吲哚布芬中基因毒性杂质邻苯二甲醛液质联用分析方法的建立

目的建立HPLC-MS/MS法测定吲哚布芬中的基因毒性杂质:邻苯二甲醛。方法采用Agilent Eclipse Plus C_(18)(100 mm×4.6 mm,3.5μm)色谱柱,水为流动相A,甲醇为流动相B,梯度洗脱,流速为0.55 mL·min^(-1),进样体积为10μL,柱温35℃;采用电子喷雾源ESI,正离子模式采集分析,多反应监测(MRM),离子源温度为550℃。结果邻苯二甲醛的检测下限为0.102μg·L^(-1);平均加样回收率为96.2%(n=9),加样回收率良好;邻苯二甲醛在0.41~4.07μg·L^(-1)范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.997);对照品溶液和样品加标溶液在8 h内稳定性良好。5批吲哚布芬中均未检测到杂质邻苯二甲醛。结论所建立的方法简单、准确且专属性好,适用于吲哚布芬中具有基因毒性警示结构的杂质邻苯二甲醛的测定。

黄独中二萜内酯类成分的LC-MS/MS分析方法的建立

目的:建立高效、灵敏、快速的LC-MS/MS法测定黄独中6种二萜内酯类成分的含量。方法:采用Agilent Zorbax XDB C18(50 mm×2.1 mm,3.5μm)色谱柱,流动相为0.1%甲酸溶液-含0.1%甲酸的甲醇,梯度洗脱;柱温:25℃;流速:0.5 mL/min;采用电喷雾正离子检测模式。结果:黄独素B、C、D、G、L和J在相应浓度范围内线性关系良好,精密度、重复性、稳定性及加样回收率均良好。结论:该方法快速、简便、灵敏、重现性好,适用于黄独中6种二萜内酯类成分的含量测定,可为黄独的质量控制提供依据。

液质联用法测定培唑帕尼中两种基因毒性杂质的含量

目的建立高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS法)测定培唑帕尼中两种基因毒性杂质2,3-二甲基-2H-吲唑-6-胺盐酸盐(杂质A)和2,3-二甲基-6-硝基吲唑(杂质C)的含量。方法采用HPLC-MS/MS方法,使用Poroshell 120 EC-C18色谱柱(100 mm×4.6 mm,2.7μm),以体积分数0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相梯度洗脱,流速0.5 mL·min-1,柱温40℃,进样量10μL,正离子模式采集分析,杂质A母离子和子离子的质核比分别是162.0和147.1,杂质C母离子和子离子的质核比分别是192.0和146.1。结果4批培唑帕尼中杂质A含量为0.06×10^(-6)、0.06×10^(-6)、0.12×10^(-6)和0.05×10^(-6),杂质C含量为0.08×10^(-6)、0.07×10^(-6)、0.05×10^(-6)和0.04×10^(-6)。杂质A和杂质C的线性方程分别为y=5.13×10^(3)x+1.67×10^(2)(R=0.9991),y=8.40×10^(3)x+3.65×10^(2)(R=0.9988),平均回收率范围为93.8%~100.4%(RSD<2.0%)。系统适用性、专属性、重复性试验的RSD均小于10.0%。结论所建立的方法快捷、准确且重复性好,可用于培唑帕尼中基因毒性杂质的控制和培唑帕尼的放行标准。

UPLC-MS/MS法同时测定比格犬血浆中表儿茶素与4β-(2-氨基乙硫基)表儿茶素

目的:建立UPLC-MS/MS法同时测定比格犬血浆中表儿茶素(EC)与4β-(2-氨基乙硫基)表儿茶素(Cya-EC)的浓度,研究比格犬口服威麦宁胶囊后体内药代动力学。方法:血浆样品经盐酸巯乙胺衍生化处理后,以乙腈"水(0.1%甲酸)为流动相梯度洗脱,Waters BEH Shield RP_(18)(100 mm×2.11 mm,1.7μm)色谱柱分离,采用电喷雾电离源,以多反应监测方式进行正离子检测,定量分析所用的离子反应分别为m/z 291.1→138.9(EC)、m/z366.1→288.9(Cya-EC)和m/z 260.2→116.3(内标:普萘洛尔)。结果:测定血浆中EC及Cya-EC的线性范围均为10~2000 ng·m L^(-1),日内、日间精密度均小于14.82%,准确度均在±4.86%以内;使用DAS3.0药代动力学软件对血药浓度数据进行处理,计算药动学参数,EC及Cya-EC的主要药动学参数t1/2分别为66.3和90.4 h,AUC0-∞分别为2 114.7和12 909.5 ng·h·m L^(-1)。结论:本文建立的UPLC-MS/MS法运行时间短、选择性强、灵敏度高、操作简便、血浆用量少,适用于比格犬口服威麦宁胶囊后体内EC及Cya-EC的药代动力学研究。

LC-MS/MS法测定盐酸法舒地尔中2种基因毒性杂质的含量

目的:建立液相色谱-质谱联用法(LC-MS/MS)测定盐酸法舒地尔中2种基因毒性杂质5-异喹啉磺酸甲酯(杂质A)和5-异喹啉磺酸乙酯(杂质C)的含量测定方法,并进行方法学验证。方法:采用LCMS/MS方法,使用Waters Sunfire C_(18)(100 mm×3 mm,3.5μm)色谱柱,以0.1%甲酸水-乙腈溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.5 mL·min^(-1),柱温30℃,进样量10μL。采用电子喷雾源ESI,正离子模式采集分析。结果:杂质A和杂质C在线性范围内线性关系良好。杂质A和杂志C的检测限分别为0.2和0.02 ng·mL^(-1),平均回收率均在93.0%~98.0%之间,RSD<4.67%(n=9)。准确度、稳定性和耐用性的RSD均<10.0%。3批盐酸法舒地尔中均未检测到杂质A和杂质C。结论:所建立的方法快捷、准确且重复性好,可用于盐酸法舒地尔中杂质A和杂质C基因毒性杂质的控制。

HPLC-MS/MS法同时测定吲哚布芬中4个基因毒性杂质

目的:建立HPLC-MS/MS法测定吲哚布芬中的4个基因毒性杂质:2-(4-硝基苯基)丁酸、2-(4-氨基苯基)丁酸、2-(3-氨基苯基)丁酸、2-(2-氨基苯基)丁酸。方法:采用Agilent Eclipse Plus C_(18)(4.6 mm×100 mm,3.5μm)色谱柱,0.1%甲酸-5 mmol·L^(-1)甲酸铵为流动相A,0.1%甲酸-甲醇为流动相B,梯度洗脱,流速为0.55 mL·min^(-1),进样体积为10.0μL,柱温35℃;采用电子喷雾源ESI,负离子模式采集分析,多反应监测(MRM),离子源温度为550℃。结果:4个基因毒性杂质的质量浓度在31.8~211.7、30.6~204.0、30.0~199.8、29.9~199.2 ng·mL^(-1)范围内,r均大于0.9900,峰面积与浓度线性关系良好;检测下限和定量下限的范围分别为1.06~10.2 ng·mL^(-1)和12~20.4 ng·mL^(-1);平均加样回收率为94.2%~108.4%、94.7%~106.6%、96.4%~108.9%、83.2%~100.3%(n=3),RSD均不超过7.6%;重复性为3.2%~7.6%(n=6);中间精密度为3.4%~8.2%(n=12);对照品溶液和样品加标溶液在8 h内稳定性良好。实际样品中4个基因毒性杂质均未检出。结论:该法简便、快速,灵敏高,专属性好,适用于吲哚布芬中基因毒性杂质的测定。