木瓜提取物MGE30OA对吲哚美辛诱导的大鼠胃黏膜损伤的保护作用

目的:探究木瓜提取物MGE30OA对吲哚美辛诱导的大鼠胃黏膜损伤的保护作用及其可能的机制。方法:将SD大鼠随机分为正常组,模型组,MGE30OA低、中、高剂量(25、50、100 mg/kg)组,每组5只。模型组灌胃4 mg/kg吲哚美辛;MGE30OA各剂量组灌胃吲哚美辛0.5 h后,灌胃相应剂量的MGE30OA;1次/d,持续14 d。末次给药后取大鼠胃黏膜组织,HE染色观察组织学表现,Western blot法检测胃组织中PI3K/AKT信号通路相关蛋白和MAPK3蛋白的表达;取全血,ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β、IL-6、TGF-β1、IL-4、IL-10、COX-1、COX-2、PGE2水平。结果:模型组大鼠胃黏膜损伤明显,MGE30OA各剂量组胃黏膜损伤较模型组减轻。与正常组比较,模型组大鼠血清中促炎因子IL-6、IL-1β、TNF-α水平升高,抗炎因子TGF-β1、IL-4、IL-10水平降低,PGE2和COX-1水平降低,COX-2水平升高(P<0.05);胃组织中磷酸化(p-)PI3K/PI3K和p-AKT/AKT降低,MAPK3表达水平升高(P<0.05)。与模型组比较,MGE30OA各剂量组血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平降低,IL-4、IL-10、TGF-β1水平升高(P<0.05);COX-2水平降低,COX-1及PGE2水平升高(P<0.05);p-PI3K/PI3K与p-AKT/AKT升高,MAPK3表达下调(P<0.05)。结论:MGE30OA对吲哚美辛诱导的大鼠胃黏膜损伤有较好的保护作用,其作用机制可能与调节PI3K/AKT、MAPK信号通路有关。

珠子参水提物预处理对小鼠脑缺血再灌注损伤的影响

目的研究珠子参水提物预处理对小鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法雄性5周龄昆明小鼠170只,采用完全随机设计分组法分为6组:假手术组(n=20)、模型组(n=30)、尼莫地平组(2 mg/kg,n=30)和珠子参水提物低、中、高剂量组(2.5、5.0、10.0 g/kg,n=30)。除假手术组和模型组灌胃给予蒸馏水20 ml/kg外,其余各组灌胃给予相应剂量的药物。以上各组给药7 d后制作大鼠大脑中动脉闭塞模型,假手术组切开缝合不进行动脉阻塞,在缺血2 h再灌注24 h后进行行为学检测,记录各组小鼠存活率。取大脑并用2,3,5-三苯基氯化四氮唑染色后测定梗死面积和脑含水量;制作脑匀浆测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)、黄嘌呤氧化酶(XOD)酶活性和丙二醛(MDA)含量。结果珠子参水提物中、高剂量组的成活率分别为77.8%(21/27)和82.1%(23/28),与模型组[51.9%(14/27)]比较具有统计学差异(P<0.05);珠子参水提物高剂量组的神经症状评分(1.77±0.38)、斜板角度(63.6±5.5)°优于模型组[神经症状评分(2.21±0.43),斜板角度(55.1±7.5)°](P<0.05,P<0.01),与尼莫地平效果接近;与模型组比较,珠子参水提物中、高剂量组能显著降低脑梗死面积和脑含水量(P<0.05,P<0.01),并能明显增加SOD、GSH-PX、CAT酶活性(P<0.01),降低XOD酶活性和MDA含量(P<0.01);高剂量组在改善GSH-PX、SOD和CAT酶及XOD酶活性方面优于尼莫地平组。结论珠子参水提物预处理对小鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有明显的保护作用。

开口箭不同提取部位对异丙肾上腺素致小鼠心肌缺血损伤的影响

目的:研究开口箭不同提取部位对异丙肾上腺素(ISO)致小鼠心肌缺血损伤的保护作用。方法:将105只小鼠随机分为正常组、模型组、开口箭石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水部位组和地奥心血康组;各给药组分别灌胃给予相应的药物,正常组及模型组给予等容量的0.5%CMC-Na灌胃,给药7d后,随后3d在给药后30min,模型组、开口箭提取物组和地奥心血康组皮下注射ISO 5.0mg/kg,正常组则皮下注射同体积的生理盐水。给药结束次日取血处死小鼠,测定心脏脏器指数;左心室匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)水平;血浆中谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同功酶(CKMB)、羟丁酸脱氢酶(HBDH)活力,另取心脏组织,分别进行心脏组织形态学和超微结构分析。结果:开口箭不同提取部位均可显著逆转ISO升高的心脏脏器指数,心肌中异常的MDA含量及SOD、GSH-Px水平,明显降低血液中升高的AST、LDH、HBDH、CK、CKMB水平,降低心肌炎性浸润、溶解坏死和胶原纤维面积,与模型组比较,开口箭正丁醇和乙酸乙酯部位均具有统计学差异(P<0.05,P<0.01),其治疗效果与地奥心血康相当;石油醚部位在改善HBDH、SOD等方面有统计学差异(P<0.05);水部位除LDH、CK、GSH-Px外,均具有统计学差异(P<0.05)。结论:开口箭不同提取部位对ISO致小鼠心肌缺血损伤具有较强的保护作用,其作用效果由强至弱依次为:开口箭正丁醇部位、乙酸乙酯部位、水部位和石油醚部位。

阿霉素诱导与冠脉结扎术建立慢性心力衰竭大鼠模型的比较

目的比较阿霉素诱导与冠状动脉结扎术所建立的大鼠慢性心力衰竭(CHF)模型在血流动力学及组织形态学方面的差异。方法成年雄性SD大鼠,随机分为正常对照组(对照组)、阿霉素诱导组(ADR)和冠状动脉结扎组(coronary artery ligation,CAL),10 w后测定血流动力学变化,计算心脏重量指数、心肌梗死和心室扩张数值,观察心肌组织形态学改变。结果 ADR组和CAL组死亡率分别为33.3%和20%,心脏重量指数升高17.0%和33.9%(P<0.01),以CAL组较ADR组降低更为显著(P<0.05)。两CHF模型组LVSP、LV±dp/dtmax均较对照组显著降低(P<0.01),LVEDP则显著升高(P<0.01),其中CAL较ADR组更为显著;梗死面积和左心室梗死部分长度达37.46%和10.65 mm,与对照组比较,ADR和CAL组的左心室周长和内径分别增加20.8%、39.4%和24.2%、54.1%(P<0.05,P<0.01),两CHF模型比较,CAL组LVC较ADR增加15.4%(P<0.05);肉眼可见CAL组心脏明显增大,左室心尖部出现明显的梗死区域,而ADR组除了可见心脏外观略有增大外,未见异常;光镜下病理切片显示CAL组存在心肌细胞坏死和大量的纤维化增生,ADR组部分心肌细胞呈小灶状坏死和散在的纤维化增生。结论阿霉素诱导和冠脉结扎术均是建立CHF大鼠模型的有效方法,前者操作简单、但在进行梗死面积和纤维化增生的分析存在局限性,而冠脉结扎术所建CHF模型则能够有效避免这一不足,并能很好模拟心肌梗死后心肌肥大,并逐渐演变到心力衰竭的全部病理过程,因而与CHF更接近。

南赤瓟不同提取物急性毒性实验研究

目的以南赤瓟不同提取物对小鼠灌胃,观察小鼠死亡情况及相关指标的变化情况来评价其安全性。方法半数致死量实验分别以南赤瓟水提物和醇提物不同浓度的饱和药液对小鼠灌胃,观察7 d未见小鼠死亡,无法测出半数致死量,进行最大耐受量实验。实验小鼠以南赤瓟水提物和醇提物最大混悬浓度和可承受的最大体积1 d内灌胃2次,连续观察7 d,每天记录小鼠的一般状况、体重、进食量。7 d后处死动物,测定小鼠的血液和生化指标,脑、心、肝、脾、肺、肾、睾丸/卵巢等主要脏器指数,观察解剖学及病理组织学改变情况。结果 7 d内小鼠活动正常,无1只小鼠死亡。南赤瓟水提物和醇提物组小鼠脏器指数与空白对照比较无显著性差异(P>0.05);血液学及血液生化指标与空白对照组比较亦无显著性差异(P>0.05)。实验小鼠灌胃南赤瓟水提物和醇提物的最大耐受量分别为229.6 g(生药)/kg和292.0 g(生药)/kg,相当于成人临床日用量的382.7和486.7倍。结论南赤瓟提取物无明显毒性,临床常用量是安全可行的。

南赤瓟提取物诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡及作用机制研究

目的观察南赤瓟提取物对宫颈癌HeLa细胞凋亡的诱导作用,并探讨其可能的作用机制。方法用不同浓度的南赤瓟提取物(0.10、0.25、0.50、1.00、2.00 mg/ml)于不同作用时间(24、48、72 h)处理宫颈癌HeLa细胞后,采用MTT法检测不同浓度的南赤瓟提取物在不同作用时间下对HeLa细胞增殖率的影响;用0.50和1.00 mg/ml的南赤瓟提取物处理宫颈癌HeLa细胞48 h后Hoechst33258染色观察细胞形态变化,Annexin V-FITC/PI染色测定细胞凋亡率,JC-1染色法测定细胞线粒体跨膜电位水平,Caspase试剂盒检测HeLa细胞中Caspase-9和Caspase-3的活性,荧光定量PCR测定Bcl-2和Bax mRNA表达,并计算Bcl-2与Bax的比值。结果南赤瓟提取物对HeLa细胞的生长抑制作用呈明显的时间-剂量依赖性;南赤瓟提取物(0.50和1.00 mg/ml)处理能显著降低HeLa细胞线粒体膜电位,促进HeLa细胞凋亡(P<0.05,P<0.01);上调Bax mRNA表达,下调Bcl-2 mRNA表达和Bcl-2与Bax的比值以及增强Caspase-9和Caspase-3的活性(P<0.05,P<0.01)。结论南赤瓟提取物可诱导HeLa细胞凋亡,其作用机制与降低HeLa细胞线粒体膜电位及调节凋亡相关基因Bcl-2、Bax和Caspase-9、Caspase-3的表达有关。

华泽兰质量标准的研究

目的建立华泽兰Eupatorium chinense L.的质量标准。方法观察药材性状和显微特征,TLC法定性鉴别8β(4′hydroxytigloyloxy)10α,14 epoxy 2βhydroxy 1αH,5αH,6βH,7αH guai 3(4),11(13)dien 6,12 olide(HEH),2015年版《中国药典》方法检测水分、总灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物、醇溶性浸出物含有量,HPLC法测定HEH含有量。结果华泽兰性状、显微特征可与同属其他植物较好地区分开。TLC斑点清晰,分离度良好。10批样品中水分、总灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物、醇溶性浸出物含有量分别不超过11.26%、7.92%、7.92%,以及不低于6.77%、5.41%。HEH在6.25~400μg/mL范围内呈良好的线性关系(r=0.9997),平均加样回收率为100.00%,RSD为1.10%。结论该方法专属性好,稳定可靠,可用于华泽兰的质量控制。

以“药”为中心整合药学专业多学科实施一体化实验教学的探索与实践

针对当前本科药学专业各实验课程教学各自为政,学生"按方抓药"的现状,我们尝试着开展了以"药"为中心整合药学专业多学科实施一体化实验教学改革,通过近几年的探索与实践,我发现实施一体化实验教学既利于对学生药学知识的系统掌握,同时又培养了学生的动手能力、创新能力、团结协作精神和科研思维,对适应市场需求的药学专业人才培养,具有重要的现实意义。

地方院校大学生创业动机与存在问题分析——以三峡大学为例

当前高校大学生的就业问题日益严峻,其中一个重要原因是大学生自主创业的比例不足。如何破解当前大学生就业难题,成了亟待解决的问题。本文以三峡大学为例,分别就我校大学生的创业动机与存在问题进行分析,以期为我校采取有的放矢的措施来推动我校大学生自主创业提供指导。

构建院校教育与师承教育结合的新模式培育合格中医人才

师承教育和院校教育是在不同历史条件下产生和发展起来的,两者各有特色,也各有不足。院校教育应从传统师承教育中汲取精髓精华,注重创新发展,构建现代院校教育和师承教育相结合的新模式,培育合格中医人才。

珠子参醇提物对小鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用

目的:珠子参醇提物对小鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用。方法:珠子参水提物低、中、高剂量组(2.5,5.0,10.0 g kg-1)灌胃给药7 d后制作大鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,缺血24 h后,观察进行神经症状评分、斜板试验,取大脑并用2,3,5-三苯基四氮唑染色后测定梗死面积,用失重法计算脑组织含水量;制作脑匀浆,检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、乳酸脱氢酶(LDH)、Na+-K+-ATP、Ca2+-Mg2+-ATP活性和乳酸(LD)、丙二醛(MDA)含量。结果:珠子参醇提物能显著提高局灶性脑缺血模型小鼠成活率(P<0.05,P<0.01),明显改善缺血再灌注后的神经症状,降低脑梗死面积和脑含水量(P<0.05,P<0.01),并能明显增加SOD、GSH-PX、Na+-K+-ATP、Ca2+-Mg2+-ATP活性,降低LDH活性和LD、MDA含量(P<0.05,P<0.01)。结论:珠子参醇提物预处理对小鼠局灶性脑缺血损伤具有明显的保护作用。

中医基础课程实验教学改革探索与研究

加强中医基础课程实验教学,对培养高素质现代中医药人才意义重大。为了适应新形势的教育要求,结合我校实际情况,在中医基础课程实验教学方法上进行了改革,并在实施过程中收到了较好的效果。

试论医用基础化学实验教学中的绿色化学教学

医用基础化学实验教学绿色化是实验教学人员研究的新课题。本文在阐述医学基础化学实验绿色化的必要性基础上,探讨在实验教学中实施绿色化学教学的具体措施。

高等医学院校实验技术队伍建设的现状与对策

医学院校实验技术队伍是实验室建设和发展以及教学和科研的一支重要力量。通过阐述加强高等医学院校实验技术队伍建设的必要性和分析我院实验技术队伍现状,提出加强实验技术队伍建设的对策。

四逆散对溃疡性结肠炎小鼠NF-κB激活及MIF和细胞因子表达的影响

目的:研究四逆散对溃疡性结肠炎(UC)小鼠NF-κB激活及MIF和细胞因子表达的影响。方法:选用昆明小鼠,用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)复制UC模型。实验分为正常对照组、模型组、四逆散(1.0、2.0 g/kg)组和柳氮磺吡啶肠溶片(0.1 g/kg)阳性对照组,灌胃给药1次/d,连续3 w,观察小鼠一般状况并进行疾病活动指数(DAI)评分。用ELISA法测定血清IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-4、IL-10含量;取结肠,进行结肠黏膜损伤指数(CMDI)、结肠组织学评分(HS)和形态学分析;实时定量PCR检测结肠组织中巨噬细胞移动抑制因子(MIF)及对应的受体CD74基因表达,Western blot检测结肠组织中磷酸化核因子抑制蛋白-κB(p IκB-α)和核转录因子κB(NF-κB)p65蛋白表达。结果:四逆散(1.0、2.0g/kg)可显著改善UC模型小鼠的一般状况及DAI、CMDI和HS评分,降低血清促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α含量及结肠组织中MIF、CD74 mRNA及p IκB-α、NF-κBp65蛋白表达水平,升高血清抗炎因子IL-4、IL-10的含量,减轻促炎因子对结肠黏膜造成损伤。结论:四逆散对TNBS诱导的小鼠UC具有较好的治疗作用,其作用机制可能与抑制MIF、CD74表达和IκB-α的磷酸化,进而抑制NF-κB的活化及纠正促炎因子和抗炎因子之间的平衡密切相关。

珠子参总皂苷对H_2O_2诱导新生大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用

目的:观察珠子参总皂苷对H2O2诱导新生大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用,并探讨其作用机制。方法:Wistar乳鼠心肌细胞原代培养,用H2O2建立氧化应激损伤模型,然后用珠子参总皂苷(100,200μg/mL)孵育24h后,MTT法检测珠子参总皂苷对细胞活力的影响,流式细胞仪和Hoechst33258染色检测珠子参总皂苷对氧化应激诱导细胞凋亡及胞内ROS含量的影响,比色法测定心肌细胞Caspase-3、Caspase-9的活性,荧光定量PCR测定心肌细胞Bcl-2和Bax mRNA表达,并计算Bcl-2与Bax的比值。结果:珠子参总皂苷(100,200μg/mL)能显著改善心肌细胞活性,有效保护线粒体膜电位的稳定,抑制心肌细胞凋亡和改善细胞形态,降低细胞内活性氧(ROS)含量;下调Bax mRNA表达,上调Bcl-2mRNA表达及Bcl-2与Bax的比值;降低H2O2所致新生大鼠心肌细胞中Caspase-3、Caspase-9的活性。结论:珠子参总皂苷对H2O2诱导心肌细胞凋亡有显著的抑制作用,其机制可能与其稳定心肌细胞膜、清除ROS及调节心肌细胞Bcl-2、Bax和Caspase-3、Caspase-9表达有关。

珠子参总皂苷对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用及机制研究

目的：研究珠子参总皂苷预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤（Myocardiumischemia／Reperfusioninjury，MI／RI）的保护作用及可能的作用机制。方法：实验大鼠随机分为假手术组、缺血／再灌注模型组、珠子参总皂苷100和200mg／kg组。治疗组各组大鼠分别给予相应的药物，给药7d后，行冠状动脉结扎术，结扎30rain后，再灌注24h。记录再灌注后30min内心律失常发生情况，24h后进行血流动力学测定，然后取血进行乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）、丙二醛（MDA）和过氧化氢酶（CAT）含量分析；心脏经TTC染色和HE染色，计算心肌梗死面积和心肌组织形态学观察。实时定量PCR检测SOD／GPX／CAT反应系统SODl～SOD3、GPXl和CAT基因表达，Westernblot检测细胞质和细胞核Nrf2蛋白表达。结果：珠子参总皂苷（100、200mg／kg）可显著降低心律失常发生率（P〈0．01），能明显改善心功能，降低血液中CK、LDH含量和MDA水平，增加SOD、GSH—Px、CAT酶的活性；减轻ROS所致心肌氧化应激损伤，降低心肌梗死面积（P〈0．05，P〈0．01）和改善心脏组织形态学；上调SOD／GPx／CAT反应系统基因表达水平和促进Nrf2核移位，增加心肌细胞核内Nrf2的表达水平（P〈0．01）。结论：珠子参总皂苷对MI／RI具有较好的保护作用，激活Nrf2抗氧化途径和抗脂质过氧化可能是其作用机制之一。

火麻仁油对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆障碍的保护作用研究

目的:研究火麻仁油对D-半乳糖(D-gal)致衰老小鼠学习记忆能力的保护作用,并探讨其作用机制。方法:采用D-半乳糖诱导小鼠衰老模型,用跳台法、水迷宫法和Morris水迷宫法测定衰老小鼠学习记忆能力,检测小鼠脑组织丙二醛(MDA)含量和总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及大脑皮层和海马组织中乙酰胆碱(Ach)含量和乙酰胆碱酯酶(AchE)、胆碱乙酰化转移酶(ChAT)活性,观察脑组织组织形态学变化。结果:火麻仁油(3、6和12mL/kg)能明显延长跳台实验的跳台潜伏期,缩短错误次数;缩短水迷宫实验达到时间和减少错误次数;缩短Mor-ris水迷宫实验逃避潜伏期和第1次到达原平台时间,增加穿越原平台次数和逗留时间;能显著增加脑组织中T-AOC、SOD、GSH-Px活性和降低MDA含量,增加大脑皮层和海马组织中Ach含量和AchE、ChAT活性,减轻脑组织损伤。结论:火麻仁油可显著改善D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆能力,其机制可能与其提高脑组织抗氧化和清除自由基能力,增强中枢胆碱能神经系统功能有关。

珠子参总皂苷通过促进Nrf2转位拮抗新生大鼠心肌细胞氧化应激损伤

目的观察珠子参总皂苷H2O2所致氧化应激损伤保护效应并探讨其机制。方法 Wistar乳鼠心肌细胞原代培养,用H2O2建立氧化应激损伤模型,然后用珠子参总皂苷(100、200μg/ml)孵育24 h后,观察细胞搏动频率,MTT法检测珠子参总皂苷对细胞活力的影响,流式细胞仪和Hoechst33258染色检测珠子参总皂苷对氧化应激诱导细胞凋亡及胞内ROS含量的影响,比色法测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)含量,同时检测培养液中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及丙二醛(MDA)含量,实时定量PCR技术检测珠子参总皂苷对SOD/GPX/CAT反应系统SOD1、SOD2、SOD3、CAT和GPX1基因表达的影响,Western blot检测珠子参总皂苷对细胞质和细胞核Nrf2蛋白表达的影响。结果 H2O2明显影响细胞活力和诱导凋亡(IC50为500μmol/L),珠子参总皂苷(100、200μg/ml)处理能显著增加心肌细胞搏动频率和存活率(P<0.01),抑制心肌细胞凋亡和改善细胞形态,降低细胞内ROS含量(P<0.01);减轻H2O2所致乳鼠心肌细胞培养液中LDH、CK释放量,同时能够升高SOD、CAT和GSH-Px活性,降低MDA含量(P<0.05,P<0.01);上调SOD/GPX/CAT反应系统基因表达水平和促进Nrf2核移位,增加心肌细胞核内Nrf2的表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论珠子参总皂苷抑制心肌细胞氧化应激损伤,与Nrf2抗氧化途径的激活和清除ROS有关。

珠子参水提物抗炎镇痛作用的实验研究

目的观察珠子参水提物的抗炎、镇痛作用。方法将250只小鼠采用完全随机设计分组法分成5组:空白对照组,阿司匹林组及珠子参水提物低、中、高剂量组,每组50只。分别进行抗炎和镇痛系列实验共5种,每种实验各组取10只小鼠。其中珠子参水提物组分别给予珠子参水提物低(2.50g/kg)、中(5.00g/kg)、高剂量(10.00g/kg)灌胃,阿司匹林组给予阿司匹林(0.20g/kg)灌胃,空白对照组给予相同体积蒸馏水灌胃,均每天1次,连续给药7d。采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法、角叉菜胶致小鼠足跖肿胀法和小鼠棉球肉芽肿法观察珠子参水提物的抗炎作用,采用醋酸扭体法和热板法观察其镇痛作用。结果与空白对照组比较,珠子参水提物低、中、高剂量组均可明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓的肿胀度,抑制角叉菜胶所致小鼠足肿胀和小鼠棉球肉芽肿;可延缓醋酸所致小鼠扭体的出现时间,减少扭体反应次数,提高热板所致小鼠痛阈值(P<0.05,P<0.01)。结论珠子参水提物具有明显的抗炎镇痛作用。