水飞蓟宾对乙醇诱导H9c2心肌细胞氧化应激损伤的保护作用

目的探讨水飞蓟宾对乙醇诱导状态下H9c2心肌细胞氧化应激损伤的保护效应。方法实验中,将H9c2心肌细胞随机分为对照组、乙醇组(500 mmol/L)以及水飞蓟宾(50μmol/L、100μmol/L)+乙醇组。经过药物干预后,观察细胞形态,使用细胞计数试剂盒(CCK8)试剂盒检测细胞存活率,流式细胞术测定细胞内活性氧(ROS)含量、细胞凋亡以及线粒体膜电位变化;测定细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性和丙二醛(MDA)含量;检测细胞中过氧化氢酶(CAT)、抗氧化酶超氧化物歧化酶(SOD)以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性。结果乙醇组的H9c2心肌细胞形态异常,存活率显著降低,细胞凋亡率升高,线粒体膜电位降低,细胞内ROS增加;细胞培养液中LDH活性和MDA含量显著升高,细胞中抗氧化酶物质活性显著降低。相比于乙醇组,水飞蓟宾(100μmol/L)+乙醇(500mmol/L)组H9c2心肌细胞形态改善,存活率显著提高,凋亡率显著降低,线粒体膜电位的降低有所改善,培养液中LDH活性和MDA含量显著降低,细胞中抗氧化酶活性显著升高,细胞内ROS显著降低,差异均具有统计学意义。结论H9c2心肌细胞经乙醇诱导构建氧化应激损伤模型,水飞蓟宾作用后在细胞形态、细胞存活率和凋亡率以及抗氧化酶活性改善等方面表现出明显的保护效应。

铜绿假单胞菌859株耐药情况分析

目的 通过分析本院近3年检出的859株铜绿假单胞菌的临床科室分布以及耐药性情况,为抗生素的合理使用和院感监控提供参考。方法 采用回顾性分析,借助WHONET 5.6软件对本院2020年6月1日至2023年6月30日检出的铜绿假单胞菌进行耐药性情况分析。结果 在检出的859株铜绿假单胞菌中,痰液标本744株(86.6%),血液标本45株(5.2%),尿液标本10株(1.2%),分泌物标本31株(3.6%),其他标本29株(3.4%);铜绿假单胞菌对阿米卡星和妥布霉素更为敏感,敏感率分别为99.1%和98.2%,耐药性前4位依次为替卡西林/克拉维酸(43.9%)、左氧氟沙星(27.3%)、亚胺培南(26.0%)、美罗培南(22.55%)。结论铜绿假单胞菌耐药机制复杂,对部分抗生素耐药性较高,临床科室要根据药敏试验合理用药,避免产生多重耐药,同时要做好泛耐药菌株的隔离,避免院感的发生。

Linc01230通过磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B-内皮型一氧化氮合酶信号通路拮抗动脉粥样硬化机制研究

目的探讨Linc01230通过磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B-内皮型一氧化氮合酶(PI3K-AKT-eNOS)信号通路拮抗动脉粥样硬化的作用机制。方法50μg/ml的氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活力;实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测PI3K、AKT、eNOS表达水平;蛋白免疫印迹(Western Blot)检测PI3K、AKT、p-AKT、eNOS、p-eNOS蛋白表达。结果ox-LDL诱导后HUVEC存活率降低,转染linc01230-311后细胞存活率较ox-LDL组降低,然而过表达Linc01230-311后,ox-LDL诱导的HUVEC存活率升高;ox-LDL诱导HUVEC细胞后,PI3K、AKT和eNOS mRNA水平和蛋白水平降低,转染linc01230-311后,与空白对照组相比,PI3K、AKT和eNOS mRNA水平和蛋白水平下降,转染过表达Linc01230-311后,PI3K、AKT和eNOS mRNA水平和蛋白水平均有一定水平的上调,同时p-AKT和p-eNOS蛋白表达水平也有同样的趋势。结论Linc01230能够改善ox-LDL诱导的内皮细胞损伤,其机制可能与Linc01230激活PI3K-AKT-eNOS信号通路有关。

早期缺氧对小鼠心肌细胞miR-34a表达及凋亡的影响

目的 探讨早期缺氧对小鼠心肌细胞miR-34a表达及凋亡的影响。方法 原代培养小鼠乳鼠心肌细胞并培养,缺氧6 h造模,使用anti-miR-34a纳米颗粒干预。将其随机分为三组:对照组(C组)、缺氧组(Ⅰ组)和缺氧+anti-miR-34a纳米颗粒组(Ⅰ+NP组)。采用qRT-PCR检测miR-34a的表达,Western blot检测乙醛脱氢酶2(ALDH2)、caspase 3的表达。结果 Ⅰ组的miR-34a表达、caspase 3表达均高于C组,差异均有统计学意义(P<0.05);Ⅰ组的ALDH2表达低于C组,差异有统计学意义(P<0.05);Ⅰ+NP组的miR-34a表达、caspase 3表达均低于Ⅰ组,差异均有统计学意义(P<0.05);Ⅰ+NP组的ALDH2水平高于Ⅰ组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 早期缺氧上调小鼠心肌细胞miR-34a表达,下调下游ALDH2蛋白的表达;Anti-miR-34a纳米颗粒可以进入心肌细胞缓解早期缺氧引起的凋亡。

急性缺氧诱导小鼠心肌细胞微小RNA-34a升高和凋亡实验研究

目的:探讨急性缺氧对心肌细胞miR-34a表达、蛋白磷酸酶1核靶向亚基(PNUTS)蛋白和凋亡的影响。方法:原代培养小鼠乳鼠心肌细胞,缺氧24 h造模,使用antimiR-34a纳米颗粒干预。将其随机分为三组:对照组、缺氧组、缺氧+antimiR-34a纳米颗粒组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)测miR-34a表达,Western blot检测PNUTS蛋白表达,流式细胞术测凋亡率。结果:与对照组相比,缺氧24 h后miR-34a表达明显增高(P<0.05),PNUTS水平降低(P<0.05),凋亡率升高(P<0.05);与缺氧组相比,缺氧+antimiR-34a纳米颗粒组的miR-34a表达下降(P<0.05),PNUTS水平升高(P<0.05),凋亡率下降(P<0.05)。结论:急性缺氧上调小鼠心肌细胞miR-34a基因表达,下调其下游PNUTS蛋白表达,同时上调凋亡率;antimiR-34a纳米颗粒抑制急性缺氧诱导的小鼠心肌细胞miR-34a升高,PNUTS降低以及细胞凋亡。

SLCO1B1521 T>C/ApoE基因多态性对阿托伐他汀临床应用的研究

目的探讨SLCO1B1521 T>C与ApoE基因多态性对阿托伐他汀钙片的降脂疗效和安全性的相关性。方法采用荧光探针法检测病人SLCO1B1521 T>C与ApoE基因多态性;160例病人口服阿托伐他汀钙片20 mg/d,通过检测用药前以及用药8周后的低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),评价降脂疗效;通过随访用药期间肌痛的发生,评价肌病不良反应的发生频率。结果160例受试者SLCO1B1521T>C基因型分布为TT 70.6%,TC 24.4%,CC 5.0%;ApoE基因型分布为E3/E364.4%,E2/E316.9%,E3/E416.3%,E4/E41.2%,E2/E41.2%,未见E2/E2基因型。阿托伐他汀钙片治疗8周后,ApoE E2/E3、E3/E3、E3/E4基因组比较,病人血浆中的LDL-C下降水平差异有统计学意义(P<0.05);SLCO1B1521 T>C 3种基因型发生肌痛的频率明显不同(P<0.05)。结论SLCO1B1521 T>C/APOE基因多态性与阿托伐他汀钙片安全性及疗效有关,临床上联合检测SLCO1B1521 T>C与ApoE基因型有助于临床合理用药,实现阿托伐他汀钙片的个体化用药。

黏液型马红球菌一例的鉴定及分析

马红球菌是一种需氧放线菌,隶属于放线门、放线菌纲、放线菌目、棒杆菌亚目、诺卡菌科,其最初发现于1923年,曾归属棒状杆菌属,最早称为马棒状杆菌名为"Corynebacterium equi",后来经细胞壁结构分析发现该菌与棒杆菌属有较大差异,将其归属为红球菌属,命名为马红球菌[1].

亚急性感染性心内膜炎一例及文献复习

1 病例资料 患者女性，30岁，于4个月前“上呼吸道感染”后出现发热，体温最高至39℃，伴咳嗽、全身乏力，无胸闷、气短，无恶心、呕吐、咳痰，无双下肢水肿，自行口服退热药物治疗，体温逐渐正常，但随后再次出现发热，就诊于小诊所，予以输液（具体药物和用量不详）、抗炎治疗后好转，未进一步诊治。

忻州地区耳聋患者常见耳聋基因GJB2、GJB3和线粒体DNA 12S rRNA 1555A>G相关性分析

目的通过对忻州地区83例耳聋患者常见基因GJB2、GJB3和线粒体DNA 12S rRNA 1555A>G测序分析,从分子水平研究该地区人群聋病的遗传病因和特点,为临床防聋治聋提供策略、依据。方法收集忻州地区83例耳聋患者外周血样本,提取DNA后对目的基因扩增并进行测序分析。结果 83例耳聋患者中GJB2基因检测到57例发生突变,9个突变位点,与编码连接蛋白的非综合症耳聋突变数据库(http://davinci.crg.es/deafness/index.php?seccion=mut_db&db=nonsynd)比对,8个位点已见报道,其中包括3个多态位点c.79 G>A、c.341 A>G、c.368 C>A和5个致病位点c.235delC、c.30-35delC、c.109 G>A、c.176-c.191 del16和c.299-c.300delAT,其中,c.79 G>A和c.341 A>G是主要突变方式,携带率为30.12%(42/174)和23.49%(39/166)。新发现1例未见报道的突变位点c.186C>T;患者均未检测出GJB3和线粒体DNA 12S rRNA 1555A>G基因突变位点。结论通过对忻州地区常见耳聋基因突变位点的研究,了解忻州地区该基因突变谱,为后续国内耳聋基因型分布提供数据支持,同时也为耳聋的早期诊断、治疗提供理论依据。

山西汉族遗传性多发性骨软骨瘤家系EXT1及EXT2基因突变研究

目的对山西一个汉族遗传性多发性骨软骨瘤家系的EXTl和EXT2基因的全部外显子序列进行分析，以寻找致病突变。方法用PCR扩增先证者EXTl和EXT2基因的全部外显子，将PCR产物送直接测序分析。结果发现EXT1基因2种同义突变（P477P、E587E）、3种内含子突变（C．1537－48A〉G、C．1721＋203A〉G、c．1722－1。3c〉G）。EXT2基因共发现5种内含子突变（C．－29－148A〉T、C．1080－18T〉A、C．1336－93C〉T、C．1526－166C〉T、C．1526－195C〉T）。其中，EXTlP477P、EXTlE587E和EXT2C．1080－18T〉A为多发性骨软骨瘤突变数据库已收录的多态位点，其余7个位点尚未见报道。结论对该家系EXT1、EXT2基因全部外显子的测序分析未发现明确的致病突变，该家系遗传性多发性骨软骨瘤的发生是否由除EXTl、EXT2外的其它EXT相关基因引起尚需进一步的连锁定位分析。

长治地区耳聋患者常见耳聋基因GJB2、GJB3和线粒体DNA 12S rRNA 1555A>G相关性分析

目的通过对长治地区115例耳聋患者常见基因GJB2、GJB3和线粒体DNA 12S rRNA 1555A>G测序分析,研究该地区耳聋基因的突变情况及热点突变位点。方法收集长治地区特殊教育学校的115例耳聋患者的外周血样本,提取其DNA后对它的目的基因进行扩增并测序。结果 115例耳聋患者中GJB2基因检测到81例发生突变,并发现了10个突变位点,其中c.7657T>C是主要的多态位点,其携带率为22.6%(52/115)。另外,长治地区发现2例线粒体DNA1555A>G位点突变,未检测出GJB3基因突变位点。结论通过对长治地区常见耳聋基因突变位点的研究,了解该地区的耳聋基因突变谱,为后续国内耳聋基因型分布提供数据支持,同时也为耳聋的早期诊断,治疗提供理论依据。

运城地区耳聋患者常见耳聋基因突变分析

目的通过筛查运城地区耳聋患者常见耳聋基因GJB2、PDS和线粒体DNA1555位点的突变频率,来研究该地区常见耳聋基因突变的发生情况。方法采集运城市特殊教育学校75例耳聋患者外周血,对目的基因扩增并测序。结果 75例患者中,45例患者的GJB2基因发生突变,其中,c.235delC、c.79 G>A和c.341 A>G的突变频率较高,分别为12%、22%和18.7%,另外还检测出4个突变频率较低的位点c.608 T>C(2%)、c.109 G>A(0.67%)、c.368 C>A(1.33%)和c.176-191del16(0.67%);3例患者的PDS基因第19外显子发生突变,c.2168 A>G与IVS7-2 G>A突变频率分别为1.33%和2%;仅有1例患者mtDNA1555发生突变。结论通过对山西运城地区常见耳聋基因突变的研究,对建立山西省耳聋基因突变数据库提供素材,同时也为耳聋的预防,基因诊断及治疗提供强有力的依据。

大同地区耳聋基因GJB2和mtDNA1555突变分析

目的通过筛查大同地区87例耳聋患者常见基因GJB2和mtDNA1555的突变频率,研究该地区GJB2和mtDNA1555基因突变情况及热点突变位点。方法采集大同地区87例耳聋患者外周血,对目的基因扩增并进行测序分析。结果所有患者中有58例GJB2基因检测到11个突变位点,与编码连接蛋白的非综合征耳聋突变数据库(http://davinci.crg.es/deafness/index.php?seccion=mut_db&db=nonsynd)比对,9个位点已见报道,其中包括5个多肽位点c.79 G>A、c.341 A>G、c.608 T>C、c.368 C>A、c.765T>C和4个致病位点c.235delC、c.109 G>A、c.176-c.191 del 16和c.299-c.300delAT,其中,c.79 G>A是主要突变方式,携带率为24.14%(42/174)。新发现两例未见报道的突变位点c.277A>G和c.558G>A;患者中只有1例检测到mtDNA1555A>G位点突变。结论通过对大同地区GJB2基因和mtDNA1555突变位点的研究,了解大同地区该基因突变谱,为后续国内耳聋基因型分布提供数据支持,同时也为耳聋的早期诊断,治疗提供理论依据。

DNA去甲基化对急性B淋巴细胞白血病细胞株中DNA甲基转移酶基因及微RNA作用的研究

目的：探索甲基化转移酶抑制剂5-杂氮-2＆#39;-脱氧胞苷（5-Aza-CdR）对急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）细胞株NALM-6的作用以及对细胞中微RNA（miRNA）表达水平的影响。方法用不同浓度5-Aza-CdR处理NALM-6细胞，采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞增殖情况，采用荧光定量反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测5-Aza-CdR处理后细胞DNA甲基转移酶（DNMT）基因mRNA表达水平的变化，采用miScript miRNA PCR Array芯片检测去甲基化后细胞中表达量发生改变的miRNA。结果 NALM-6细胞经不同浓度5-Aza-CdR处理不同时间后，细胞生长受抑，最高抑制率达（74.163±0.381）%。5-Aza-CdR作用浓度与DNMT基因mRNA表达水平呈反比，浓度为1000μmol／L的5-Aza-CdR作用细胞72 h后，DNMT-1的相对表达量降至0.453±0.021，DNMT-3L的相对表达量为0.003±0.001， DNMT-3B的相对表达量为0.395±0.019。miScript miRNA PCR Array筛选出3个miRNA（miR-184、miR-23a-3p、miR-34a-5p）与DNA甲基化相关。结论5-Aza-CdR可下调NALM-6细胞中DNMT基因的表达，并对细胞增殖有抑制作用。miR-184、miR-23a-3p和miR-34a-5p在B-ALL的发生、发展中与DNA甲基化相关。

遗传性多发性骨软骨瘤一家系10例

先证者（图1．IV1）男，16岁。全身性骨软骨瘤、腿部骨瘤严重影响行走。于2000及2001年两次手术切除，在其家系中病情最为严重。

上帝的渴望

“上帝保佑!”这是上帝听到的最多的话。每一天他都要听无数次,耳廓都已长满了老茧。有一天,他终于厌烦了:“别再说了,你们虔诚的祈祷我已听腻。我勤恳工作了几千年,现在需要休息。”于是,上帝将他自己炒了鱿鱼。现在他是一个自由神,