非小细胞肺癌驱动基因突变与临床病理特征的关系

目的探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中驱动基因突变并分析其与临床病理特征的关系。方法选取病理资料完整的550例原发性NSCLC作为研究对象,采用蝎形探针扩增阻滞突变系统(scorpion ARMS)荧光定量PCR法对184例NSCLC进行9种驱动基因检测,对另外366例NSCLC患者采用Illumina测序法进行10种驱动基因检测,并回顾性分析患者的临床病理特征。结果550例NSCLC中有405例检测到基因突变(73.6%),分别为EGFR(57.3%)、KRAS(5.8%)、PIK3CA(2.2%)、ALK(3.8%)、RET(2.0%)、ROS1(1.1%)、NRAS(0.2%)、BRAF(1.5%)、HER-2(2.0%)和MET(0.3%),检出驱动基因联合突变12例(2.2%),EGFR双位点突变8例(1.5%)。在NSCLC中,腺癌、女性、无吸烟史、周围型和以腺泡型为主的腺癌患者更易发生驱动基因突变(P<0.05)。EGFR基因突变人群特征为女性、无吸烟史、腺癌、周围型,多发于以腺泡型为主型的腺癌中,少见于以实体型和黏液型的腺癌患者中(P<0.05)。KRAS基因突变率在男性、有吸烟史和以浸润性黏液型为主的腺癌中更高,不易发生在贴壁型腺癌中(P<0.05)。PIK3CA基因突变在男性中发病率较高(P<0.05)。ALK基因突变率在以实体型为主的腺癌和伴有淋巴结转移的患者中更高且不易发生在贴壁型腺癌中(P<0.05)。RET基因在以实体型为主的腺癌中突变率较高(P<0.05)。EGFR双位点突变多发于有淋巴结转移和以乳头型为主的肺腺癌中(P<0.05)。结论NSCLC中EGFR、KRAS、ALK基因存在较高的突变率,其他驱动基因改变以及联合突变的突变率虽低,但意义重大不容忽视,其中EGFR合并PIK3CA突变提示患者有较高的临床分期。多基因联合检测在临床上对加快筛选有效治疗目标人群具有重要意义。

萘哌地尔衍生物BWYJ对大鼠血压及猫血流动力学的影响

目的:观察萘哌地尔衍生物BWYJ对高血压模型和正常大鼠血压及猫血流动力学的影响。方法:分别对高血压和正常大鼠静脉及灌胃给药,观察血压变化;利用麻醉开胸测定猫血流动力学的变化;采用侧脑室给药、猫在体瞬膜神经肌肉标本初步探讨降压机制。结果:BWYJ1.2及2.4mg·kg-1iv,降低正常及高血压大鼠收缩压(SAP)和舒张压(DAP),且随剂量的增加效应增加,作用时间延长。BWYJ10、20及40mg·kg-1灌胃给药,降低清醒正常大鼠SAP(最大效应分别下降4.6%、13.0%、16.8%)和DAP(分别下降7.1%、17.9%、20.5%),3h后恢复。BWYJ5、10及20mg·kg-1灌胃清醒高血压大鼠,降低SAP(下降7.3%、16.5%、20.4%)和DAP(8.5%、14.8%、24.5%),强于正常大鼠且时间明显延长。麻醉猫十二直肠给药,BWYJ2.5mg·kg-1仅DAP、LVWI降低,BWYJ5mg·kg-1使SAP、DAP、TPR、±dp/dtmax及LVWI明显降低,其他无明显变化。结论:BWYJ静脉或灌胃给药对正常和肾性高血压大鼠产生降压作用,降压作用与中枢、神经节无关。

呼吸科专业临床药师下临床的体会

临床药师开展临床药学服务工作不仅是医院临床工作发展的需要,也是医院临床药师自身发展的需要。临床药师在参与临床工作过程中,应注意自身的角色定位,发挥药学特长,为临床提供与用药相关的服务。为此,笔者对两年来在呼吸科下临床的工作体会进行了总结。

Delicaflavone通过PI3K/AKT/mTOR通路调控上皮-间质转化抑制吉非替尼耐药肺癌PC-9/GR细胞迁移和侵袭

目的:研究Delicaflavone对人吉非替尼耐药肺癌PC-9/GR细胞迁移与侵袭作用及机制。方法:采用MTT法检测Delicaflavone对PC-9/GR细胞存活率的影响;采用细胞划痕实验和Transwell实验测定Delicaflavone对PC-9/GR细胞迁移和侵袭能力的影响;采用Western blotting法检测Delicaflavone对PC-9/GR细胞基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinases 9,MMP-9)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinases 2,MMP-2)、钙黏连蛋白(E-cadherin,N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)及PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达情况。结果:与对照组比较,20 mg/L Delicaflavone作用24 h能显著抑制PC-9/GR细胞的细胞活性(P<0.05),而浓度在10 mg/L以下时则对细胞活性无明显影响。Delicaflavone能够浓度依赖性地抑制PC-9/GR细胞的迁移率、侵袭细胞数量(P<0.05和P<0.01),并能浓度依赖性地减少PC-9/GR细胞迁移标记蛋白(MMP-9和MMP-2)的表达(P<0.01),上调E-cadherin、下调N-cadherin和Vimentin的表达(P<0.01)。此外,Delicaflavone还浓度依赖性地减少p-PI3K、p-Akt和p-mTOR表达(P<0.01)。结论:Delicaflavone具有抑制PC-9/GR细胞迁移及侵袭能力的作用,该作用与Delicaflavone通过PI3K/Akt/mTOR通路调控上皮-间质转化有关。

静脉输液添加药物的调查分析

简要介绍静脉输液中添加药物应注意的问题。指出应根据药物治疗的先后顺序、药品理化性质、添加品种进行输液配伍。原则上每次静脉输液添加药物种类不得超过2种,应尽量减少配伍药品的品种和数量,做到能口服的就不要使用静脉注射,以保证用药的安全。

万古霉素血药谷浓度低于目标值的影响因素分析

目的探讨万古霉素血药谷浓度低于目标值的影响因素.方法收集我院万古霉素血药谷浓度监测患者177例的临床资料,采用多因素回归分析考察万古霉素血药谷浓度低于目标值的独立影响因素.结果达标组98例,未达标组79例,两组平均血药浓度值分别为(14.08±2.555)mg/L和(6.95±1.996)mg/L,单因素分析结果示两组间年龄、血肌酐水平、红细胞计数、血红蛋白及全身炎症反应综合征(SIRS)评分差异有统计学意义(P<0.05);而用药剂量、总蛋白、清蛋白、总胆红素、丙氨酸氨基转移酶、血尿素氮、胱抑素C、白细胞计数、中性粒细胞计数、降钙素原、C反应蛋白比较,差异无统计学意义(P>0.05);多因素分析结果示年龄、血肌酐水平及SIRS评分与万古霉素血药谷浓度低于目标值相关.结论患者年龄、血肌酐水平及SIRS评分是万古霉素血药谷浓度低于目标值的独立影响因素.

BWYJ对猫血流动力学的影响

目的 观察BWYJ对麻醉猫血流动力学的影响。方法 利用麻醉开胸猫测定血流动力学的各项指标的变化。结果 BWYJ 2 .5mg·kg 1十二指肠给药 ,与溶媒组比较 ,DAP、TPR及LVWI明显降低 ;5mg·kg 1可明显降低麻醉猫的SAP、DAP、±dp/dtmax ,LVSP ,TPR及LVWI,对心率影响不明显。结论 BWYJ通过降低外周阻力及抑制心肌收缩力来降低血压 ,最终使左心作功降低 ,心肌耗氧量减少。

鲍曼不动杆菌耐药性分析及治疗建议

目的分析我院鲍曼不动杆菌的耐药情况,指导临床合理使用抗菌药物。方法回顾性对我院2009年1月～2009年12月243株鲍曼不动杆菌药敏结果采用WHONET5.4进行统计、分析。结果鲍曼不动杆菌检出率最高的标本类型是痰,临床科室是ICU。在常用的抗菌药物中,头孢哌酮舒巴坦钠耐药率最低为7%,米诺环素次之为20%。结论鲍曼不动杆菌耐药现象严重,临床应合理选用抗菌药物,减少耐药菌株的产生。

靶向药物治疗晚期非小细胞肺癌患者预后因素分析

目的 探讨分子靶向药物治疗晚期非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer, NSCLC)患者预后的影响因素。方法 回顾性分析89例经分子靶向药物治疗的晚期NSCLC患者的临床资料和随访结果,采用多因素回归分析法考察影响预后的因素。结果 89例晚期NSCLC患者,1年生存率93.3%(83/89)、3年生存率57.3%(51/89)。预后不良组性别、年龄、吸烟、远处转移、无化/放疗占比均高于预后良好组,差异有统计学意义;两组分期、基因突变及淋巴结转移差异无统计学意义,多因素分析结果显示:性别、吸烟、远处转移是靶向药物治疗晚期NSCLC患者预后不良的独立危险因素。结论 靶向药物治疗晚期NSCLC效果确切,但仍存在预后不良情况,主要受性别、吸烟、远处转移等因素影响,临床需高度重视。

万古霉素重点点评模式的建立与应用

目的建立万古霉素重点点评模式及其应用评价。方法采用回顾性分析方法,汇总使用万古霉素的病例,参照相关指南和专家共识,建立点评模式,评价其应用效果。结果建立了科学、可行的合理使用万古霉素的点评模式。结论建立万古霉素重点点评模式有利于促进临床合理用药。

胃肠道间质瘤靶向药物治疗相关基因突变临床分析

目的探讨靶向药物治疗相关基因(C-KIT和PDGFRA)在治疗胃肠道间质瘤中的作用.方法收集福建省立医院确诊的胃肠道间质瘤240例,采用Sanger测序法检测基因突变情况(C-KIT基因9、11、13、17、18号外显子,PDGFRA基因12、18号外显子),分析其与临床特征的关系.结果1)C-KIT基因突变率为79.2%,其11、9及13号外显子的突变率分别为80.5%、10%、4.2%,11号外显子以缺失突变及点突变多见.2)PDGFRA基因突变率为6.7%,其18号外显子突变率93.75%,D842V点突变多见.3)C-KIT基因11号外显子突变在胃部发生率高,以中高危级别多见,组织学以梭形细胞型多见.PDGFRA基因18号外显子突变在胃部发生率高,以极低危、低危级别多见,组织学以上皮细胞型为主.结论胃肠道间质瘤患者发生C-KIT/PDGFRA基因突变的频率很高,突变位点及形式多样,建议临床治疗前进行C-KIT/PDGFRA基因联合检测,为靶向药物治疗提供依据.

酪氨酸激酶抑制剂诱导的间质性肺病的研究进展

酪氨酸激酶抑制剂(TKI)开启了肿瘤分子靶向治疗的新时代。在其无数的不良反应中,间质性肺病(ILD)是最严重的疾病之一,最常见的表现为呼吸闲难、咳嗽、发热和低氧血症,常使用类固醇治疗。在目前批准的TKI中,已报道有16种TKI(57%)可诱导ILD,其发生频率、发生的时间间隔和严重程度不同。据报道,日本人群的发病率约为1,6%?4,3%,非日本人群的发病率为0,3%?1,0%。死亡率在20%?50%的范围内。已有研究明确了TKI致ILD的易感性和预后风险因素,其中患者为男性、有吸烟史、既往有肺纤维化是主要的风险因素。虽然确切的机制尚不清楚,但越来越多的证据表明可能与免疫因素有关。通过对患者进行全面评估并排除其他原因,确定是TKI诱导的ILD,则应停止使用TKI,并积极使用类固醇药物。

自噬相关基因Beclin1和LC3在卵巢浆液性癌中的表达及临床意义

目的检测Beclin1和LC3在卵巢浆液性癌(ovarian serous carcinoma,OSC)中的表达,探讨两者与OSC临床病理特征及预后的关系。方法采用免疫组化Max Vision两步法检测63例OSC和20卵巢浆液性囊腺瘤组织中Beclin1和LC3蛋白的表达,分析两者与OSC临床病理特征及预后的关系。应用RT-PCR和Western blot法检测10例新鲜OSC组织和相应癌旁组织中Beclin1和LC3 mRNA和蛋白的表达。结果在OSC组织中Beclin1和LC3蛋白阳性率(36.51%、33.33%)均低于卵巢浆液性囊腺瘤组织(65.00%、60.00%),差异有统计学意义(P=0.025,P=0.034)。Beclin1蛋白表达与临床FIGO分期和病理分级有关(P=0.001,P=0.001),与患者年龄、发病部位、肿瘤大小及有无盆腔淋巴结转移无关(P>0.05)。LC3蛋白表达与临床FIGO分期和盆腔淋巴结转移有关(P=0.013,P=0.041),与患者年龄、发病部位、肿瘤大小和病理分级均无关(P>0.05)。Beclin1和LC3在OSC中的表达呈显著正相关(r_s=0.373,P=0.03)。10例新鲜OSC组织中Beclin1和LC3 mRNA的相对表达量(0.581±0.091、0.650±0.090)低于癌旁组织,两者比较差异有统计学意义(t=8.083,t=6.614;P=0.016,P=0.022)。新鲜OSC组织中Beclin1和LC3蛋白的相对表达量明显低于癌旁组织,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析表明,Beclin1和LC3表达与OSC患者预后相关(P=0.028 3,P=0.018 5)。结论自噬相关基因Beclin1和LC3在OSC组织中的表达下降,导致自噬功能减弱,可能与OSC的发生、发展和预后不良相关。

细胞自噬对紫杉醇诱导宫颈癌CaSki细胞死亡的影响(英文)

目的:通过对自噬基因Beclin1的表达调节来观察细胞自噬对紫杉醇诱导人宫颈癌CaSki细胞株死亡的影响,并探讨在该过程中自噬与凋亡之间的相互作用及关系。方法:利用脂质体法将Bec-lin1的过表达质粒pcDNA3.1-Beclin1和RNA干扰质粒pSUPER-Beclin1分别体外转染CaSki细胞并筛选稳定表达株后,电镜下观察细胞内自噬囊泡的形成,Western印迹检测转染前后Beclin1与LC3蛋白的表达变化。上述细胞株经紫杉醇作用后MTT法检测细胞增殖情况的改变,流式细胞仪检测自噬细胞与凋亡细胞的百分率。结果:在Beclin1基因过度表达的CaSki细胞株中,电镜观察到细胞内存在大量的自噬囊泡;Beclin1与LC3蛋白的表达在pcDNA3.1-Beclin1转染细胞株中被上调。MTT法检测提示Beclin1过表达细胞株存活细胞明显少于未转染对照细胞株。流式细胞仪检测提示经紫杉醇作用后与空白对照组比较,Beclin1过表达组自噬细胞与凋亡细胞百分率均有明显增加,其中凋亡增加尤其明显;而Beclin1干扰组自噬细胞与凋亡细胞百分率均有所减少。结论:在紫杉醇对宫颈癌CaSki细胞株的杀伤过程中细胞自噬与凋亡均发挥了作用,在Beclin1基因过度表达的CaSki细胞株中可通过增加紫杉醇诱导的细胞凋亡来增强药物对肿瘤细胞的杀伤作用。

MiTF家族易位性肾细胞癌临床病理分析

目的探讨小眼畸形转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MiTF)家族易位性肾细胞癌的临床病理特点、免疫表型、分子特征、鉴别诊断及预后。方法分析7例MiTF家族易位性肾细胞癌的临床病理资料,对肿瘤标本进行常规病理组织学、免疫组化和FISH检查,并复习相关文献。结果 7例肿瘤中女性4例,男性3例。患者年龄27～65岁,平均31. 3岁。肿瘤细胞呈腺泡状、巢状、乳头状结构排列,胞质较丰富,胞质呈完全透明状至丰富嗜酸性染色。肿瘤内时常可见色素及沙砾体。2例TFEB易位性肾细胞癌显示特征性的双相型组织学形态,特征性小细胞成簇聚集在腺泡中央围绕粉染的透明基质呈"玫瑰花环"样排列。5例TFE3易位性肾细胞癌和2例TFEB易位性肾细胞癌均分别呈细胞核弥漫强表达TFE3和TFEB。荧光原位杂交检测5例TFE3易位性肾细胞癌和2例TFEB易位性肾细胞癌均存在异常分离信号。结论 MiTF家族易位性肾细胞癌是一种少见肿瘤,TFEB易位性肾细胞癌临床更为罕见,其预后比TFE3易位性肾细胞癌较好,需结合患者年龄、病理特点、免疫表型及分子特征进行诊断。荧光原位杂交检测基因易位是诊断该肿瘤的金标准。

结直肠癌错配修复蛋白MLH1、MSH2、MSH6及PMS2表达与临床病理特征的关系

目的检测结直肠癌(CRC)患者DNA错配修复(MMR)蛋白表达,分析MMR蛋白的缺失与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化法检测202例CRC中4种MMR蛋白(MLH1、MSH2、MSH6及PMS2)表达情况,将4种MMR蛋白中的1种及以上表达缺失判定为错配修复基因缺陷(d MMR),全部阳性判定为错配修复基因完整(p MMR)。检测CRC患者MMR蛋白的缺失情况并分析其与临床病理特征的关系。结果 (1)202例CRC中p MMR组179例,MMR蛋白表达率88.6%;d MMR组23例,MMR蛋白缺失率为11.4%。MLH1、MSH2、MSH6及PMS2的表达缺失率分别为4%、2%、3%及8.4%。其中共同缺失表达类型为MLH1-PMS2、MSH2-MSH6者分别为8例(4%)、4例(2%),经统计学分析二者均呈正相关(γs=0.670,P<0.001;γs=0.812,P<0.001),仅PMS2蛋白缺失者9例(4.5%),仅MSH6蛋白缺失者2例(1%)。(2)CRC癌患者d MMR与p MMR在发病年龄、肿瘤部位、组织学类型、临床分期及淋巴结转移等临床病理特征方面存在差异(P<0.05),而在性别、肿瘤大小、CEA和CA199含量、RAS和Braf基因突变等方面均无明显差异(P>0.05)。结论 (1)d MMR结直肠癌比例偏低,而且MLH1和PMS2蛋白表达缺失较MSH2和MSH6多见。MLH1和PMS2、MSH2和MSH6常协同表达或缺失。(2)MMR蛋白与CRC临床病理特征关系密切。MMR蛋白对预测CRC的恶性程度、临床预后及近、远端CRC发病机制方面可能有指导意义。

凋亡相关蛋白Livin与Caspase-3在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的表达及其临床意义

目的:观察凋亡相关蛋白Livin与Caspase-3在弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中的表达,探讨其相关性及临床病理意义,为淋巴瘤的临床治疗和预后判断提供参考依据。方法:采用免疫组织化学方法检测51例DLBCL和20例淋巴结反应性增生(RHL)组织中Livin与Caspase-3的表达水平,分析Livin和Caspase-3与DLBCL临床病理特征和预后的关系。结果:51例DLBCL Livin表达率为58.82%(30/51),在RHL中未见表达,(P<0.05)。Livin表达率与DLBCL的临床分期和病理类型相关(P=0.017,P=0.006),与患者性别、年龄及结外受累无关。Caspase-3在51例DLBCL和20例RHL中的表达率分别为25.49%(13/51)和85.0%(17/20)(P<0.05)。Caspase-3的阳性率与DLBCL的临床分期相关(P=0.025)。Caspase-3与患者性别、年龄、病理类型及结外受累无关。Livin与Caspase-3两者在DLBCL的表达呈显著负相关(γs=-0.333,P=0.017)。Kaplan-meier生存分析表明,Livin和Caspase-3的表达与DLBCL患者的预后相关(P=0.0089,P=0.0210)。结论:Livin在DLBCL中高表达,同时在非生发中心亚型的DLBCL中高表达;Caspase-3在DLBCL中低表达,并且两者在DLBCL中表现为负相关。Livin和Caspase-3的表达与DLBCL临床预后相关。Livin与Caspase-3有可能作为判断DLBCL预后的生物学指标。

B细胞淋巴瘤73例临床病理分析

为了探讨B细胞淋巴瘤临床病理特征,应用组织形态学和免疫组织化学分析73例B细胞淋巴瘤患者的病理资料,同时行CD20、CD3、CD5、CD23、CD30、CD79α、TdT、Bcl-2、CyclinD1、Lysozyme和Ki-67的免疫表型测定,并根据WHO新分类重新分类。73例B细胞淋巴瘤患者中,弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)38例(52.05%),包括中心母细胞型(CB)27例,免疫母细胞型(IB)5例,间变型(AV)4例,富于T细胞或组织细胞型2例;滤泡性淋巴瘤(FL)18例,黏膜相关淋巴组织型边缘区B细胞淋巴瘤9例,套细胞淋巴瘤(MCL)2例,B淋巴母细胞性淋巴瘤(B-LBL)4例,B小淋巴细胞淋巴瘤(B-SLL)2例。B细胞淋巴瘤低度恶性组Ki-67阳性率为20.69%(6/29),高度恶性组阳性率为75%(33/44),P<0.01。初步研究结果提示,WHO新分类对B细胞淋巴瘤的诊断便于掌握,实用性强,与临床治疗和预后判断有密切关系。通过标准的形态学和一套规范的免疫组化检测,结合WHO新分类可应用于B细胞淋巴瘤的诊断和预后。

钩藤总碱与夏天无总碱合用对大鼠脑缺血再灌注的影响

目的观察钩藤总碱(钩藤)与夏天无总碱(夏天无)合用对脑缺血/再灌注损伤的保护作用。方法各组造模前灌胃给药每天2次,共5次,末次给药30min后,采用大鼠大脑中动脉缺血(2h)/再灌注(22h)制作脑缺血损伤模型,造模12h后再给药1次,并进行神经病学评分,检测脑梗塞范围及脑组织水含量,大鼠脑组织中一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量的变化。结果两药合用可降低大鼠脑缺血/再灌注后神经病学评分及梗塞范围,降低脑组织MDA含量、NOS活性及升高SOD活性(P<0.05),联合用药的效应较单用钩藤或夏天无增强(P<0.05),而对中枢抑制作用较单用钩藤减轻。结论钩藤和夏天无联合应用对脑缺血/再灌注损伤有保护作用,其作用机制与抑制脑NOS活性、提高SOD活性及减少脑神经细胞脂质过氧化损伤有关。