天然产物中抗HIV药物筛选方法的研究

获得性免疫缺陷综合征又称艾滋病(AIDS),于1981年由美国疾病控制中心(Center for Disease Control in American, CDC)首次报道,到20世纪80年代中期,艾滋病发展成为一个全球性的流行病,其病原也被确定为人类免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus, HIV).有关艾滋病病理及治疗领域均取得了令人鼓舞的成绩,特别是近几年高效抗病毒治疗使艾滋病的发病率和病死率明显降低.

游泳对不同月龄小鼠肝内自由基代谢的影响

选用 3月龄、8月龄、1 2月龄小鼠 ,分别作为青年组、成年组、老年组进行游泳训练 ,测定肝组织的SOD、MDA、T-AOC。实验结果发现 :( 1 )有氧训练可以促进体内氧化与抗氧化的平衡向有利于机体的方向发展 ;( 2 )有氧训练可以抑制老年肝、肺内因增龄引起的抗氧化能力的降低 ;( 3) 7周游泳训练对不同年龄组影响是不同的 ;( 4)一次 90分钟的有氧运动后 ,抵御急性刺激的能力训练组强于对照组 。

北京地区儿童急性上呼吸道感染中肠道病毒感染谱的分析

目的了解北京地区儿童急性上呼吸道感染中肠道病毒(EV)的感染谱。方法收集2009-05-09于北京儿童医院就诊的急性上呼吸道感染患者的咽拭子1 121份,用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法对EV的VP1基因进行了扩增并测序。结果发现55例为EV阳性,分属14个血清型。其中44例属于A种EV(EV-A),11例为EV-B。检出EV与手足口病及无菌性脑膜炎中检测到的EV具有高度同源性,但和EV原型株相比较均产生了不同程度的变异。结论2009年北京地区急性上吸道感染儿童中以EV-A感染为主,与成人病原谱存在差异。

谷氨酸脱羧酶1促进肠道病毒D68型复制研究

目的研究谷氨酸脱羧酶(glutamic acid decarboxylase,GAD)对肠道病毒(enterovirus,EV)体外复制的影响。方法首先利用PCR方法检测人体48种组织芯片中GAD1和GAD2的表达,再外源转染GAD1及其突变体后,感染EV-D68、EV-A71、柯萨奇病毒A16(coxsackievirus A 16,CV-A16)和鼻病毒16(human rhinovirus 16,HRV16),检测这些肠道病毒结构蛋白的变化。结果GAD1主要分布于神经系统,GAD2主要分布于神经系统和胰腺。在神经系统中GAD1的含量远高于GAD2。转染GAD1后EV-D68的复制增强,将GAD1的功能位点405位突变后,这种促进病毒复制的作用消失。GAD1同样可以促进其他肠道病毒如EV-A71、CV-A16和HRV16的复制。结论神经系统高表达的GAD1在体外具有促进肠道病毒复制的作用。

对有氧运动(游泳)抗衰老作用的研究(一)——游泳对不同月龄小鼠自由基代谢的影响

当前 ,人口老龄化在全球范围内迅速增长 ,人们更加关注和重视对衰老问题的研究。对不同年龄雄性小鼠进行研究 ,经七周有氧 (游泳 )训练 ,较系统的观察有氧运动训练对不同年龄小鼠体内自由基代谢的影响 ,认为 :1)小鼠在生长过程中 ,体重、器官重量及 SOD活性的变化趋势表现为先升高后降低 ,表现为青年组非常显著低于成年组 ,成年组显著高于老年组 ;肝脏和肺内的自由基代谢产物是随龄增加的 ,表现为 MDA含量及 L F含量 ,老年组显著高于青年组 ;2 )有氧训练可以促进体内氧化与抗氧化的平衡向有利于机体的方向发展 ;3)有氧训练可以抑制老年肝、肺体内因增龄引起的抗氧化能力的降低 ,能延缓肝、肺的衰老过程 ;4)七周游泳训练对不同年龄组影响是不同的 ;5 )一次 90 min的有氧运动后 ,抵御急性刺激的能力训练组强于对照组 。

人类免疫缺陷病毒/丙型肝炎病毒共感染对实验室诊断影响的研究

目的研究人类免疫缺陷病毒(HIV)/丙型肝炎病毒(HCV)共感染对两种病毒感染实验室诊断的影响。方法对300例经免疫印迹试验(WB)确认的HIV感染者,以酶免疫测定HCV抗体,测定CD4/CD8计数;其中197例测定病毒载量,逆转录聚合酶链反应检测HCV核酸,阳性样品限制性片段长度分析丙肝分型,比较共感染和非共感染组在各检测诊断指标的差别。结果HCV诊断HCV抗体阴性组中19.5%为核酸阳性。多元回归分析,HCV核酸阳性,1b+2a混合感染,1b基因型的感染3个因素对HCVEIA检测的S/CO值的升高有独立的显著影响。HIV诊断300例,共感染组和非共感染组HIVELISAA<3的样本比例分别为4/265,5/41,有P<0.01的差异有统计学意义;A>3的样品中CD4分组后按比例取77份比较WB条带,共感染组P55条带出现率显著高于非共感染组(16/30,12/47,P<0.01)。结论HIV免疫抑制可造成很高的HCV抗体假阴性率,该人群推荐HCV核酸定性检测。共感染对HIVELISA检测的影响表现为强阳性比例的显著提高;对HIVWB各主要诊断条带未见影响,共感染组p55条带比例显著高可能提示病毒间免疫和分子水平相互作用。对HCVEIA3的S/CO值有独立影响的因素包括HCV核酸阳性,1b+2a混合感染,1b基因型。

对有氧运动(游泳)抗衰老作用的研究(二)——增龄小鼠心肌收缩蛋白ATPase活性、肌浆网SRCa^(2+)-ATPase活性的影响

对不同年龄雄性小鼠进行研究 ,经七周有氧 (游泳 )训练 ,较系统的观察有氧运动训练对增龄小鼠的影响 ,研究认为 :1)从 3月到 12月龄 ,心肌肌动球蛋白ATPase、肌球蛋白ATPase活性逐渐下降 ,增龄引起心肌收缩蛋白ATPase活性的降低。 2 ) 3月到 12月龄 ,心肌SRCa2 + -ATPase活性也逐渐下降。 3) 8周游泳训练缓解了心肌收缩蛋白ATPase活性增龄性下降速度 ,改善了心肌肌浆网钙摄取功能的增龄性降低趋势。 4)从心肌收缩蛋白及肌浆网ATPase变化看 ,老年期对一次急性运动的反应比年轻者更敏感 ,而游泳训练则能降低各年龄段对运动刺激的反应敏感性。 5 ) 8月龄 ,游泳训练对心肌收缩蛋白ATPase活性产生明显改善作用 ,而在 12月龄游泳训练对SRCa2 + -ATPase活性的影响非常显著。在老年期心脏仍保持一定的可塑性而对运动训练产生适应。

一种肠道病毒D68型感染性克隆的构建方法

目的构建肠道病毒D68型（EV-D68）cDNA感染性克隆。方法利用聚合酶不完全引物延伸（Polymerase Incomplete PrimerExtension，PIPE）法分别扩增EV—D68基因组eDNA片段与pBR322载体，得到的片段连接后测序，连接产物测序正确后作为载体与EV—D68的基因组的第2段扩增连接。以此类推，边扩增边连接，并测序，直到全基因组全部连接到pBR322上，在EV-D68基因组前面插入T7启动子后，经体外转录后的RNA转染RD细胞，转染后显微镜下连续观察是否出现细胞病变，并利用EV—D68的VP1特异性抗体进行免疫印迹确认。结果转染后24h在显微镜下可以观察到典型的肠道病毒细胞病变，病变细胞裂解液的免疫印迹得到特异的EV—D68的VP1条带，这些结果显示包装出EV—D68病毒，这些包装的病毒经传代实验显示可以连续传代。结论成功构建EV—D68eDNA感染性克隆。