不同新城疫分离株的毒力测定与单克隆抗体分群研究

采用传统方法对15株新城疫分离毒株进行毒力测定,根据鸡胚平均死亡时间(MDT)与3日龄雏鸡脑内接种指数(ICPI)测定结果,FW、F48E8属于速发型毒株;ND98、P1、P2,鸽NDV、Ⅰ系、H2、BY属于中发型毒株,Ⅱ系、L2、P3、ND99,ND89,Lasota属于缓发型毒株。同时对这些毒株的表型特征进行观察发现,病毒血凝解脱速率、血凝素对热的稳定性、对不同动物红细胞的血凝谱等表型特征与NDV毒力没有相关性。通过间接酶联免疫吸附试验,采用针对NDV HN基因的单克隆抗体对贵州ND不同分离株进行分群研究,表明A群为速发型强毒株;B群为缓发型弱毒与某些中等毒力株;C群分离物的毒力介于速发型强毒与中等毒力之间。

斗鸡新城疫病毒的分离与生物学特性鉴定

从病死的越南斗鸡脑组织中分离到l株病毒，能凝集鸡的红细胞，而且这种凝集能被新城疫阳性血清特异性抑制。通过对分离株进行RT—PCR检测、动物致病性试验、MDT与ICPI值测定，证实为中等偏强毒力新城疫病毒。动物感染试验表明，20日龄非免疫鸡感染分离毒后24～120h可用RT—PCR方法从喉头和泄殖腔检出新城疫病毒。

RT-PCR对新城疫病毒强弱毒株的快速鉴定

根据新城疫病毒(NDV)F蛋白基因结构的特点及强、弱毒株F蛋白基因裂解位点的序列差异设计了4条引物,并将其配成3对引物,采用RT-PCR试验对来自鸡和七彩山鸡的9株NDV野毒分离株,F48E8和LaSota 2株标准强、弱毒株进行了快速鉴定;并将RT-PCR鉴定结果与NDV常规致病性试验结果进行了比较。结果表明,RT-PCR试验能够快速将11个参试毒株区分为强毒株和弱毒株,其结果与传统致病性试验测定结果基本一致,该方法可以用于ND的快速诊断和强、弱毒株的快速鉴定。

RT-PCR对新城疫病毒(NDV)分离株的鉴定及其临床应用

采用新城疫病毒的通用引物PA+PB、强毒引物PA+PC、弱毒引物PA+PD对11株贵州新城疫分离毒株与4株新城疫参考毒株进行了RT-PCR扩增。结果15株新城疫毒株均被PA+PB引物扩增出359bp的条带,F48E8、ND98、Fw、H2、P3、BY、L2、P1、P2被PA+PC引物扩增出254bp的条带,而PA+PD引物未扩增出DNA条带;ND89、Lasota被PA+PD引物扩增出254bp的条带,而PA+PC引物未扩增出DNA条带。采用3对引物对自然发病斗鸡脑、脾、咽喉试子、泄殖腔试子进行RT-PCR检测,确诊为斗鸡新城疫强毒感染,且与传统病毒分离与毒力鉴定的结果相一致。

新疆北鲵人工孵化技术研究

新疆北鲵 Ranodon Sibiricus隶两栖纲、有尾目、小鲵科 ,是被列入世界自然保护联盟 ( IUCN)红皮书 ,前苏联红皮书和中国濒危动物红皮书 ( 1 998)的濒危物种。对其进行的人工孵化技术研究表明 ,水温控制在1 2 .5℃— 1 6 .8℃ ,孵化期为 2 3— 2 6天 ,孵化率为 92 .6 % ,成活率为 99% (出膜后第四天统计 )。

新城疫疫苗株与分离毒株的蚀斑克隆与毒力鉴定

2株NDV贵州分离株(GN、ND99)与2株疫苗毒株(Ⅰ系和Ⅱ系)经检测为生物异质性毒株。利用蚀斑克隆技术对以上4株毒株进行蚀斑纯化,结果得到11株克隆毒株。其中,10株克隆毒株在鸡胚成纤维细胞上形成圆形、透明无色蚀斑,1株形成圆形、透明、红色蚀斑。经RT-PCR检测,11株克隆毒株中6株为弱毒,形成蚀斑的大小在0.4～0.8mm之间;5株为强毒,形成蚀斑的大小在1.0～2.0mm之间。结果表明:所形成蚀斑的大小与病毒毒力具有一定的相关性。

新疆北鲵肌肉蛋白质、氨基酸、无机元素及食物组成分析

本文报道了新疆北鲵肌肉蛋白质含量为19.08％,氨基酸17种,无机元素有Ca等6种,成幼体食物组成中以石蚕及腺状介虫为主。