±9.4岁)]和体重指数(BMI)[(24.2±4.3)kg/m^(2) vs(23.8±3.8)kg/m^(2)]方面比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。支架内皮化不全组的mTOR基因启动子甲基化水平低于支架内皮化完全组(0.032±0.007 vs 0.054±0.011,P<0.001),支架内皮化不全组的mTOR基因mRNA水平高于支架内皮化完全组(39.84±11.87 vs 21.78±4.69,P<0.001)。结论OCT证实的支架内皮化不全与mTOR基因启动子DNA低甲基化水平和mTOR基因高mRNA水平有关。