聚己内酯/钛酸钡纳米纤维膜的制备及其力学性能和细胞活性

目的:研究聚己内酯/钛酸钡[PCL/BaTiO3(PCL/BT)]纳米纤维膜的制备及其力学性能和细胞活性。方法:通过加入BaTiO3,利用静电纺丝技术制成PCL、PCL/3%BT、PCL/6%BT和PCL/9%BT纳米纤维膜。扫描电镜(SEM)观察膜片形貌及间充质干细胞的生长形态,力学性能实验检测材料的机械性能。CCK-8法检测间充质干细胞在膜上7 d间充质干细胞的增殖情况。SEM下观察细胞活力,探究骨髓间充质干细胞在电纺纳米纤维膜上的生长情况。Calcein-AM/PI染色比较间充质干细胞与纳米纤维膜复合培养7 d时细胞存活情况。结果:SEM观察结果显示,纯PCL静电纺丝膜纤维表面光滑,未发现凹陷或凸出,PPCL/3%BT静电纺丝膜纤维表面偶有突出,PCL/6%BT静电纺丝膜纤维变得稀疏,PCL/9%BT静电纺丝膜纤维表面有明显的沉淀物,并且明显可以看出PCL/6%BT的孔隙率优于其他组。间充质干细胞在PCL/6%BT膜上的细胞增殖和活性显著优于其他3种膜片,细胞分布更密集。结论:本研究成功地利用静电纺丝技术制备出PCL、PCL/3%BT、PCL/6%BT和PCL/9%BT纳米纤维膜,该纳米纤维膜具有良好机械性能,并具有促进细胞增殖能力。

负载葛根素的聚己内酯/明胶纳米纤维膜诱导成骨和抗菌的研究

目的:用静电纺丝技术将聚己内酯(PCL)、明胶(GEL)、葛根素(PUE)制备成PCL/GEL@PUE纳米纤维膜,验证其生物相容性、机械性能、成骨及抗菌性能。方法:在电纺前溶液中分别加入0%(w/v)、0.1%(w/v)、0.2%(w/v)的PUE,制成PCL/GEL、PCL/GEL@0.1%PUE、PCL/GEL@0.2%PUE 3组纳米纤维膜。利用扫描电子显微镜(SEM)观察纳米纤维膜的结构;傅里叶红外光谱分析仪(FTIR)确认制备成功;力学性能测试纳米纤维膜机械强度。将骨髓间充质干细胞接种于各纳米纤维膜上,通过细胞计数试剂(CCK-8)法、钙黄绿素/碘化丙啶(Calcein-AM/PI)染色检测细胞相容性;茜素红染色检测成骨性能。将耐甲氧西林金黄色葡萄球菌与各组纳米纤维膜共培养,并涂琼脂板,计数菌落,检测抑菌率。结果:SEM结果显示,加入PUE后纤维变细,孔径变小,表面变粗糙;FTIR结果显示PCL/GEL@PUE纳米纤维膜构建成功;力学测试结果表明,加入PUE后,纳米纤维膜机械性能增强。CCK-8及Calcein-AM/PI染色结果显示,各组纳米纤维膜在第7天时能明显促进骨髓间充质干细胞增殖,其中PCL/GEL@0.2%PUE组细胞相容性最好。茜素红染色结果表明,PCL/GEL纳米纤维膜无明显成骨作用,而PCL/GEL@0.1%PUE、PCL/GEL@0.2%PUE纳米纤维膜成骨作用递增。抗菌实验结果表明,PCL/GEL纳米纤维膜无抗菌作用,而PCL/GEL@0.1%PUE、PCL/GEL@0.2%PUE纳米纤维膜分别有48%、86%的抑菌率。结论:负载PUE[0.1%(w/v)、0.2%(w/v)]的PCL/GEL纳米纤维膜具有良好的成骨性能和抗菌性能,其中以PCL/GEL@0.2%PUE组效果最好。

应用组织追踪技术分析健康人左心室心肌力学参数

目的:分析健康成年人左心室整体和局部心肌力学参数及性别差异。方法:连续选取2015年10月至2016年8月于乌尔姆大学医院进行1.5 T心脏磁共振检查的健康成年男、女性各50名。进行稳态自由进动序列成像并半自动地勾画出左心室心内、外膜位置后,使用组织追踪技术测量左心室整体和局部(基底段、中间段和心尖段)心肌在径向、周向和纵向的应变、应变率、位移、位移速度、扭转和扭转率峰值,采用t检验或非参数检验比较性别差异。结果:(1)女性整体和局部心肌应变、应变率的峰值水平均高于男性;(2)女性中间段心肌纵向位移的峰值水平高于男性;(3)女性整体和中间段心肌纵向位移速度的峰值水平高于男性;(4)扭转和扭转率均未见显著性别差异。结论:女性左心室整体和局部的部分力学参数水平高于男性。

人血浆组织激肽释放酶结合蛋白与冠状动脉病变程度相关性研究

目的 ：分析组织激肽释放酶结合蛋白（kallistatin,KS）在冠心病患者血浆中水平的差异以及与Gensini评分的相关性,揭示血浆KS水平与冠状动脉病变严重程度的相关性。方法：选取151例行冠脉造影检查的患者作为研究对象,统计其临床数据及造影结果。（1）根据冠脉病变分支结果分成4组：正常对照组、单支病变组、双支病变组、三支病变组,应用ELISA法测定患者血浆中KS含量;（2）根据Gensini评分评估其冠脉病变程度,将患者分为4组：A组（0分）、B组（〉0～≤20分）、C组（〉20～≤40分）、D组（〉40～艽160分）,两两比较各组间患者血中KS含量的差异,并探究KS水平与Gensini评分间的相关性。结果 ：（1）根据冠脉病变分支结果分的4组中,血浆KS量分别为：对照组（95.35±32.00）μg/m L、单支病变组（78.19±25.27）μg/m L、双支病变组（66.19±25.93）μg/m L、三支病变组（51.84±23.26）μg/m L,各组间均具有统计学差异（P〈0.01）,KS水平与冠脉病变支数呈负相关;（2）根据Gensini评分分的A、B、C、D 4组中,KS含量分别为（101.66±36.50）μg/m L、（77.73±25.13）μg/m L、（61.58±23.06）μg/m L、（53.80±23.92）μg/m L,KS含量在各组间的差异有统计学意义（P〈0.01）;（3）KS含量与Gensini评分存在统计学上有显著的相关性（r=-0.371,P〈0.001）。结论：冠心病患者血浆KS含量明显低于正常人群,且KS含量与Gensini评分存在显著的相关性。提示KS可能作为一个潜在的血管保护因子参与动脉粥样硬化性心脏病的发生发展过程。

生物信息学筛选骨肉瘤关键基因ITGA3及差异表达验证

目的:生物信息学分析筛选出骨肉瘤关键基因,探讨骨肉瘤潜在分子标记物。方法:从GEO数据库中下载GSE14359、GSE16088、GSE160913个数据库集,利用R语言“SVA”软件包进行合并;差异分析利用R语言“limma”软件包进行分析,并对差异基因运用R语言“clusterProfiler”进行GO和KEGG富集分析。随后,对最显著富集的KEGG通路基因进行筛选出最关键的Top5基因并进行生存分析,筛选对预后具有影响意义的关键基因,然后运用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)验证最关键基因的差异性表达。结果:通过数据合并共得到12547个基因的数据集,分析出723个表达基因有差异;差异基因的KEGG富集最显著通路是PI3K-Akt信号通路,并且该通路的排名前5的关键基因为ITGA3、ITGA4、ITGAV、COL1A1、COL1A2。排名前5的关键基因中,与ITGA3低表达组比较,ITGA3高表达组生存预后较好(P<0.05),在143B、MNNG、U2OS 3个骨肉瘤细胞系中ITGA3相对表达量低于正常成骨细胞系hFOB1.19(P<0.01)。结论:ITGA3在骨肉瘤中呈现出低表达,这可能成为预测骨肉瘤患者预后的潜在生物标记物。

芦荟多糖对大鼠骨关节炎治疗作用的体内和体外研究

目的通过体外和体内实验探究芦荟多糖(APS)对大鼠骨关节炎(OA)的治疗作用。方法体外分离SD乳鼠的关节软骨细胞,培养至2代后,通过CCK-8法筛选实验组APS安全剂量。后续通过检测DNA含量和糖胺聚糖(GAG)分泌量评估软骨细胞的增殖和基质降解情况,实时荧光定量PCR检测OA相关基因表达情况,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测炎症因子水平;通过HE染色、番红O和免疫荧光染色等来观察其抗炎和软骨保护效果;并进一步在SD大鼠骨关节炎模型中探究其作用效果。结果通过CCK-8法筛选出剂量为5、10、20 g/L的APS作为低、中、高剂量组。各剂量组的DNA含量均显著高于模型组(P<0.05);高剂量组GAG分泌量高于模型组(P<0.05)。高剂量组的蛋白聚糖(ACAN)和Ⅱ型胶原(COL2A1)基因表达水平相对模型组显著上调(P<0.05),而肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、基质金属蛋白酶(MMP)-3和MMP-13基因表达显著下调(P<0.05)。低、中、高剂量组TNF-α和IL-6的分泌量显著低于模型组(P<0.05),HE和番红O染色也显示APS实验组的细胞形态较模型组好,MMP-13免疫荧光显示高剂量组的表达量显著低于模型组(P<0.05)。体内实验软骨组织番红O染色及国际骨关节炎研究学会(OARSI)软骨损伤评分结果显示APS干预的实验组关节软骨损伤程度明显低于模型组(P<0.05)。结论APS对OA具有一定的抗炎和软骨保护作用。

Fn14-PI3K-Akt介导TWEAK促人脐血内皮祖细胞血管生成研究

目的:探讨Fn14-PI3K-Akt信号通路介导的肿瘤坏死因子样弱凋亡因子(tumor necrosis factor-like weak inducer of apoptosis,TWEAK)对人脐血来源的内皮祖细胞(human endothelial progenitor cells,h EPCs)增殖、迁移、血管形成能力的影响。方法:体外培养、分离和鉴定h EPCs,以其受体成纤维细胞生长因子14 siRNA(Fn14 siRNA)及PI3K特异性抑制剂LY294002(LY)作干预处理。细胞分为对照组、TWEAK干预组、TWEAK+Fn14 siRNA阻断组和TWEAK+LY阻断组。分别采用CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell小室检测细胞迁移能力,Matrigel小管形成试验评价细胞血管生成能力,Western blot法测定细胞裂解液中p-Akt和T-Akt的表达。结果:h EPCs体外培养实验表明,TWEAK可明显促进h EPCs的增殖和迁移,并能提升h EPCs的血管形成能力,但在TEWAK+Fn14 siRNA及TWEAK+LY组中h EPCs的增殖、迁移及血管形成能力显著降低。且TWEAK组p-Akt表达较对照组显著增加,而TWEAK+Fn14siRNA组、TWEAK+LY组p-Akt表达较TWEAK组显著降低。结论:TWEAK具有调控h EPCs促血管新生的作用,其促血管新生的作用可能受到Fn14-PI3K-Akt信号通路的限制。

扩张型心肌病患者中应用基于心脏磁共振组织追踪技术评价左心室应变

目的研究扩张型心肌病(DCM)患者左心室心肌多维度变形.方法连续入选行心脏磁共振(CMR)检查的20例DCM患者和100例年龄、性别匹配的健康志愿者.应用事后处理软件CVI42分析左心室整体、区域和节段(从基底部至心尖部)的轴向、周向和纵向应变,这是一种新型的基于CMR的组织追踪技术(CMR-TT).结果与健康志愿者相比,DCM患者在所有水平上均显示出明显降低的多维度应变(P均<0.01).健康志愿者和DCM患者左心室整体的轴向应变、周向应变和纵向应变值分别为(44.1±12.3)%比(12.6±4.4)%,(-17.0±2.7)%比(-5.9±1.6)%,以及(-15.3±2.3)%比(-5.5±1.4)%(P均<0.01).结论CMR-TT为DCM患者检测异常心肌应变和收缩功能受损提供了一种新方法.