戊己丸对吲哚美辛诱导大鼠胃溃疡的保护作用研究

目的 研究戊己丸对吲哚美辛诱导的大鼠胃溃疡的保护作用,并初步探索其可能的作用机制。方法 36只SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组(奥美拉唑,20 mg/kg)、戊己丸低、中、高(2.52、5.04、10.08 g/kg生药量)剂量组,每组6只。各组大鼠灌胃相应药物或0.5%羧甲基纤维素钠(Carboxymethyl Cellulose, CMC-Na)水溶液,1次/d,连续7 d,于末次给药1 h后,除正常组外,其余各组均给予吲哚美辛(60 mg/kg)灌胃造模;6 h后处死大鼠,收集血清和胃组织。通过改良Guth法计算胃溃疡指数和溃疡抑制率,染色观察比较各组大鼠胃组织病理学变化;使用试剂盒测定胃组织中丙二醛(Malonaldehyde, MDA)、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase, SOD)和环氧合酶1(Cyclooxygenase-1,COX-1),血清中一氧化氮(Nitric Oxide, NO)、肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)和白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)的含量;TUNEL染色法比较各组大鼠胃组织细胞凋亡情况;免疫组化法测定胃组织中环氧合酶2(Cyclooxygenase-2,COX-2)、NF-κB(p65)蛋白的表达水平。结果 与正常组相比,模型组大鼠胃组织黏膜层、黏膜下层、肌层及浆膜部分结构受损,胃溃疡指数和胃组织细胞凋亡百分比显著升高(P<0.01);MDA、TNF-α、IL-6水平显著升高(P<0.01),COX-1、NO、IL-10和SOD水平显著降低(P<0.01);COX-2和NF-κB(p65)蛋白表达显著升高(P<0.01);与模型组相比,各给药组均能改善胃组织损伤状况;戊己丸中、高剂量组和奥美拉唑组均能显著降低(P<0.01)胃溃疡指数和升高溃疡抑制率,升高COX-1、NO、IL-10水平,降低MDA、COX-2、TNF-α、IL-6和NF-κB(p65)水平,各给药组均明显降低大鼠胃组织细胞凋亡百分比,其中戊己丸中剂量组表现出良好的作用。结论 戊己丸对吲哚美辛诱导的大鼠胃溃疡有明显的保护作用,其作用机制可能与改善氧化应激抑制、炎症反应和减少细胞凋亡有关。

左金果胶胶囊的处方优化及其对胃溃疡模型大鼠的保护作用

目的:优化左金果胶胶囊的处方,制备对胃溃疡具有保护作用的现代左金果胶胶囊剂。方法:以果胶、可溶性淀粉、糊精含量为考察因素,以胶囊剂中颗粒的成型性、吸湿性、流动性为考察指标,采用正交实验优化左金果胶胶囊的处方。以左金提取物浸膏粉末为原料,采用湿法制粒填充法制备左金果胶胶囊。采用高效液相色谱法测定左金果胶胶囊中盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、吴茱萸碱、吴茱萸次碱的含量,并采用转篮法考察该胶囊剂在0.1 mol/L盐酸溶液中的体外释药行为。通过灌胃75%乙醇复制胃溃疡大鼠模型,以胃溃疡指数、胃溃疡抑制率和胃组织病理切片结果为指标,初步考察左金果胶胶囊(剂量分别为54、108、216mg/kg)的胃溃疡保护作用。结果:左金果胶胶囊的最优处方为果胶含量45%、可溶性淀粉含量12%、糊精含量27%、木糖醇含量1%。体外释放结果表明,1 h时左金果胶胶囊中盐酸巴马汀和盐酸小檗碱分别释放了53.76%、54.82%,二者均在8 h左右释放完全,且均符合零级释放行为。不同剂量左金果胶胶囊均能不同程度地改善胃溃疡模型大鼠胃组织的溃疡损伤,显著降低其胃溃疡指数(P<0.01),显著升高其胃溃疡抑制率和碘酸雪夫氏染色阳性表达面积百分比(P<0.01)。结论:成功制得对胃溃疡具有保护作用并具有一定缓释效应的左金果胶胶囊。

吴茱萸碱磷脂复合物自乳化药物递送系统的制备、表征及胃黏膜渗透性研究

目的制备吴茱萸碱磷脂复合物自乳化药物递送系统(EVO-PC-SMEDDS),并对其进行表征及胃黏膜渗透性考察。方法制备EVO-PC-SMEDDS,检测其粒径、多分散系数(PDI)和Zeta电位,并进行显微观察。考察该制剂在不同pH(1.2、2.0、4.0、7.0)模拟胃液中的稳定性。测定该制剂的包封率和载药量,并进行体外释放考察。将大鼠胃黏膜组织和尤斯灌流室技术相结合,考察该制剂的胃黏膜渗透性。结果EVO-PC-SMEDDS的粒径为(53.63±1.51)nm、PDI为0.217±0.017、Zeta电位为(-12.20±0.15)mV、包封率为(95.25±0.97)%、载药量为(19.30±1.21)mg/g。在透射电子显微镜下,EVO-PC-SMEDDS呈大小均匀的类球形乳滴。稳定性实验结果显示,EVO-PC-SMEDDS在不同pH的模拟胃液中,粒径、PDI、Zeta电位均无明显变化,稳定性良好。体外释放实验结果显示,与吴茱萸碱(EVO)原料药比较,EVO-PC-SMEDDS的体外累积释放率提高了6.83倍,符合一级动力学释放模型。胃黏膜渗透性实验结果显示,EVO-PC-SMEDDS的累积渗透转运量、渗透速率、渗透通量及累积渗透曲线下面积均高于EVO原料药。结论本研究成功制得EVO-PC-SMEDDS,且该制剂稳定性良好,可明显改善EVO的体外释放行为和胃黏膜渗透性。

苗药六月还阳新鲜冻干粉氨基酸含量测定

目的:建立苗药六月还阳新鲜冻干粉氨基酸的含量测定方法,测定不同产地样品中的含量。方法:以谷氨酸为对照品,在570 nm处测定六月还阳中氨基酸含量。结果:谷氨酸在80.60~201.40μg·mL-1范围内呈良好的线性关系(r=0.9983),平均加样回收率为103.7%,RSD为1.03%;10批六月还阳氨基酸平均含量为4.64%。结论:建立的六月还阳氨基酸含量测定方法简便稳定,重复性好,可为其质量控制提供参考。

吴茱萸碱磷脂复合物自微乳给药系统的胃溃疡靶向效应及保护作用评价

目的对吴茱萸碱磷脂复合物自微乳给药系统(evodiamine phospholipid complex self-emulsifying drug delivery system,Evo-PC-SMEDDS)的胃溃疡靶向效应进行评价,并验证其药效。方法通过分析荧光成像结果与激光共聚焦显微镜荧光成像结果,对该制剂的胃溃疡靶向性做出评价;通过胃组织形态学观察、HE染色结果,评价Evo-PC-SMEDDS对乙醇诱导的大鼠胃溃疡模型的改善作用,并计算胃溃疡指数、胃溃疡抑制率对胃溃疡情况进行量化和评分;通过测定胃分泌物与氧化应激相关因子,推测Evo-PC-SMEDDS可能的作用机制。结果动物荧光成像结果显示,Evo-PC-SMEDDS在大鼠体内存在胃滞留。通过激光共聚焦显微镜观察到,荧光探针FITC标记的Evo-PC-SMEDDS集中分布于模型大鼠的溃疡黏膜表面。药效学结果与HE染色分析结果均显示,Evo-PC-SMEDDS对乙醇诱导的大鼠胃溃疡模型有较好的保护作用,且测得给药组大鼠胃组织中的MPO和NO含量显著降低(P<0.01)。且与吴茱萸碱组相比,其胃组织中GSH水平显著提高(P<0.01),SOD活力更强,MDA含量更低。结论Evo-PC-SMEDDS在胃内滞留时间达到6 h,明显长于在正常大鼠的胃内滞留时间,推断Evo-PC-SMEDDS以胃内滞留方式实现溃疡部位的特异性分布。Evo-PC-SMEDDS对乙醇诱导的大鼠胃溃疡具有显著的保护作用,可通过口服给药方式及时、有效地抑制胃溃疡大鼠胃组织中过氧化脂质的产生,抑制胃液中H+分泌和胃蛋白酶的活性,减轻大鼠的胃溃疡损伤程度。