氧化应激在女性生殖功能损伤中的研究进展

氧化应激(oxidative stress)是氧化-抗氧化系统的失衡引起的。低水平的活性氧(reactive oxygen species,ROS)在细胞生理功能调节中具有重要作用,高水平ROS会引起离子通道开放、脂质过氧化、蛋白质修饰、DNA氧化等,进而导致细胞、组织及器官的损伤。在女性生殖系统中,高水平的ROS可对女性生殖细胞及生殖器官产生损伤,进而降低女性生育能力,可引起卵泡异常闭锁、减数分裂异常、受精率降低、胚胎发育延迟,加速卵巢的老化等,此外,氧化应激与多囊卵巢综合征、子宫内膜异位症等疾病的发生、发展密切相关。本文就氧化应激对生殖细胞、生殖器官损伤及抗氧化治疗做一综述。

人卵丘颗粒细胞线粒体与胚胎质量的关系研究

目的:探讨人卵丘颗粒细胞(CGCs)线粒体与胚胎质量及发育潜能的关系。方法:选取2022年10月到2023年10月于联勤保障部队第九四〇医院生殖中心行IVF/ICSI助孕的60例患者,收集患者取卵当日CGCs并体外培养,根据取卵后第3d(D3)CGCs对应的优质胚胎率将其分为3组:A组(优质胚胎率<1/3)、B组(1/3<优质胚胎率>2/3)、C组(优质胚胎率>2/3)。通过观察并比较各组间CGCs线粒体分布、线粒体膜电位(MMP)、活性氧(ROS)水平、线粒体DNA(mtDNA)拷贝数与细胞内三磷酸腺苷(ATP)水平的差异,评估它们对胚胎质量的影响。结果:与C组相比,A、B组CGCs ATP、MMP明显降低、ROS水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。三组间线粒体分布率及mtDNA拷贝数差异无明显统计学意义(P>0.05)。结论:CGCs的ATP、MMP、ROS水平可用于预测胚胎质量。

2061例不同民族不育男性精液质量与DFI比较分析

目的:分析2061例不同民族不育男性精液质量状况,探讨不同民族间不育男性精液质量与精子DNA碎片指数(DFI)的相关性,为保护不同民族不育男性生育力提供理论依据。方法:回顾性分析2019年1月至2022年1月在我院生殖医学中心门诊就诊的2061例的少数民族不育男性患者精液标本,采用计算机辅助精液质量分析技术、改良巴氏染色法、伊红苯胺黑法、精子染色质扩散法检测精液质量、精子存活率、精子形态正常率及精子碎片指数等参数,比较了精液质量与DFI的相关性。结果:2061例不同民族不育男性精液质量分析中正常精液903例(43.8%),异常精液1158例(56.2%),异常精液主要表现为精子活力低45.3% (933例),而无精症8.9% (184例)高于周边地区。其中回族、东乡族患者与其他民族在前向运动(PR)精子活力、精子存活率、精子形态正常率均低于其他各组,而东乡族精子DFI均高于其他各族,差异有统计学意义(P 0.05)。结论:本地区不同民族精液质量异常主要表现在精子活力低。而早检查、早预防、早治疗是少数民族不育男性生育力保护的关键。同时,精子DFI作为精液质量评价的重要指标,与年龄、禁欲天数、精子活力、精子存活率、精子形态正常率均有显著相关性。因此,对不育男性精液质量常规检查与精子DFI结果的综合分析,可能有助于准确评估男性生育能力,对不育男性生育力保护有利。

白藜芦醇对Gc-1spg细胞氧化应激损伤的作用研究

目的观察白藜芦醇(RES)对过氧化氢H_(2)O_(2)诱导的小鼠精原细胞(Gc-1 spg)氧化应激损伤的作用。方法H_(2)O_(2)复制Gc-1 spg细胞氧化应激损伤模型,设置空白组、H_(2)O_(2)组(800µmol/L)、H_(2)O_(2)+5µmol/L RES组、H_(2)O_(2)+10µmol/L RES组和H_(2)O_(2)+15µmol/L RES组。检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,CCK-8法检测细胞活力,JC-1试剂盒检测线粒体膜电位,Mito Tracker®®Green FM试剂盒检测活细胞线粒体水平,Hoechst 33342染色检测细胞核凋亡率,Western blotting检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3表达。结果浓度为800µmol/L H_(2)O_(2)处理Gc-1 spg细胞6 h时达到实验要求(P<0.05)。与空白组比较,各H_(2)O_(2)组细胞活力降低(P<0.05),与H_(2)O_(2)组比较,H_(2)O_(2)+5µmol/L RES组、H_(2)O_(2)+10µmol/L RES组、H_(2)O_(2)+15µmol/L RES组细胞活力升高(P<0.05)。与空白组比较,各H_(2)O_(2)组的GSH-Px和SOD水平降低(P<0.05),LDH和MDA水平升高(P<0.05);与H_(2)O_(2)组比较,H_(2)O_(2)+5µmol/L RES组、H_(2)O_(2)+10µmol/L RES组、H_(2)O_(2)+15µmol/L RES组GSH-PX和SOD水平降低(P<0.05),LDH和MDA水平升高(P<0.05)。与空白组比较,H_(2)O_(2)组细胞的红/绿荧光比值降低,提示线粒体膜电位降低(P<0.05);与H_(2)O_(2)组比较,H_(2)O_(2)+5µmol/L RES组、H_(2)O_(2)+10µmol/L RES组、H_(2)O_(2)+15µmol/L RES组JC-1红/绿荧光比值升高(P<0.05)。与空白组比较,H_(2)O_(2)组细胞线粒体数明显减少(P<0.05);与H_(2)O_(2)组比较,H_(2)O_(2)+5µmol/L RES组、H_(2)O_(2)+10µmol/L RES组、H_(2)O_(2)+15µmol/L RES组细胞荧光强度升高(P<0.05)。与空白组比较,H_(2)O_(2)组大量细胞核皱缩、碎裂,染色程度明显增强,细胞凋亡严重;与H_(2)O_(2)组比较,H_(2)O_(2)+5µmol/L RES组、H_(2)O_(2)+10µmol/L RES组、H_(2)O_(2)+15µmol/L RES组细胞凋亡率降低(P<0.05)。与空白组比较,H_(2)O_(2)组凋亡蛋白Bax和Caspase-3相对表达量增加(P<0.05),Bcl-2相对表达量减少(P<0.05);与H_(2)O_(2)组比较,H_(2)O_(2)+5µmol/L RES组、H_(2)O_(2)+10µmol/L RES组、H_(2)O_(2)+15µmol/L RES组Bax和Caspase-3相对表达量降低(P<0.05),Bcl-2相对表达量增加(P<0.05)。结论RES对H_(2)O_(2)诱导的Gc-1 spg细胞氧化应激损伤具有保护作用,这种保护作用与RES浓度有关。

白藜芦醇治疗精子线粒体损伤导致的男性不育的作用机制研究进展

良好的精子活力是男性保持生育力的关键。线粒体是精子活力的主要调节器,当精子线粒体DNA损伤、线粒体蛋白表达异常、线粒体膜电位改变、氧化应激损伤时,精子活力均明显降低,导致男性不育。白藜芦醇是植物多酚类化合物中抗氧化能力最强的物质之一,具有清除氧自由基、抑制脂质过氧化、调节相关酶活性及基因表达等作用。本文对白藜芦醇在精子线粒体损伤导致的男性不育中的潜在作用和相关机制进行综述,为男性不育的临床治疗与相关研究提供参考依据。

间充质干细胞治疗早发性卵巢功能不全的研究进展

早发性卵巢功能不全(POI)是现代女性不孕症发生的重要原因之一,其发病率近年不断上升,极大地影响了患者的生活质量并加重了其心理及社会经济负担。POI病因复杂,治疗棘手,目前尚无从根本上恢复卵巢功能的方法。间充质干细胞(MSCs)具有自我更新及多向分化潜能,可通过归巢作用或旁分泌等机制,促进卵巢功能的恢复,从而改善育龄期女性的生育能力,受到了国内外学者的广泛关注。本文就MSCs治疗POI的研究进展进行综述,为后续研究提供参考依据。

非梗阻性无精子症的组学研究进展

无精子症是指多次精液检查(一般3次以上)均未发现精子,是男性不育最严重的一种。可分为梗阻性无精子症(OA)和非梗阻性无精子症(NOA),其中NOA占无精子症的60%。目前NOA病因仍不明确,蛋白质表达的改变、基因突变及其他因素均可造成精原干细胞分化成精子的过程障碍,导致无精子症的发生。本文主要针对NOA发生上游的基因组学、蛋白质组学及下游的代谢组学展开综述,以期对NOA的临床诊疗提供参考。

缺氧条件下GC-1细胞凋亡的作用机制研究

以小鼠精原细胞系GC-1细胞为研究对象,探讨缺氧条件下GC-1细胞凋亡潜在的分子机制。首先,采用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法检测不同缺氧时间处理下的细胞活力,以确定细胞缺氧损伤的时间;然后,通过化学荧光法检测GC-1细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量,采用JC-1法检测线粒体的膜电位,采用比色法检测ATP的含量,采用线粒体荧光探针法检测线粒体的数量与分布,并采用透射电镜观察细胞的超微结构;最后,利用实时荧光定量PCR检测线粒体信号通路相关基因胱天蛋白酶(caspase)-3、caspase-9、细胞色素c(cytochrome c,Cyt-c)、Bax和Bcl-2的mRNA表达水平。结果显示,缺氧36 h后,细胞活力为(60.36±5.40)%,符合后续实验需求;在缺氧条件下,GC-1细胞中的ROS含量显著增加,ATP含量显著下降,线粒体膜电位下降、数量减少,同时细胞中促凋亡相关基因的表达水平上调,抗凋亡因子Bcl-2的基因表达水平下调。实验结果初步表明,缺氧可导致GC-1细胞线粒体功能障碍,ROS/线粒体信号通路是缺氧导致GC-1细胞凋亡可能的分子机制。

白藜芦醇介导AMPK/mTOR信号通路调控线粒体自噬缓解小鼠精原细胞氧化应激损伤和凋亡

目的观察白藜芦醇(resveratrol,RES)是否通过腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(amp-activatedproteinkinase/mammalian target of rapamycin,AMPK/mTOR)信号通路调控线粒体自噬缓解小鼠精原细胞(Gc-1 spg)氧化应激损伤。方法设置空白对照组(Control)、过氧化氢组(H_(2)O_(2))、H_(2)O_(2)+RES组、H_(2)O_(2)+RES+AMPK抑制剂(Compound C,CC)组,各组给予相应处理后。CCK-8检测细胞活力,试剂盒检测过氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化物(glutathione peroxidase,GSH-PX)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)和三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)SOD、MDA、GSH-PX、LDH和ATP水平,JC-1检测线粒体膜电位,MitoTracker?Green FM检测活细胞线粒体形态,Hoechst 33342染色检测细胞核凋亡率,透射电镜观察细胞超微结构及线粒体自噬变化,Western blot检测凋亡蛋白Bcl-2关联X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)、B细胞淋巴瘤-2蛋白(B-cell lymphoma 2 protein,Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase-3),自噬蛋白微管相关蛋白轻链3(light chain 3,LC3)、P62,通路相关蛋白AMPK、p-AMPK、mTOR、p-mTOR表达水平。结果H_(2)O_(2)促进Gc-1 spg细胞氧化应激损伤,激活AMPK/mTOR信号通路和线粒体自噬,提高p-AMPK/AMPK和LC3表达并降低p-mTOR/mTOR和P62表达;RES能缓解Gc-1 spg细胞氧化应激损伤,进一步提高p-AMPK/AMPK和LC3表达,降低p-mTOR/mTOR和P62表达,促进Gc-1 spg细胞线粒体自噬;AMPK抑制剂能逆转RES对Gc-1 spg细胞氧化应激损伤的保护作用,抑制SOD和GSH-PX活性并增加MDA和LDH水平,降低细胞线粒体膜电位,增加线粒体损伤,破坏细胞核,增加Bax、Caspase-3和P62表达水平并降低Bcl-2和LC3表达水平,增加细胞凋亡率,降低线粒体自噬。结论RES可能通过AMPK/mTOR信号通路促进Gc-1 spg细胞线粒体自噬缓解线粒体氧化应激损伤和细胞凋亡。

巨大卵巢恶性Brenner肿瘤合并胸腹水1例及文献回顾

Brenner肿瘤是一种纤维上皮性卵巢肿瘤,其特征是由纤维基质包围的移行样上皮细胞巢。世界卫生组织根据增殖和侵袭性将其分为良性、交界性和恶性。恶性Brenner肿瘤(malignant Brenner tumors,MBT)因临床上极为罕见而容易被误诊,且预后较差,治疗困难[1]。

鞘脂代谢在不孕不育中的研究进展

世界卫生组织(WHO)将不孕症定义为育龄夫妇婚后在适当、定时、无保护性交的情况下12个月或更长时间女方未能成功怀孕,由男方原因造成女方不孕称为不育症[1]。据估计,不孕不育影响着全球8%~12%的夫妇,在我国约为10%,其中男性因素约占50%[2]。男性不育是一种由多种病因引起的多因素疾病,包括类固醇激素生成障碍、精子发生缺陷、精子DNA损伤和线粒体功能障碍等,通常表现为少、弱、畸形精子症,最严重的是非梗阻性无精子症,其中少弱精子症是男方不育的常见原因,大约占男性不育的46%[3-4]。