免疫印迹法检测ENA多肽抗体谱

免疫印迹法检测ＥＮＡ多肽抗体谱石冬敏，杨鉴青（苏州第二人民医院，江苏苏州２１５００２）我们采用免疫印迹法（ＩＢＴ），检测风湿病患者血清中ＥＮＡ抗体，结果如下。１试剂与方法１．１ＩＢＴ检测ＥＮＡ多肽抗体谱试剂盒由深圳恒佳生物公司提供。１．２血清取自按各...

脑梗塞患者血小板参数的变化及意义

目的 探讨血小板 5项参数对脑梗塞患者的临床意义。方法 分别测定 10 8例脑梗塞住院患者和 4 0例中老年体检者的血小板数 (PLT)、平均血小板体积 (MPV)、血小板体积分布宽度 (PDW)、血小板比积 (PCT)和血小板最大聚集率 (MAR) ,对血小板 5项参数进行比较并作相关分析 ,同时对脑梗塞组中 4 0例患者治疗前后的 5项参数进行配对比较。结果 脑梗塞组PLT减少、MPV和MAR增高较对照组有显著差异 (P <0 .0 1,0 .0 5 )。PDW、PCT两组间无显著差异。对照组PLT与MPV为中度负相关 (r =- 0 .5 5 ,P <0 .0 1) ,脑梗塞组二者为低度负相关 (r =- 0 .37,P <0 .0 5 )。脑梗塞组治疗后MPV减小 ,有显著差异 (P <0 .0 5 ) ;PLT、PDW、PCT和MAR无显著差异。结论 MPV增大是脑梗塞的独立危险指标 ,观察PLT、MPV和MAR的变化对脑梗塞的诊断和预防有指导意义。

普利生LBY-NJ4A全自动血小板聚集仪性能评价

目的对普利生LBY-NJ4A全自动血小板聚集仪(NJ4A)进行性能评估。方法 109mmol/L枸橼酸钠真空管采血,分离富含血小板血浆(PRP)和贫血小板血浆(PPP),应用NJ4A及配套质控品、诱导剂和清洗液,测定血小板最大聚集率(MAR),测试精密度、通道一致性、不确定度、检测限、干扰等。结果批内不精密度测试,变异系数(CV)为3.4%～5.0%;4个不同通道测定均值差异无统计学意义(P>0.05);携带污染率2.82%;CV批内≤3.5%,CV批间≤4.2%,CV总≤3.8%;总误差范围为5.6%～10.3%,不确定度在可接受范围;2个水平质控品测定值与靶值差异无统计学意义(P>0.05);NJ4A与LBY-NJ2比对结果相关良好(r=0.998,P<0.01);系统误差(SE)=|0.01～0.62|;检测限97.5%,可能性7.85%;Hb≤150mg/L、TG≤3.80g/L、TBIL≤246g/L对结果无干扰;PRP稀释度与聚集率高低无线性关系;40例健康体检者的参考范围MARADP=(68.7±11.2)%、MARAA=(65.1±16.1)%,与公认的参考范围差异无统计学意义(P>0.05)。结论 NJ4A精密度、准确度、不确定度、灵敏度、携带污染率、抗干扰等性能指标符合CLSI规范,可在临床应用。

血液流变检测质控物制备方法探讨

目的 筛选简便易行的血液流变学检测质控物制备方法。方法 静脉采血 ,与输血 1号抗凝液 8:1混合 ;分为 2份 ,1份每 1 0 0mL全血加入 1 6 4 0液 2 5mL ,混匀后无菌分装无添加物灭菌真空管 (简称真空管 )和枸橼酸钠缓冲液抗凝真空管(CTAD管 ) ,1份不加 1 6 4 0液分装上述管 ,2℃～ 4℃保存。每日测定上述 4种质控液在 1 5 0s-1 、6 0s-1 和 1 0s-1 切变率下的全血粘度 ,并测血浆粘度、红细胞压积 (HCT)和红细胞沉降率 (ESR) ,持续 4周 ,统计变异系数 (CV % )和第 1周与最后 1周数据t检验。每周测质控液的全血和血浆血红蛋白 ,计算溶血百分率。结果 抗凝血加入 1 6 4 0液分装真空管连续 4周的测定值CV %均 <4 % ,无显著差异 (P >0 0 5 ) ) ,溶血率 <1 %。未加 1 6 4 0液管组和分装CTAD管 2组 2周后开始溶血 ,3周后溶血率 >1 % ,CV %均 >6 4 %。除血浆粘度和ESR外均有显著差异 (P <0 0 5 )。结论 输血 1号抗凝液抗凝全血加 1 6 4 0液分装真空管的质控物制备方法简便易行 ,保存时间长 ,质控结果良好 。

血液流变检测室内质量控制方案研究和应用

目的制备全血质控物并应用于血液流变检测室内质量控制,建立血流变质控方案.方法静脉采血,与输血用1号抗凝液(简称抗凝液)8:1混合;每100mL全血加入1640液25mL,混匀后无菌分装全无添加物灭菌真空管(简称真空管),每管3mL,置2℃～4℃保存.调节血浆量制备高,中,低值制控物.粘度计应用清洁程序并通过本底实验后,分别重复测定10次3种全血质控物150s-1,60s-1,和10s-1全血粘度(表观)和血浆粘度及红细胞压积(Hct)和红细胞沉降率(ESR),计算管间精度;测定正常人肝素抗凝血全血粘度,与中值质控物全血粘度曲线比较拟合度;分别以不同值全血质控液作监测,第1月为中值,其后为高值,第三个低值,测定以上6项数据,结果作Westgard多规则质控图.统计变异系数(CV%)和第1周与最后1周数据t检验.每周测质控液的全血和血浆血红蛋白(简称Hb),计算溶血百分率.结果高、中、低值全血质控液重复测各项目管间CV%均<5%;每月测定值CV%均<5%;每月每1周与最后1周数据t检验均无显著差异(P>0.05);溶血率<1%;室内Westgard多规则质控结果满意.结论该法制备全血质控物成本低、简便,可保存3个月,可进行高、中、低值监测,配合应用仪器清洁程序和本底试验,应用于血流变室内质控结果表明该方案切实可行.

血液流变学检测室内质控与质控物制备的有关问题

1951年Copley提出了“血液流变学（Hemorheology）”这一概念,定义为“从宏观、微观以及亚微观水平研究血细胞及血浆成分的变形与流动性质,并包括了血液直接接触的血管的流变性质”,它奠定了血液流变学理论的基础.数十年来,血液流变学迅速发展,成为新兴的医学分支.国外对流变学的研究基本上限于实验室.而在我国,血液流变学在临床中应用发展很快.

清洗液在旋转式血液粘度计的应用

目的 选择适用的清洗液清洁旋转式血液粘度计测头 ,防止假性粘度高值 ;建立仪器清洗程序和本底实验 ,是为血粘度质控的基础实验。方法 每天关机前用COULTERCLENZTM清洗液 (库尔特清洗液 )浸泡测头 15min ,水清洗 2次关机 ;每日开机后水清洗 1次 ,测定蒸馏水粘度 (D =12 0s 1,T =3 7℃ ) ;与原应用的必要时用市售洗洁精清洗法各进行 40d的分组对比观察 ;将切液锥置清洗液浸泡观察。结果 库尔特清洗液组CV1 8% ,后者 2 9.2 % ,有非常显著差异 (P <0 .0 1)。切液锥浸泡40d未见腐蚀。结论 应用库尔特清洗液清洁测头、建立清洗程序和仪器本底实验 。

SLE患者三项自身抗体的变化

用免疫印迹法检测84例系统性红斑狼疮（SLE）抗核内可提取性核抗原（ENA）．并与抗核抗体（ANA）和抗双链DNA（dsDNA）比较，结果抗SSA（＋）＋抗SSB（＋）与抗SM（＋）和抗U1RNP（＋）的阳性率均无显著差异；也可作为SLE诊断指标。抗SSA（＋）患者未见抗dsDNA（＋），活动性SLE患者dsDNA不一定阳性。

血小板聚集率对急性脑梗死诊断价值及发病关系的探讨

目的观察急性脑梗死患者血小板最大聚集率（MAR）水平，分析其诊断价值和发病的关系。方法急性脑梗死组120例，入院次日晨空腹采血，透射比浊法测定花生四烯酸诱导MAR（MARAA）和二磷酸腺苷诱导MAR（MARAADP）。结果脑梗死组MARAA62．9％±17．6％、MARADP66．8％±14．2％，健康对照组为56．6％±14．1％、60．1％±13．5％，组间t检验均有统计学意义（P〈0．05）；MARAA与MARADP以及不同性别间MAR水平差异均无统计学意义（P〉0．05）。患者发病年龄与MAR以及MARAA与MARADP均无直线性关联（r≤0．1）。受试者工作特征曲线确定Cut off，MARAA为57％，AUC为0．61，诊断正确率为88％；MARADP分别为60％、0．62、58％。65．4％患者MAR〉Cut off，10％超出正常参考值上限，12．5％低水平。Logistic回归分析：MARAA OR值为3．026，有统计学意义（P=0．017）。MARADP为1．058，无统计学意义（P=0．906）。结论急性脑梗死患者MAR水平上调，无性别差异，与年龄无关。MAR诊断价值低，高水平MARAA是脑梗死发病的独立危险因子。预防和治疗脑卒中，ASA与氯吡格雷应同时给药，但应监测MAR，个体化用药。

普利生LBY—NJ4A全自动血小板聚集仪验收及性能评价

目的对普利生LBY-NJ4A全自动血小板聚集仪（NJ4A）进行验收和性能评估。方法109mmol／L枸橼酸钠真空管采血，分离富含血小板血浆（PRP）和贫血小板血浆，应用NJ4A及配套质控品、诱导剂和清洗液，测定血小板最大聚集率（MAR）、精密度、通道一致性、不确定度、检测限、抗干扰能力等。结果批内不精密度测试变异系数（CV）为3．4％～5．0％；4个不同通道测定均值差异无统计学意义（P〉0．05）；携带污染率2．82％；CV批内≤3．5％，CV批间≤4．2％，CV总≤3．8％；总误差范围为5．6～10．3％，不确定度在可接受范围；2个水平质控品测定值与靶值差异无统计学意义（P〉0．05）；NJ4A与LBY-NJ2比对结果相关良好（r=0．998，P〈0．01）；系统误差（SE）=｜0．01-0．62｜；检测限97．5％，可能性7．85％；Hb≤0．15g／L、TG≤3．80mmol／L、TBIL≤246umol／L对结果无干扰；PRP稀释度与聚集率高低无线性关系；40例健康体检者的参考范围MARADP=68．7±11．2（％）、MAR_AA65．1±16．1（％），与公认的参考范围差异无统计学意义（P〉0．05）。结论NJ4A精密度、准确度、不确定度、灵敏度、携带污染率、抗干扰等性能指标符合CLSI规范，可在临床应用。

CIE辅助检测ENA抗体

抗ENA抗体是针对核内可提取性核抗原(Extractable Nuelear Antigen，ENA)的一种自身抗体，有10余种。近年国内应用的免疫印迹法(Immunohtting，IBT)可检测抗U1RNP、抗sm、抗SSA、抗SSB、抗Rib、抗Scl-70和抗Jo-1等7种抗ENA抗体。敏感性和特异性均优于对流免疫法(CIE)。但CIE可检出上述抗体以外的ENA抗体，可作为风湿病的实验室辅助诊断方法。现将149例风湿病患者IBT和CIE检测结果报告如下。

苏州市中老年干部HBV感染调查

我国乙型肝炎(HBV)感染高发。本文调查1994年苏州市2163名中老年干部体检资料，对其HBV感染情况作一分析。

血小板聚集率对急性脑梗死诊断价值及发病关系的探讨

目的观察急性脑梗死患者血小板最大聚集率（MAR）水平，分析其诊断价值和发病的关系。方法急性脑梗死组120例，健康对照组50例。入院次日晨空腹采血，透射比浊法测定花生四烯酸诱导MAR（MARAn）和二磷酸腺苷诱导MAR（MAR_ADP）。结果脑梗死组MAR_AA为62．9±17．6（％）、MAR_ADP为66．8±14．2（％），健康对照组为56．6±14．1、60．1±13．5，组间t检验均有统计学意义（P〈0．05）；MAR_AA与MAR_ADP以及不同性别间MAR水平差异均无统计学意义（P〉0．05）。患者发病年龄与MAR以及MAR_AA与MAR_ADP无直线性关联（r≤0．1）。受试者工作特征曲线确定Cutoff，MAR_AA为57％，AUC为0．61，诊断正确率为88％；MAR_ADP分别为60％、0．62、58％。65．4％左右患者MAR〉Cutoff，10％左右超出正常参考值上限，12．5％左右低水平。logistic回归分析：OR值MAR_AA为3．026，有统计学意义（P=0．0017）。MAR_ADP为1．058，无统计学意义（P=0．906）。结论急性脑梗死患者MAR水平上调，无性别差异，与年龄无关。MAR诊断价值低，高水平MAR_AA是脑梗发病的独立危险因子。脑卒中的预防和治疗ASA与氯吡格雷应同时给药，但应监测MAR，个体化用药。

不同抗血小板治疗对急性脑梗死患者血小板活化聚集状态的比较

目的:探讨不同抗血小板治疗对脑梗死急性期患者血小板活化及聚集状态的影响。方法:97例脑梗死患者随机入组不同的抗血小板治疗组(阿司匹林治疗组、氯吡格雷治疗组、阿司匹林联合氯吡格雷治疗组),在入院第1天(治疗前)和第10天采用流式细胞仪检测血小板CD62P、比浊法检测花生四烯酸(arachidonic acid,AA)诱导的血小板最大聚集率(MARAA)和二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)诱导的血小板最大聚集率(MARADP)。结果:3组患者入院第1天CD62P、MARAA、MARADP无显著差异,治疗10 d后3组的CD62P、MARAA、MARADP值均下降,与入院第1天的CD62P、MARAA、MARADP值比较,差异有统计学意义。3组脑梗死患者血小板MARADP下降程度组间比较有差异,氯吡咯雷治组MARADP下降明显,阿司匹林联合氯吡格雷治疗组下降更明显。血小板MARAA、血小板CD62P下降程度组间比较无显著差异。结论:阿司匹林、氯吡格雷、阿司匹林联合氯吡格雷3种抗血小板治疗方法均能有效减少脑梗死急性期的血小板活化,降低血小板最大聚集率,提示临床治疗均有效;氯吡格雷和阿司匹林联合治疗更能抑制血小板的聚集,抗血小板疗效更好。

急性脑梗死患者的血小板活化、聚集状态及其临床意义

目的探讨急性脑梗死患者的血小板活化、聚集状态及其临床意义。方法 97例急性脑梗死患者按梗死体积和卒中类型分别分为小体积和中-大体积脑梗死亚组,大动脉粥样硬化性卒中(LAA)和小动脉闭塞性卒中(SAO)亚组。在脑梗死患者发病48 h内(治疗前)和病程第12 d,采用全血流式细胞术检测血小板CD62P表达,用比浊法检测花生四烯酸、二磷酸腺苷诱导的血小板最大聚集率(MARAA,MARADP);并与正常对照者(n=99)比较。结果脑梗死组发病48 h内血小板CD62P表达水平和MARAA、MARADP显著高于正常对照组(P<0.05～0.01),且发病第12 d比发病48 h内明显降低(均P<0.01)。中-大体积脑梗死亚组、LAA亚组的血小板CD62P表达和MARAA、MARADP分别显著高于小体积脑梗死亚组和SAO亚组(均P<0.01)。结论急性脑梗死患者发病后血小板活化、聚集程度增高,脑梗死体积大、大血管病变的患者增高更明显。观察急性脑梗死患者的血小板活化、聚集状态,有助于对其病情的判断。

脑梗死急性期患者血小板膜糖蛋白Ia C807T基因多态性和血小板功能

目的:探讨血小板膜糖蛋白(GP)Ia C807T基因多态性及与脑梗死急性期患者血小板功能的关系。方法:应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RELP)方法检测97例急性期脑梗死患者(脑梗死组)及99例正常对照者(对照组)的GPIa C807T基因型,采用全血流式细胞术检测血小板P选择素(CD62P)表达率,采用比浊法检测花生四烯酸、二磷酸腺苷诱导的血小板最大聚集率(MARAA、MARADP)。结果:脑梗死组GPIa T等位基因频率高于对照组,差异有统计学意义(χ2=5.369,P<0.05);脑梗死组CD62P表达率、血小板MARAA、MARADP高于对照组(P<0.05)。对照组TT+CT基因型CD62P表达率和MARADP高于CC基因型(P<0.05);脑梗死组TT+CT基因型CD62P表达率和MARAA、MARADP与CC基因型差异无统计学意义(P>0.05)。结论:GPIaC807T可能是脑梗死发病的遗传危险因素。血小板活化和聚集功能增强可能是T等位基因促进脑梗死发病的机制之一。

C-反应蛋白在儿童急性呼吸道感染的应用探讨

目的探讨C-反应蛋白(CRP)对急性呼吸道感染患儿的临床应用。方法267例患儿入院时和抗生素治疗72 h后分别静脉采血,检测血清CRP、肺炎支原体特异性抗体IgG和IgM及白细胞计数(WBC)。结果设CRP>5.0mg/L为阳性、WBC>11.0×109/L为阳性,细菌感染组CRP阳性率84%,WBC阳性率42%,χ2检验有显著差异(P<0.05)。细菌感染组和支原体感染组CRP和WBC明显增高,与正常对照组比较,t检验均有显著差异(P<0.05);病毒感染组无显著差异(P>0.05)。61例CRP>5.0mg/L患儿抗生素治疗后CRP下降明显,治疗前后CRP和WBC水平t检验,CRP有显著差异(P<0.05);WBC无显著差异(P>0.05)。结论CRP是鉴别细菌\支原体与病毒感染的敏感但非特异性的指标;可指导合理使用抗生素并判断疗效。

老年人群血尿酸水平与缺血性脑卒中关系的研究

目的 探讨老年人群血尿酸水平与缺血性脑卒中关系.方法 检测缺血性脑卒中患者156例及对照组156名老年健康者血尿酸、低密度脂蛋白等指标;多普勒超声检测颈动脉内膜-中膜厚度（intima-media thickness,IMT）和确定颈动脉粥样硬化;Logistic回归分析血尿酸水平与缺血性脑卒中关系.结果 观察组血尿酸（379.3±85.9 vs 310.5±76.7,t=7.462,P＜0.001）、低密度脂蛋白（3.61±0.94 vs 3.12±0.69,t=5.268,P ＜0.001）、糖尿病患者（39.7% vs 25.6%,χ2=7.050,P=0.008）均高于对照组.Logistic回归分析,血尿酸水平（OR=4.827,P＜0.001）、低密度脂蛋白（OR=5.250,P＜0.001）、糖尿病（OR=2.366,P=0.002）.结论 血尿酸水平是缺血性脑卒中危险因素.

苏州地区32,986例孕妇TORCH感染情况调查

目的 调查苏州地区孕妇TORCH感染情况.方法 采用酶联免疫吸附法,检测32,986例孕早期妇女TORCH-IgM.结果 TORCH-IgM总阳性率3.99%.弓形体（TOXO）阳性率0.74%,风疹病毒（RV）0.50%.巨细胞病毒（CMV）1.37%,单纯疱疹病毒（HSV）1.53%,各阳性率差异无显著性（P〉0.05）.HSV、TOXO、RV阳性率逐年升高,CMV阳性率逐年下降.TORCH-IgM总阳性率逐年升高.结论 苏州地区孕妇TORCH感染率上升,孕前妇女应重视TORCH筛查.