桂皮醛通过TGF-beta信号通路调控结直肠癌细胞侵袭和转移研究

目的研究桂皮醛通过转化生长因子-β(TGF-β)信号通路调控结直肠癌细胞侵袭和转移的机制。方法用不同浓度桂皮醛处理人结肠癌SW480细胞,观察SW480细胞增殖活性、细胞凋亡、侵袭、转移能力及凋亡、上皮间质转化(EMT)、TGF-β/Smad3信号途径关键蛋白表达情况;用10 ng/mL的TGF-β1处理诱导SW480细胞EMT,并用80 mg/L的桂皮醇进行干预,观察SW480细胞中EMT、TGF-β/Smad3信号途径关键蛋白表达。结果桂皮醛处理后SW480细胞Bcl-2/Bax比率、细胞侵袭率、划痕愈合率、波形蛋白(Vimentin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、TGF-β、Smad3、Snail蛋白表达降低,细胞增殖抑制率、细胞凋亡率、E-cadherin蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);桂皮醛干预后能够缓解TGF-β1处理后诱导的Vimentin、N-cadherin、MMP-9、Smad3、Snail蛋白表达升高,E-cadherin蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论桂皮醛可能通过抑制人结肠癌细胞系SW480中TGF-beta/Smad3信号途径来抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,并抑制EMT,降低其侵袭转移能力。

急性髓细胞白血病FLT3-ITD基因突变与细胞遗传学的关系

目的探讨急性髓细胞白血病(AML)FLT3-ITD基因突变与细胞遗传学关系.方法采用PCR-DHPLC方法检测60例初治AML患者骨髓单个核细胞FLT3-ITD突变;应用G显带技术进行核型分析.结果 60例初发AML中,FLT3-ITD突变阳性率为21.67%(13/60);10例对照组均未检测到该突变;不同预后核型组FLT3-ITD突变阳性率不同,预后中等核型组突变率较高40.0%(6/15),预后中等核型组FLT3-ITD突变阳性者外周血白细胞数、骨髓白血病细胞比例高于预后好核型组及预后差核型组(P<0.01).结论 FLT3-ITD突变在AML中多发生于预后中等核型组,而且与预后不良相关;预后中等核型组FLT3-ITD突变阳性者具有外周血高白细胞、骨髓白血病细胞比例高的临床特点.FLT3-ITD突变检测在一定程度上可以弥补细胞遗传学的不足,有可能成为AML常规检测项目之一,有助于白血病的诊断及预后判断.

血小板增多导致血清假性高钾的修正

目的研究血小板增多与假性高血钾之间的关系,建立修正公式对假性血钾水平进行修正。方法将52例血小板增多患者的血清钾与血浆钾差异值(K-difference,DK)、血小板数量(PLT)和血小板平均体积(MPV)作为重要变量进行回归分析。结果根据回归方程得到修正公式:血钾值=血清钾-血小板数量×0.001-0.009(r=0.914)。结论该修正公式简单实用,准确可靠,可估算血小板增多患者的真实血钾水平。

急性肺损伤患者凝血及纤溶相关指标的临床意义

目的了解急性肺损伤(acute lung injury,ALI)患者早期的凝血、纤溶相关指标的变化规律,评价并筛选具有临床指导价值的指标。方法测定ALI组与健康人对照组、ALI存活亚组和病死亚组患者血浆中凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、抗凝血酶活性(AT∶A)、纤维蛋白原(Fib)、D-二聚体(D-D)、组织型纤溶酶原激活物(t-PA)、纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)等凝血、纤溶相关指标,比较组间各指标的差异。分析凝血、纤溶相关指标与急性生理和慢性健康评分Ⅱ(APACHEⅡ)的相关性。结果 ALI组血浆PT、APTT、TT及AT∶A分别为(10.6±3.8)s、(25.2±5.3)s、(10.2±3.3)s、(45±13.1)%,低于健康对照组(13.3±2.6)s、(34.5±6.2)s、(14.3±4.1)s、(95±19.2)%(P分别<0.05、0.01、0.05、0.01)。ALI组PAI-1、t-PA分别为(93.56±36.82)、(20.63±5.21)ng/mL高于健康人对照组(36.49±8.79)、(2.32±3.33)ng/mL(P均<0.01)。存活亚组与死亡亚组D-D、PAI-1、t-PA、AT∶A均有显著性差异。PAI-1、t-PA与APACHEⅡ评分呈正相关(r分别为0.672、0.653;P均<0.01);AT∶A与APACHEⅡ评分呈负相关(r=-0.717,P<0.01)。结论 PT、APTT、TT、AT∶A、PAI-1、t-PA在ALI的发病过程中起重要作用,可作为早期诊断及指导治疗的辅助指标;AT∶A、PAI-1、t-PA是评估病情严重程度的监测指标;在ALI发病早期D-D、PAI-1及t-PA升高,AT∶A降低,是预后不良的预测指标。

骨髓间充质干细胞抗肺泡上皮细胞凋亡作用研究

目的研究骨髓间充质干细胞对LPS诱导的肺泡上皮细胞凋亡的影响及作用.方法用人肺泡上皮细胞株(A549细胞株)与人骨髓间充质干细胞株(第3代h BMMSC株)建立Transwell非接触分层共培养体系,分4组:(1)空白对照组;PBS+A549;(2)LPS诱导组;LPS+A549;(3)BMMSC对照组:BS+A549+BMMSC;(4)BMMSC干预组:LPS+A549+BMMSC.采用Annexin V/PI双染色流式细胞仪检测A549细胞凋亡率;Western blotting检测caspase 3、bcl-2和bax蛋白表达.结果 10μg/m L LPS可体外诱导A549细胞凋亡;BMMSC干预组A549细胞凋亡率、caspase-3与bax蛋白表达水平明显低于LPS诱导组、空白对照组和BMMSC对照组(P<0.01);bcl-2蛋白表达水平显著高于LPS诱导组、空白对照组和BMMSC对照组(P<0.01).结论与LPS诱导的A549细胞共培养,BMMSC能促进A549细胞表达抗凋亡蛋白bcl-2和抑制促凋亡蛋白caspase-3和bax的表达,具有抗细胞凋亡作用.

急性髓细胞白血病FLT3-ITD基因突变的检测及其临床意义

目的探讨急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者人Fms样酪氨酸激酶3内部串联重复(Fms-like tyrosine kinase3-intenal tandem duplication,FLT3-ITD)基因突变及其临床意义。方法采用聚合酶链反应-变性高效液相色谱(polymerase chain reaction-denaturing high performance liquid chromatography,PCR-DHPLC)方法检测60例初治AML患者和10例对照组骨髓FLT3-ITD基因突变。结果60例AML患者FLT3-ITD突变阳性率21.67%(13/60),10例对照组均未检测到该突变;FAB各亚型FLT3-ITD突变率不同,有M3型突变率较高的趋势;FLT3-ITD阳性组外周血白细胞数、骨髓白血病细胞比例高于FLT3-ITD阴性组(P<0.01);FLT3-ITD阳性组完全缓解(CR)率低于FLT3-ITD阴性组(P<0.05)。结论FLT3-ITD基因突变多见于M3患者,FLT3-ITD阳性者具有外周血白细胞数、骨髓白血病细胞比例高、CR率低的特点。FLT3-ITD基因突变可作为预测AML预后的一个指标。

尼曼-匹克病1例并文献复习

尼曼-匹克病（NPD）是鞘磷脂及胆固醇沉积于身体各器官的遗传性代谢病,以年幼儿童多发,具有肝、脾肿大,眼底黄斑部樱桃红色斑及骨髓涂片中大量泡沫样细胞等主要特征~[1]。本病于1914年首先由Niemann报告,1922年Pick详细描述了病理检查所见。

血小板减少症患者血清促血小板生成素水平的检测

目的 :探讨血小板减少症患者血清血小板生成素 (thrombopoietin ,TPO)水平与外周血小板计数(plateletcounts ,PLT)、骨髓巨核细胞计数的关系及临床意义 .方法 :ELISA法测定 5 0例不同病因血小板减少症患者血清TPO水平 ,同时用自动血细胞仪测定其PLT ,人工计数骨髓涂片上巨核细胞总数 ,以 2 0例健康人为正常对照 .结果 :原发性血小板减少性紫癜 (ITP)较正常对照组血清TPO略低 ,但差异无显著性 (P>0 . 0 5 ) ;继发性血小板减少症血清TPO明显高于正常对照组 ,差异有显著性 (P <0. 0 5 ) .相关分析表明ITP和继发性血小板减少症患者PLT与血清TPO浓度均呈负相关 (r =- 0 . 6 5 ,P <0 . 0 5 ;r =- 0 6 8,P <0 . 0 5 ) ;巨核细胞计数与血清TPO浓度也均呈负相关 (r =- 0 . 5 5 ,P <0. 0 5 ;r =- 0 . 5 8,P <0. 0 5 ) .结论 :检测血小板减少症患者血清TPO水平有助于区分不同原因所致的血小板减少症 .血清TPO水平同时受PLT、巨核细胞数双重调控 .

Chediak-Higashi综合征1例报告并文献复习

Chediak-Higashi综合征（Chediak-Higashi Syndrome，CHS）又称膜结构缺陷性白细胞异常，是一种以局部白化，白细胞胞质内出现异常粗大颗粒或包涵体（可能为巨大溶酶体）为特征的常染色体隐性遗传疾病，部分患者双亲有近亲婚配史。临床主要表现为：①易发感染；②白化病；③晚期可合并淋巴瘤而肝脏、脾脏及淋巴结肿大，贫血和有出血倾向[1]。郝良纯等[2]报道近亲婚配家族史占33％，均以反复发热为特征性的首发表现，头发及皮肤逐渐变灰白色，肝大占81％，脾大占83％，眼部异常占100％，以及淋巴结大，神经症状等。外周血和骨髓均有特征性颗粒。多在确诊后（加速期）10年内死于反复的难洽性感染及出血。作者在临床实践中发现Chediak-Hi—gashi综合征1例，现报道如下。

老年急性髓细胞白血病患者FLT3表达的意义

目的研究老年急性髓细胞白血病(AML)患者Fms样的酪氨酸激酶3(FLT3)的表达水平,探讨其在老年AML中的作用机制及临床意义。方法采用半定量RT-PCR方法检测36例老年AML和11例良性血液病为对照组FLT3表达水平。结果36例老年AML组表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001);复发难治组最高,初治组居中,完全缓解组最低,三者表达水平具有显著性差异(P<0.05)。结论FLT3在老年AML中存在过度表达,提示FLT3在老年AML的发病机制中有一定作用。FLT3表达水平与疾病进展及预后相关。在检测微小残留病,估计残留白血病细胞负荷量,也可能有一定价值。

急性白血病P16基因mRNA表达水平的研究

目的研究P16基因mRNA的表达水平与急性白血病发生发展及预后的相关性。方法采用荧光实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测50例急性白血病患者P16基因mRNA表达水平。结果急性白血病患者P16基因mRNA表达水平明显低于正常人mRNA表达水平(P<0.001)。其中急性淋巴细胞白血病mRNA表达水平又低于急性髓细胞性白血病(P<0.05)。初诊组、难治复发组、初诊组、完全缓解组与正常对照组mRNA表达水平依次升高(P<0.05)。初诊组中完全缓解组mRNA表达水平高于未完全缓解组(P<0.001)。结论P16基因表达缺陷在急性白血病的发生、发展中起重要作用,且与白血病患者的治疗和预后有一定关系。

慢性粒细胞性白血病细胞周期蛋白D1基因表达及临床研究

目的检测细胞周期蛋白D1（cyclin D1）在慢性粒细胞性白血病（CML）患者中的表达，探讨cyclin D1在CML中有无异常表达及其表达与病情进展和预后的关系。方法采用荧光实时定量PCR方法检测18例CML和16例良性血液病为对照组cyclin D1的表达。结果CML患者cyclin D1的表达水平高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．001）；加速期／急变期cyclin D1的表达水平明显高于慢性期，差异有统计学意义（P〈0．05）。cyclin D1表达的水平在对照组（0．1980）、CML慢性期（1．4002）、加速期／急变期（5．4540）之间呈明显的由低到高的上升趋势。结论cyclin D1在CML中有异常高表达，提示cyclin D1在CML中可能有癌基因的作用，其表达水平与CML患者的病情进展程度及预后有关。

骨髓转移瘤的骨髓检查与临床特点

非造血组织恶性肿瘤的诊断一般可通过病史、体检、影像学及病理切片确定肿瘤的部位和性质。但部分病人原发部位尚无明显症状时就已全身转移。如转移至骨髓，称为骨髓转移瘤。多可因血象异常、骨痛等症状就诊，易误诊为其他血液病而贻误诊治机会。因此了解骨髓转移瘤的临床特点和骨髓表现很有必要。现将我科5年来收治的40例骨髓转移瘤分析总结如下。

老年急性髓细胞白血病患者FLT3-ITD基因突变的临床意义

目的分析老年急性髓细胞白血病（AML）Fms样酪氨酸激酶3内部串联重复序列（FLT3-ITD）基因突变及其临床意义。方法采用聚合酶链反应-变性高效液相色谱技术（PCR—DHPLC）分析30例初发老年AML患者骨髓单个核细胞FLT3-ITD突变。结果30例老年AML患者FLT3-ITD突变阳性率26．67％（8／30），对照组均未检测到该突变；FAB各亚型FLT3-ITD突变率不同，有M，型突变率较高的趋势；所检测到FLT3-ITD突变均为杂合突变，突变均在阅读框内；不同预后核型组FLT3-ITD突变阳性率不同，预后中等核型组突变率较高，达40．0％（6／15）；显示FLT3-ITD突变阳性者具有高白细胞、白血病细胞、完全缓解（CR）率低等临床特点。结论FLT3—1TD突变阳性老年AML患者预后差，且多发生于预后中等核型组；FLT3-ITD突变检测在-定程度上可以弥补细胞遗传学的不足，有可能成为老年AML患者常规检测项目，以指导治疗判断预后。