表皮生长因子对子宫肌瘤细胞MAPK信号通路的活化作用

目的:研究表皮生长因子(EGF)对子宫肌细胞(HM-SMCs)和子宫肌瘤细胞(HL-SMCs)中有丝分裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号转导通路的活化作用。方法:收集30例子宫肌瘤患者的子宫肌瘤组织和正常子宫肌组织进行原代细胞培养。采用激光扫描细胞法(LSC法)检测BrdU渗入率;Western blot法检测p44/42 MAPK及其磷酸化水平和p44/42 MAPK特异性底物ELK-1的表达,MAPK特异性抑制剂PD98059和EGFR受体抑制剂AG1478对p44/42 MAPK表达的抑制作用,以及p44/42 MAPK的时间依赖性表达以及细胞周期相关蛋白p27的表达。结果:EGF诱导p-p44/42 MAPK和ELK-1水平显著上调,HM-SMCs中的表达量显著高于HL-SMCs。AG1478和PD98059可抑制EGF对MAPK的诱导作用。HM-SMCs中p44/42 MAPK对EGF的刺激呈持续平稳的激活,伴随着p27的显著上调;HL-SMCs中则呈快速短暂的激活,伴随着p27低水平上调。结论:EGF通过活化MAPK信号通路促进细胞增殖可能是子宫肌瘤发病的一个重要的机制,为肌瘤的非手术治疗提供了可能。

MMP-2、MMP-9在子宫肌瘤组织中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9在子宫肌瘤组织中的表达及意义。方法收集30例子宫肌瘤患者的术后子宫肌瘤组织及其周围的正常子宫组织标本,分别应用明胶酶谱法、Western blot技术和PTPCR法检测标本中的MMP-2、MMP-9蛋白及其mRNA表达,并比较各检测指标在两种组织中的变化。结果在子宫肌瘤组织中MMP-2蛋白及其mRNA表达量均明显高于正常子宫组织(P均<0.05),而在两种组织中MMP-9蛋白及其mRNA表达量比较均无统计学差异(P均>0.05)。结论 MMP-2蛋白在子宫肌瘤组织中呈高表达,参与了子宫肌瘤的发生和发展。

子宫肌瘤及子宫平滑肌中myocardin的表达及意义

目的:检测心肌素(myocardin)在子宫肌瘤及子宫平滑肌中的表达,探讨其与子宫肌瘤的关系,及在子宫平滑肌中的表达规律,从而进一步指导临床诊疗工作。方法:收集30例患者的子宫肌瘤和子宫平滑肌组织,并进行原代培养;采用western blot方法检测子宫肌瘤和子宫平滑肌组织中的myocardin的蛋白表达情况,同时采用real-time PCR方法检测相应的mRNA表达情况。结果:myocardin在子宫肌瘤中的表达较子宫平滑肌中明显降低。在雌激素E2浓度梯度下,子宫平滑肌myocardin在1 nmol/L E2作用下表达明显增加,并且E2的这种促进作用能够被其抑制剂所减弱。结论:myocardin对子宫肌瘤的发生可能存在抑制作用,E2可进一步促进子宫平滑肌中myocardin的表达。

EGF和TGF-a在子宫内膜癌中的表达

目的通过检测表皮生长因子(EGF)相关蛋白在正常子宫内膜、增生性子宫内膜及子宫内膜癌组织中的表达,进一步探讨其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测EGF、转换生长因子a(TGF-a)在正常子宫内膜、增生性子宫内膜及子宫内膜癌中的差异性表达;采用Real-time PCR方法检测上述因子的RNA水平。结果免疫组织化学结果示:EGF在正常子宫内膜组、增生性子宫内膜组及子宫内膜癌组中的阳性表达率分别为71.4%、72.2%和57.6%,子宫内膜癌组明显低于正常子宫内膜组及增生性子宫内膜组(均P<0.05);TGF-a在正常子宫内膜组、增生性子宫内膜组及子宫内膜癌组中的阳性表达率分别为42.9%、44.4%和66.7%,子宫内膜癌组的表达率明显高于正常子宫内膜组和增生性子宫内膜组(均P<0.05)。Real-time PCR方法检测正常子宫内膜组和子宫内膜癌组组织中EGF及TGF-a的表达,结果与免疫组织化学检测结果一致,EGF在子宫内膜癌中相对低表达,TGF-a呈相对高表达(均P<0.05)。结论 EGF及TGF-a的水平变化与子宫内膜癌的发病存在密切关系。

新型雌激素受体GPR30抑制子宫肌瘤平滑肌细胞的增殖

子宫肌瘤是女性生殖器最常见的一种良性肿瘤,是由子宫平滑肌细胞异常增殖形成的,故又称为子宫平滑肌瘤.GPR30是新型雌激素偶联G蛋白受体,在乳腺癌的发生发展中起到重要作用,但是在子宫肌瘤疾病中的作用未见报道.对取自临床病人样本的子宫肌瘤和周边正常子宫肌组织,分离其平滑肌细胞,通过应用Western blot、real-time PCR(RT-qPCR)、免疫荧光等技术,验证GPR30对其增殖的影响.结果表明,在子宫肌瘤组织和子宫肌瘤平滑肌细胞中,GPR30的mRNA和蛋白的表达水平显著高于周边的正常子宫肌组织和子宫肌平滑肌细胞.在子宫肌瘤平滑肌细胞中,GPR30的特异性激动剂G-1,可以激活表皮生长因子受体EGFR,抑制细胞的增殖.这为子宫肌瘤的研究与治疗提供了新视角,具有重要的理论和实际意义.