人脂肪间充质干细胞向胰岛β样细胞分化的体外研究

目的探讨体外诱导人脂肪间充质干细胞（hADSCs）向胰岛β样细胞分化的方法。方法手术获取人脂肪组织，分离培养hADSCs，流式细胞术鉴定其分子表面标志。应用含胰十二指肠同源框因子1（PDX1）与神经元素3（Ngn3）的慢病毒转染hADSCs，并联合乙基咔唑（NECA）及多种细胞因子进行诱导分化后，采用实时定量聚合酶链反应（Real—time PCR）检测胰岛素分泌细胞特异基因肌腱膜的纤维肉瘤肿瘤基因同系物A（Mafa）、胰岛素1（Insulin1）、葡萄糖转运体2（Glut2）及叉头蛋白转录因子01（Fox01）的表达，采用免疫荧光法鉴定诱导后细胞内胰岛素及C肽的表达，采用化学发光法检测诱导后细胞的胰岛素分泌水平。结果hADSCs、CD105、CD44、CD29及CD90表达阳性，CD45及CD34表达阴性。Real-time PCR结果显示诱导后的细胞高表达PDX1、Ngn3、Insulin1及Glut2；免疫荧光结果显示诱导后的细胞胞质内表达胰岛素及C肽；化学发光法测得诱导后的细胞胰岛素分泌量为（156．23±30．97）mIU／L，高糖刺激后分泌量为（836．50±231．22）mlU／L。结论人脂肪间充质干细胞在体外可以通过转染含PDX1和Ngn3慢病毒并联合NECA及多种细胞因子的方法诱导分化为胰岛B样细胞。

长链非编码RNA uc.417的生物信息学分析及其在棕色脂肪细胞中的表达研究

目的：对长链非编码RNA（lncRNA）uc.417进行系统的生物信息学分析，预测其可能参与的生物学过程，并初步研究其在棕色脂肪细胞中的表达。方法应用UCSC在线数据库获取lncRNA uc.417的序列、位置，并分析其特征；应用Ensemble数据库预测lncRNA uc.417靶基因。分离C57BL/6J小鼠肩胛部棕色脂肪，胶原酶法消化、接种培养并诱导其向成熟的棕色脂肪细胞分化。采用逆转录PCR法检测lncRNA uc.417，同源异型基因B6（HOXB6）及同源异型基因B7（HOXB7）在棕色脂肪细胞分化过程中的表达变化，采用t检验比较三者在分化过程第0-10天的表达差异。结果lncRNA uc.417在各物种之间高度保守，其序列所在染色体区域存在众多顺式作用元件结合位置以及大量表观遗传调控线索，可能的调控靶标为HOXB6与HOXB7。lncRNA uc.417在分化过程D4天的相对表达量显著高于D2（2.07±0.77比0.89±0.18，t=4.103，P〈0.01），分化过程D8天的相对表达量显著高于D6（10.68±3.28比3.12±0.88，t=-4.238，P〈0.01）。结论 lncRNA uc.417在棕色脂肪细胞成脂分化过程中表达量逐渐增加，生物信息学分析提示可能通过调控下游靶基因，参与棕色脂肪细胞成脂分化过程。

播撒暖香 呵护小生命

直到现在,我的脑海里还会闪现那些画面,在儿童医院的血液科穿梭,我看到一张张惨白的小脸,他们化疗后光光的脑袋,抵抗恐惧的眼神,青紫的鼻梁,干瘦的身体,痛苦的呻吟……我在鼓楼医院呼吸科实习,监护室的护士告诉我们,监护室的空气里和门把手上都是全耐药鲍曼不动杆菌,我们的每一根头发丝上都是鲍曼，并且，洗不掉。

RET基因Cys634Arg突变致多发性内分泌腺瘤2A型2例家系分析

目的总结2个多发性内分泌腺瘤2A型(MEN2A)家系的临床特征及RET基因的突变类型。方法分析2例MEN2A先证者及其家系成员的临床表现;提取其外周血基因组DNA,应用PCR技术对RET基因的第10、11外显子进行扩增并双向测序。结果 2个家系的先证者及5名家庭成员均存在RET基因第11外显子的Cys634Arg点突变,且临床均表现为甲状腺髓样癌和嗜铬细胞瘤。其中,家系2合并有垂体无功能腺瘤。结论该MEN2A家系的RET基因是Cys634Arg突变;其临床表现主要为甲状腺髓样癌及肾上腺嗜铬细胞瘤。

甲状腺机能正常人体重指数与血清甲状腺激素FT_3及FT_3/FT_4比值的相关性

目的探讨体重指数(BMI)与游离三碘甲腺原氨酸(FT3)和FT3/游离甲状腺激素(FT4)比值的相关性。方法 2097例体检者分为非肥胖组(BMI<24kg/m2,885例)和超重肥胖组(BMI≥24kg/m2,1212例),收集BMI和FT3、FT4等相关检测资料,分析BMI与FT3水平和FT3/FT4比值的相关性。结果超重肥胖组血清FT3水平及FT3/FT4比值高于非肥胖组(P<0.05)。超重肥胖组BMI与血清FT3和FT3/FT4比值呈显著正相关(β=0.021和β=0.011,P<0.01),而与血清促甲状腺激素(TSH)和FT4水平无明显相关性(β=0.005和β=-0.02,P>0.05)。结论超重和肥胖可引起血清FT3水平升高和FT3/FT4比值增加。