小分子化合物I942在UVB照射诱导人黑素细胞树突形成及黑色素合成的促进作用

目的:探究小分子化合物I942在UVB照射诱导人黑素细胞树突形成及黑色素合成的促进作用。方法:使用浓度为0、3.125、6.25、12.5、25、50μmol/L的小分子化合物I942处理正常永生化人表皮黑素细胞系PIG1,采用CCK-8法检测各组24、48、72 h时的细胞活力。将PIG1细胞分为对照组、UVB组、UVB+2.5μmol/L I942组、UVB+5μmol/L I942组、UVB+10μmol/LI942组,按照分组名称进行相应处理。多巴染色观察各组细胞形态,免疫荧光染色观察黑素小体及骨架蛋白F-actin分布情况,氢氧化钠裂解法测定黑色素含量,多巴氧化反应法测定酪氨酸酶活性。qRT-PCR、WB检测树突形态相关、黑色素合成相关mRNA与蛋白表达水平。结果:浓度为0、3.125、6.25、12.5、25、50μmol/L的小分子化合物I942对PIG1细胞活力无明显影响(P>0.05)。与对照组相比,UVB组、UVB+2.5μmol/L I942组、UVB+5μmol/L I942组、UVB+10μmol/L I942组细胞树突数量、gp100、F-actin、黑色素含量、酪氨酸酶活性、MITF、TYR、TRP-1、TRP-2、Rac1mRNA与蛋白水平均升高(P<0.05),RhoAmRNA与蛋白水平降低(P<0.05)。结论:小分子化合物I942结合UVB照射诱导能够增加黑素细胞的树突数量,提高细胞黑色素含量,提升酪氨酸酶活性,促进黑色素合成。

低浓度过氧化氢诱导人黑素细胞提早衰老

目的:本研究旨在探讨氧化应激在人表皮黑素细胞衰老中的作用。方法:以不同浓度的过氧化氢(0、200、400、600、800、1 000μmol/L)处理人黑素细胞5 d后,检测分析其细胞活力和凋亡。通过评估衰老相关指标β-半乳糖苷酶染色、细胞增殖、细胞周期分析、E-钙黏素以及衰老基因表达等改变,探讨低浓度过氧化氢(0~400μmol/L)对黑素细胞衰老进程的影响。结果:与对照组比较,当过氧化氢浓度为200μmol/L和400μmol/L时,细胞活力和凋亡未见显著性改变;高浓度的过氧化氢(600~1 000μmol/L)可以明显诱导黑素细胞凋亡;400μmol/L的过氧化氢则可使黑素细胞出现以细胞树突缩短、增殖减慢、β-半乳糖苷酶蓝染率增加、细胞周期阻滞于G2期、E-钙黏素表达降低及衰老相关蛋白p53和p21的表达增加等改变。结论:400μmol/L浓度的过氧化氢刺激能诱导黑素细胞提早衰老。

职业性三氯乙烯药疹样皮炎

职业性三氯乙烯药疹样皮炎因其低发病率、高致死率以及严重的皮肤及肝功能损害,已经成为我国危重职业病之一。我国卫生部于2006年发布了《职业性三氯乙烯药疹样皮炎诊断标准》,将其定义为以急性皮肤炎症反应为表现的、全身性变应性疾病。本文根据近年对该病的研究进展进行综述。

结节性痒疹并发霍奇金淋巴瘤

报告1例结节性痒疹并发霍奇金淋巴瘤。患者男,38岁。因全身丘疹、结节伴瘙痒2年余就诊。体格检查:左颈部可触及一0.5 cm×1 cm淋巴结,右颈部一3 cm×3 cm淋巴结,质地硬,表面光滑,活动性好。皮肤科检查:全身散在米粒至黄豆大褐色丘疹、结节,触之坚硬,结节周围皮肤色素沉着,部分呈苔藓样变。皮损组织病理学检查示结节性痒疹改变。右颈部淋巴结组织病理检查示淋巴组织高度增生伴异形大细胞。右颈部淋巴结免疫组化染色示肿瘤细胞B细胞特异性激活蛋白(PAX-5)(+),CD30(+),CD15(+),多发性骨髓瘤致癌蛋白(MUM-1)(+),细胞增殖核抗原(Ki)-67(+);背景FDC网CD21(+),CD23(+)及B淋巴细胞瘤-2基因(BCL-2)(+),CD123散在(+),CD3(+),CD5(+),CD19(+),程序性死亡受体(PD-1)(+)。符合经典型霍奇金淋巴瘤(cHL)。于当地行ABVD(阿霉素、博莱霉素、长春碱、氮烯唑胺)方案化疗2个月后皮疹较前消退,瘙痒基本缓解。

α-硫辛酸对黑素细胞氧化应激下的保护作用及抑制自噬机制的研究

目的:探讨α-硫辛酸(α-LA)对体外培养的人黑素细胞氧化损伤的保护作用。方法:以不同浓度的α-LA(100、200及400μmol/L)预处理正常人黑素细胞12h,再加入500μmol/LH2O2处理6h。采用CCK-8试剂盒检测黑素细胞活力,流式细胞仪分析细胞内活性氧(ROS)含量、钙离子水平及细胞周期,线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)分析线粒体膜电位,图像分析软件测量树突回缩速率,透射电镜观察超微结构以及westernblot检测LC3和p62蛋白表达情况。结果:正常情况下α-LA能显著提高黑素细胞的活力,同时还能明显降低氧化应激时黑素细胞内ROS水平,减轻细胞内超微结构的损伤,阻止线粒体去极化及细胞内钙离子的累积,延缓树突的回缩,促进增殖及降低过度激活的自噬水平(P<0.05)。结论:α-LA不仅能在正常情况下显著提高黑素细胞的活力,而且可明显降低氧化应激下黑素细胞过度激活的自噬水平,对黑素细胞起保护作用。

皮肌炎伴血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤一例

临床资料 患者,女,82岁。因面、颈、胸背部红斑2个月,加重伴双上肢肌痛无力1个月,于2018年9月20日收住我院皮肤科。患者2个月前无明显诱因面、颈、胸前V区及背部出现泛发性红斑,当地医院予以中药及氯雷他定治疗,效不著。1个月前皮疹较前明显加重,并出现双侧乳房和四肢水肿及双上肢肌肉酸痛无力,举臂困难。

p21小干扰RNA对低浓度过氧化氢诱导的黑素细胞提前衰老和黑素传递的影响

目的:探讨小干扰RNA(siRNA)抑制p21表达对低浓度过氧化氢(H2O2)诱导的黑素细胞提前衰老的影响,以及黑素细胞提前衰老与黑素传递功能间的关系。方法:p21 siRNA序列转染黑素细胞,采用荧光显微镜、实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)及western blot检测抑制效率。将正常人黑素细胞分为对照组(阴性siRNA转染处理)、p21 siRNA组(p21 siRNA转染处理)、阴性siRNA+H2O2组(阴性siRNA转染24 h后加入400μmol/L H2O2处理)及p21 siRNA+H2O2组(p21 siRNA转染24 h后加入400μmol/L H2O2处理)。采用β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老;EdU细胞增殖检测细胞增殖能力;western blot检测各组p21和树突调节蛋白[RhoA、Rac1及细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)]表达;免疫荧光检测细胞骨架蛋白和黑素小体分布。结果:p21siRNA转染黑素细胞后明显抑制p21 mRNA和蛋白表达(P<0.05)。与阴性siRNA+H2O2组比较,p21 siRNA+H2O2组β-半乳糖苷酶染色阳性率降低、细胞增殖能力增加及p21蛋白表达降低(P<0.05)。与对照组比较,阴性siRNA+H2O2组树突负性调节因子Rho A蛋白表达升高,而正性调节因子Rac1及Cdc42蛋白表达均降低,且细胞骨架蛋白及黑素小体荧光强度均降低(P<0.05)。经p21siRNA预处理后,p21 siRNA+H2O2组较阴性siRNA+H2O2组Rho A蛋白表达降低,Rac1和Cdc42蛋白表达均增高,且细胞骨架蛋白及黑素小体荧光强度均增高(P<0.05)。结论:低浓度H2O2诱导提前衰老的黑素细胞存在黑素传递功能障碍,p21 siRNA可改善低浓度H2O2诱导的黑素细胞提前衰老以及受损的黑素传递功能。

体外低浓度过氧化氢对人黑素细胞自噬水平的影响及自噬相关lncRNA的筛选

目的研究低浓度过氧化氢(HwO2)处理对人黑素细胞黏附功能及自噬水平的影响,并筛选自噬相关lncRNA。方法从健康男性包皮环切术后获得的皮肤组织中分离、培养黑素细胞。对数生长期黑素细胞分为对照组(无HQ处理)、HO组(400 μmol/L HO处理)和HO + NAC组(4 mmol/L NAC预处理细胞2 h,然后加入400μmol/L H202).处理5 d后,用免疫荧光检测上述各组黑素细胞E-钙黏素、微管相关蛋白1轻链3(LC3)及p62表达,透射电镜观察细胞结构及自噬体,Western印迹法检测自噬相关蛋白LC3和p62的表达,运用基因芯片技术筛选自噬相关lncRNA。采用Graphpad Prism 6软件进行统计分析,多组间比较采用单因素方差分析,并用Tukey检验进行两两间的多重比较。结果共聚焦显微镜下,与对照组和H2O2 + NAC组相比,HQ组黑素细胞E-钙黏素及LC3荧光强度均明显下降,而p62荧光强度增高,且电镜下HQ?组黑素细胞内自噬体数量减少。Western印迹结果显示,HQ2处理组黑素细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值(0.604 ± 0.012)显著低于对照组(1.200 ±0.081, q = 7.718, P < 0.01)及 HO + NAC 组(1.017 ± 0.062, q = 5.076, P < 0.05),同时其 p62/β肌动蛋白值(0.881 ± 0.079)显著高于对照组(0.456 ± 0.121,q = 4.847,P < 0.05)及 HO + NACffl(0.492 ±0.049,9 = 4.439,P< 0.05)及 H202+ NAC组与对照组的LC3-II/LC3-I值及p62/β肌动蛋白值差异均无统计学意义(P > 0.05)。基因芯片结果显示,与对照组相比,H2O2组中有18个自噬相关lncRNA与黑素细胞提前衰老有关,从中筛选出了明显上调的自噬相关lncRNA NONHSAT190308.1 (差异> 10倍)。结论低浓度H2O2可使黑素细胞E-钙黏素表达下降,降低黑素细胞自噬水平,上调自噬相关lncRNA NONHSAT190308.1 表达水平。

重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白治疗反向银屑病一例

患者男，22岁，腋窝、肛周、腹股沟红斑糜烂伴瘙痒18年。患者18年前无明显诱因肛周出现红斑，自予土霉素、痱子粉外用，疗效不佳，偶有渗出糜烂。7年前双侧腋窝、腹股沟出现类似皮损，甲增厚、变黄，外院诊断为家族性慢性天疱疮。患者曾口服甲泼尼龙片、阿维A、羟氯喹等，并外用锌氧油、硅油乳膏、复方联苯苄唑乳膏、氧化锌扑粉等，疗效不佳，皮疹迁延反复。2年前患者全身出现泛发性红斑及小脓疱，外院皮损组织病理诊断为脓疱性银屑病，予静脉输注甲泼尼龙（40 mg/d，连用3 d）及口服阿维A（40 mg/d），后甲泼尼龙减量至32 mg/d口服，阿维A 30 mg每日1次，外用卡泊三醇软膏、地奈德乳膏、硅油乳膏，四肢及躯干皮疹消退，但腋窝、腹股沟处仍反复发作红斑糜烂伴渗出。