茶学硕士研究生分子生物学课程设计

随着分子生物学在各个学科之间的广泛应用,其基本理论及操作技术已经成为茶科学研究中必不可少的方法之一,如茶树种质资源研究、茶树植物保护、茶叶加工及功能成分保健机理研究等各领域。为使茶学硕士研究生更系统地掌握分子生物学理论和方法,能熟练地将分子技术应用于具体的科研试验,以贵州大学茶学院茶学硕士点为例,针对当前开设的分子生物学课程中普遍存在的理论课程结构体系松散、与茶产业应用联系不紧密、实验课程比例严重不足等实际问题,有针对性地开展课程的教学内容改革探索。基础理论知识部分,通过基础知识结构重组、设置主题教学、小组自主学习等灵活的教学方式吸引学生的学习兴趣,逐步夯实学生的理论基础知识。围绕分子生物学在茶叶生产、加工等方面的具体应用,突出实验教学内容和实践项目设计,注重学生知识运用和创新能力的培养。通过多方面的课程改革措施来综合提升该课程的教学质量和效果,促进茶学硕士培养的高质量发展。

仁怀市苔藓植物物种多样性调查

为了解贵州省仁怀市苔藓植物的物种多样性,主要采用样线法对其开展调查。本研究从丰富性、属种相似性分析、区系成分分析和生态群落4个评价指标对仁怀苔藓植物物种多样性进行综合评价。结果表明:仁怀市现有苔藓植物3门4纲30目68科166属469种(含4亚种、10变种),其中藓类植物2纲15目42科125属364种(含6变种)、苔类植物1纲13目24科39属103种(含4亚种、4变种)及角苔类植物1纲2目2科2属2种,种类丰富,并发现大量的新分布类群;区系组成中以东亚成分占主要优势,且温带的特征明显并与热带成分联系密切;与宽阔水和习水中亚热带常绿阔叶林国家级自然保护区相比,仁怀市苔藓植物丰富度较高,属、种相似度较高;生态类型以石生为主,叶附生类型最少,同时具典型的水生类型。调查结果为仁怀市苔藓植物种类组成、空间关系和资源分布格局的分析提供理论依据,为苔藓植物的保护和合理开发利用奠定基础。

食品微生物对发酵烟叶品质的影响

为了观察分离的细菌菌株对烟叶品质的影响,对初烤烟叶B3F进行单菌株50d的发酵处理。结果表明,从豆豉中分离的芽孢杆菌(Bacillus sp.)对烟叶品质有明显的改善作用,烟叶的各种化学成分含量及各成分之间趋于平衡,香气趋于醇和丰满、细腻,刺激性和杂气明显减少;从普洱茶中得到的PE-1、PE-2菌株对烟叶品质也有一定的提高。

枯草芽孢杆菌对烟叶主要致香物质的影响

为改善烟叶品质,增加烟叶香气,用从豆豉中分离出的1株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)悬液喷雾接种于A2C2等级烟叶,在30℃、相对湿度65%条件下发酵15d,经同步蒸馏萃取(SDE)发酵烟叶,色谱质谱法(GC-MS)分析萃取物中醇、酸、酯类及新植二烯致香物质的含量。结果表明,经枯草芽孢杆菌发酵处理的烟叶其醇、酸、酯类总量均较未接种烟叶增加,新植二烯含量差异不大;当烟叶接种浓度为2.0×108个/mL时,醇、酸、酯类总量较未接种烟叶分别增加28.145%、102.658%和22.289%,烟叶香气质提高,吃味改善,杂气减少,刺激性降低,烟气细腻、柔和,感官品质整体提高。结论:枯草芽孢杆菌在烟叶增香、提质方面有较好效果。

茯砖茶分离菌对初烤烟叶的改质效果

从茯砖茶中分离并鉴定一株冠突散囊菌(Eurotium cristatum),并将其制成不同浓度的孢子悬液接种到云85,B3F级初烤烟叶上。在固定湿度(RH,70%±2%),不同温度下,发酵50d,观察该菌对烟叶品质的改善效果。理化指标测定及感官评吸结果显示:在30℃,孢子浓度为1×107个/mL条件下,该菌对烟叶品质改善显著,还原糖、水溶性总糖含量总体增加,全钾含量降低,糖/碱比、氮/碱比更加趋向于最适比例;烟叶香气质、香气量变好,杂气和刺激性降低,甜感和细腻度都有所增加,烟碱含量下降,总体质量得到明显提高。

杀二斑叶螨高毒力环链棒束孢菌株的筛选及其对尼氏真绥螨的影响

为得到杀二斑叶螨Tetranychus urticae(Koch,1836)高致死率的环链棒束孢Isaria cateniannulata(Z.Q.Liang)Samson&Hywel-Jones菌株,明确其最优菌株对尼氏真绥螨Euseius nicholsi(Ehara et Lee)存活率的影响,本文在室内用17株环链棒束孢菌株芽孢子和分生孢子对二斑叶螨雌成螨进行了致死率测定,并研究了最优菌株对尼氏真绥螨雌成螨存活率的影响。结果表明,13号菌株芽孢子的LT50为1.472 d,17号菌株的分生孢子的LT50为3.248 d,时间明显短于其他菌株,致死率明显高于其他菌株;该2个菌株处理尼氏真绥螨,在芽孢子和分生孢子浓度为2×108个/mL时,存活率分别为80.75%和70.75%。因此,在芽孢子和分生孢子浓度为2×107个/mL及以下时,环链棒束孢和尼氏真绥螨可以同时施用。

二斑叶螨高致死率虫生真菌菌株的筛选

为筛选防治二斑叶螨高致死率的虫生真菌菌株,为二斑叶螨杀螨剂的生产实践、广泛应用奠定理论基础,用5种虫生真菌7个菌株的分生孢子和芽孢子悬液,在温度27℃、湿度100%、浓度2×107个/mL条件下,对二斑叶螨雌成螨进行致死率筛选。结果表明:7d后,分生孢子悬液对二斑叶螨雌成螨的致死率从高到低依次为GZUIFR-Hl201001、GZUIFR-HL2010、GZUIFR-HL2008、GZUIFR-Bb2010、GZUIFR-Pc2012,芽孢子悬液对二斑叶螨雌成螨的致死率从高到低依次为GZUIFR-Hl201001、GZUIFR-Hl2008、GZUIFR-Hl2010、GZUIFR-Bb2010、GZUIFR-Pc2012、A3.4430、GZUIFR-Ps2010。菌株GZUIFR-Hl201001分生孢子和芽孢子的致死率均最高,分别是66.7%和100%。结论:虽然不同菌种或同种不同菌株以及同株不同培养方式所得的孢子对二斑叶螨雌成螨的致死率差别明显,但虫生真菌仍然是防治二斑叶螨极具潜力的微生物资源。

几株食用菌对初烤烟叶品质的影响

选取7株可食用真菌,接种于B3F级初烤烟叶,温度30℃,湿度(70±2)%培养50 d。通过测试烟叶的还原糖、烟碱、总氮、糖碱比、蛋白含量和样品感官评吸,对发酵后烟叶品质做理化和感官上的综合评价,以筛选出对烟叶品质有明显改善作用的菌株用于烟草的醇化研究。结果发现几株真菌对烟叶品质改善明显,特别是食用菌Z-7(Pleurotusostreatus)对烟叶品质改善显著。

304不锈钢离子化气流辅助切削试验

离子化气流辅助切削是将电离后的气流喷向切削区以起到润滑冷却作用的切削方式。分别在空气、空气流、离子化空气流、氮等离子体射流等气氛中进行304不锈钢的摩擦磨损和切削试验。结果显示,离子化空气流气氛具有良好的冷却润滑作用,摩擦因数相比干摩擦降低约46%,切向切削力和后刀面磨损相比干切削分别下降约24%和69%,并可显著减少黏着磨损和积屑瘤,大幅提高304不锈钢的摩擦磨损性能和切削加工效果。

超声波椭圆振动装置设计及其振动特性控制

基于PZT-8陶瓷晶片的压电效应和超声波声学特性,设计制造了超声波换能器和变幅杆。根据椭圆轨迹形成机理,搭建了超声波椭圆振动装置,分析了两相激励电压值和相位差与椭圆形状的关系。实验与测试结果表明:超声振子的谐振频率符合设计要求,单向振动轨迹为正弦谐振曲线,两振动系统运动叠加形成椭圆轨迹;根据特定加工条件调整装置激励电压和相位差,可控制椭圆振动轨迹的形状。

两个产孢梗束的节肢动物病原真菌新种

本文报道了来自中国贵州省两个产孢梗束的虫生真菌新种。一个为虫草属1新种,新莲蓬虫草Cordyceps neonelumboides sp.nov.。该种寄生于蜘蛛体上,可孕部莲座状,成熟子囊孢子断裂成次生孢子,分隔细胞长15.3~18.0μm。其无性型为刺束梗孢属,瓶梗指状,5.4~7.2μm×0.8~1.0μm;分生孢子长柱状,两端略尖,12.6~13.5μm×1.5~1.8μm,形成长的分生孢子链。另一个为被毛孢属1新种,毛虫被毛孢Hirsutella campes sp.nov.。该种显著特征为菌丝具隔,产孢细胞细长,锥形,或基部圆柱状,21.6~38.4μm×2.4~4.8μm,向上逐渐变细,宽0.9~1.5μm,分生孢子单孢或多孢,橘瓣状、梭形,6.0~8.4μm×2.9~4.3μm。文中讨论了两个新种与相近种之间的区别以及系统发育关系。

多功能旋转超声加工装置的设计与优化

设计了一种多功能旋转超声加工装置,可使多种普通机床具有运用旋转超声加工工艺加工硬脆软材料的功能。装置的标准莫氏锥与腔体分离且易更换,超声电信号由电磁感应非接触方式传输至振动系统,振动系统的换能器和变幅杆一体化设计为复合体,并用有限元方法进行优化,工具头用热装方式与振动系统连接。

复合菌发酵对野生猕猴桃果酒风味物质的影响

本文主要研究复合菌发酵对野生猕猴桃果酒风味物质的影响。考察了发酵温度、SO2添加量、糖度及酵母菌复合比例对果酒质量的影响,通过正交实验,得到最佳发酵工艺条件为:温度26℃,SO2添加量80 mg/L,糖度210 g/L,安琪酵母与酵母菌TP6复合比为2∶1,在此条件下酒精度可达10.6%vol,酒体风味理想。采用复合菌和安琪酵母发酵的果酒,经顶空固相微萃取-气相色谱-质谱鉴定,分别检测到35、24种化合物,并以醇类、酯类为主。

L波段可切换双波长高能量脉冲光纤激光器

报道了一种基于主振荡功率放大(Master Oscillator Power Amplifier, MOPA)结构的L波段可切换双波长且频率稳定的高能量单频偏振脉冲光纤激光器,可作为探测大气CO2激光雷达系统的发射光源。该脉冲光纤激光器系统主要由两个单频窄线宽外腔半导体激光器、脉冲调制系统和多级光纤放大器组成。通过控制磁光开关,可以实现1 572.018 nm和1 572.480 nm双波长自由切换。采用闭环温度控制技术,实现了种子激光器的输出频率和功率锁定。采用数字和模拟声光调制器串联,实现了高达80 dB的通断消光比。通过对光纤施加非均匀应力,从而提高了受激布里渊散射(Stimulated Brillouin Scattering, SBS)阈值。利用普通商用增益光纤及商业化保偏元器件,在波长1 572 nm、重复频率10 kHz时,实现平均输出功率1.5 W,脉宽309 ns,峰值功率485 W,单脉冲能量大于150μJ,信噪比大于25 dB的激光输出。整个激光器系统采用风冷散热且电功耗小于60 W。

一种寄生家蚕被毛孢的鉴定及产孢条件优化

【目的】对寄生家蚕的真菌被毛孢进行鉴定和孢子培养进行研究。【方法】采用形态特征比较和内转录间隔区(ITS)序列构建系统树进行鉴定,通过单因素筛选和正交试验进行产孢条件优化。【结果】根据形态特征比较和系统发育分析,该真菌为鹿儿岛被毛孢Hirsutella satumaensis Aoki。较优产孢条件为(质量体积比):蛋白胨3%,葡萄糖1%,蚕蛹粉1.5%,维生素B1 1%,硫酸镁0.05%,磷酸二氢钾0.1%,琼脂2%,蒸馏水1 000 mL,25°C。【结论】鹿儿岛被毛孢为已知种,文中对其显微特征进行了重新描述并补充相关分子系统学资料;产孢条件的优化可为该类群真菌孢子的获得与应用提供参考。

被毛孢属两个昆虫病原真菌的重新描述

【目的】调查研究被毛孢属真菌资源,丰富该属的物种多样性,完善已知种在公共数据库中的分类信息。【方法】从贵州省发现两个分别寄生于同翅目沫蝉、鳞翅目松梢螟成虫的真菌标本GZUIFR-dj14和GZUIFR-dy1,通过形态学观察和基于tef1、ITS和28S r DNA 3个基因序列的分子生物学系统发育分析对其进行鉴定。【结果】两个病原真菌被鉴定为两个已知种,分别为长白山被毛孢(Hirsutella changbeisanensis)和雷州被毛孢(Hirsutella leizhouensis)。【结论】重新描述了这两种被毛孢的标本和无性型分离菌株,对其新寄主、新栖息地进行了报道,并补充了分子序列、系统发育分析等分类信息。

寄主为蚧的层束梗孢一新记录种

在贵州茂兰国家自然保护区发现寄生蚧壳虫的层束梗孢属真菌gzuifr-hym201307jk.主要特征为孢梗束灰白色单生,14～17 mm＆#215;0.9 mm,产孢细胞柱状向上收缩变尖,顶部具有1～3个叉状的产孢小颈,大小10.8～ 14.0＆#215;4.3～5.4 μm;分生孢子梭形,7.6～ 10.8＆#215;4.3～5.4 μm.经鉴定该真菌为中国新记录种——Hymenos-tilbe furcata.

汤普森被毛孢对二斑叶螨致死率的建模分析

本文采用蒸汽压提供湿度的方法研究了在施用不同浓度的孢子悬液及不同温湿度下汤普森被毛孢对二斑叶螨Tetranychus urticae Koch的致死情况,并用灰色预测和回归分析建立了数学模型。结果表明:试验条件范围内,完全二次方程的拟合效果较好;在温度为28.09℃、湿度为100%、浓度为250万个/mL时,致死率达到81.66%,防效最佳;较湿度而言,温度对被毛孢的影响更为显著;在高浓度或高湿度下,被毛孢对环境的变化更为敏感。综合评价,汤普森被毛孢对二斑叶螨的防效欠佳,若欲推广,尚需进一步的改良。

一种寄生茶小绿叶蝉蜡蚧菌的鉴定及产孢条件优化

【目的】对寄生茶小绿叶蝉的丝状真菌进行鉴定和分生孢子培养研究。【方法】采用形态特征比较和转录间隔区(ITS)序列构建系统树进行分析,分生孢子培养通过单因素筛选和正交试验进行产孢条件优化。【结果】根据形态特征比较和系统发育分析表明,该真菌为渐狭蜡蚧菌Lecanicillium attenuatum Zare&W.Gams。最优产孢条件(质量体积比)为:蛋白胨2%,麦芽糖1%,蚕蛹粉1%,氯化钾0.05%,磷酸氢二钾0.1%,七水硫酸镁0.05%,琼脂1.5%,蒸馏水1 000 m L,25°C。【结论】通过形态特征比较和分子序列分析表明,罹病茶小绿叶蝉上的真菌为已知种——渐狭蜡蚧菌,并对该菌株进行了产孢条件的优化。研究结果为该菌株应用到茶小绿叶蝉的生物防治研究提供基础资料。

中国虫草一新记录种

【目的】对一个寄生鳞翅目幼虫的虫草标本Dxhir140901进行分类鉴定。【方法】采用形态学比较和基于ITS1-5.8S-ITS2r DNA的系统发育与进化网络分析进行鉴定。【结果】形态学观察:标本的分离菌株形态显示其为典型的被毛孢属真菌,具有两型产孢结构:A型产孢细胞柱状,(1.8-6.3)μm×1.8μm;B型产孢细胞锥形,基部柱状,向上逐渐变细无明显颈部,基部宽3-3.8μm,长21-63μm,颈部宽1.8-2.0μm,菌丝末端可直接形成产孢细胞;孢子橘瓣形或卵形,(8.1-10.8)μm×(2.7-5.4)μm,具粘液,黏液层厚1.8-2.7μm。系统发育分析结果显示该菌株与巨针线形虫草Ophiocordyceps macroacicularis聚为一支,支持率为98%,进化网络分析也支持上述结果。【结论】通过与O.macroacicularis的形态比较和分子系统学分析结果,Dxhir140901及其分离株Gzuifr-hir140901为巨针线形虫草Ophiocordyceps macroacicularis S.Ban,T.Sakane&Nakagiri的无性阶段,该种为中国新记录种。