用Fura-2/AM测定细胞内游离钙浓度的方法

新型Ca^(2+)荧光指示剂F ura-2/AM由中国医学科学院药物研究所合成。本文详细介绍了用F ura-2/AM测定神经细胞、巨噬细胞和主动脉条平滑肌细胞内游离钙的方法。经比较,国产与Sigma产F ura-2/AM的质量相同。

人参皂甙Rb1和Rg1促智作用机制的探讨──对小鼠脑神经发育的影响

以０．１２５，０．２５ｍｇ·ｍｌ－１的人参皂甙Ｒｂ１和Ｒｇ１水溶液作为刚断乳小鼠唯一的饮用水，喂养４周至新成年。对照组动物给自来水，人参皂甙摄入量为Ｒｂ１２８．６及５６．１ｍｇ·ｋｇ１－１；Ｒｇ１２７．４及５３．９ｍｇ·ｋｇ－１。结果发现Ｒｂ１和Ｒｇ１均可促进幼鼠身体发育和脑神经发育，并易化小鼠成年后跳台法和避暗法记忆获得过程。用突触定量技术，首次发现较长期给予Ｒｂ１和Ｒｇ１可明显增加小鼠海马ＣＡ３区椎体细胞上层的突触数目（Ｐ＜０．０１），从而揭示了人参皂甙促进动物学习记忆的组织形态学基础。

人参皂甙Rb_1降低细胞内Ca^（2＋）作用的机制

使用荧光探针Ｆｕｒａ－２／ＡＭ，采用双波长荧光分光光度法观察到，人参皂甙Ｒｂ＿１（１０，５０，１００μｍｏｌ·Ｌ￣（－１））能剂量依赖性减少新生鼠脑细胞内钙浓度，并能增加由硫酸亚铁及半胱氨酸所降低的膜流动性，Ｒｂ１（１０μｍｏｌ·Ｌ￣（－１））能使离体大鼠尾动脉去甲肾上腺素量一效曲线右移，最大效应降低；Ｒｂ＿１（１０，１００μｍｏｌ·Ｌ￣（－１））能降低离体鼠基底动脉５－ＨＴ所引起的收缩。使用全细胞膜片钳技术发现人参皂甙Ｒｂ＿１（５０，１００μｍｏｌ·Ｌ￣（－１））对钙电流无明显影响；Ｒｂ＿１在低剂量能增加大鼠突触体Ｎａ￣＋－Ｋ￣＋ＡＴＰａｓｅ及Ｃａ￣（２＋）Ｍｇ￣（２＋）ＡＴＰａｓｅ活性。从而揭示Ｒｂ＿１，降低胞内钙含量可能通过增加ＡＴＰ酶活性而产生。

黄皮酰胺的抑制脂质过氧化和脑保护作用

黄皮酰胺是类似脑复康结构的一种化合物。实验表明po能明显延长小鼠断头后的张口呼吸时间和sc亚硝酸钠225 mg/kg后的动物存活时间。po黄皮酰胺100 mg/kg·bid×3能抑制由p0 50%乙醇(15 ml/kg)诱发小鼠肝脂质过氧化反应,使TBA反应值下降,明显激活肝和脑组织胞浆液中谷胱甘肽过氧化酶的活力。大鼠脑基底动脉条收缩实验结果表明,黄皮酰胺10^(-5)mol/L可明显抑制由5-HT,PGF_(2x)和花生四烯酸引起的血管收缩,提示黄皮酰胺有缓解血管痉挛,增加脑血流量的作用。

小鼠尾动脉条应用于α肾上腺素受体激动剂、拮抗剂和钙拮抗剂的研究

近年内,国外一些学者已证明大鼠尾动脉存在突触后α_1和α_2肾上腺素受体并对此两种亚型的生理性质进行了研究、比较。目前,大鼠尾动脉条已广泛用于α_1及α_2受体激动剂和拮抗剂以及钙拮抗剂的生理和药理学研究。该方法需将动脉剪成螺旋条,制做比较复杂。为易于掌握,我们在制备方法上进行了改进。随后,设计和建立了小鼠尾动脉条实验模型。本文重点介绍小鼠尾动脉实验方法的优点及其应用范围,翼能在国内得到推广应用。

晕复静抑制大白鼠及自愿者前庭刺激反应的研究

取50只雌性大鼠用于旋转试验,晕复静可有效地抑制眼球震颤,其作用强度比密环菌强20～30倍;采用Coriolis试验观察了32名自愿者,口服晕复静400mg后,接受前庭刺激的耐受时间明显延长,服药前后的平均耐受时间分别为411.34秒和759.63秒;与此同时,血压、脉搏无明显影响。

前胡丙素对培养大鼠心肌细胞内游离Ca^(2+)的影响

用Fura-2/AM技术直接观察前胡丙素(Pra-C)对培养大鼠心室肌细胞内游离钙的影响。结果显示Pra-C浓度为0.1～1.0μmol·L^(-1)可明显抑制CaCl_2,高K^+和Bay K 8644引起[Ca^(2+)]i增加,并且有剂量—效应关系,对ouabain引起的[Ca^(2+)]i增加无明显作用。结果提示Pra-C降低心肌细胞[Ca^(2+)]i的作用与抑制电压依赖性钙通道有关。