紫花苜蓿UFO基因克隆及转化

紫花苜蓿(Medicago sativa L.)是多年生豆科牧草。为研究UFO(Unusual Floral Organs)基因相关功能,以紫花苜蓿中苜1号为试验材料,利用PCR技术在紫花苜蓿中克隆出UFO基因。通过DNA重组技术成功构建3302-3flag-UFO植物表达载体,利用农杆菌介导法对紫花苜蓿进行转基因操作,最终获得转基因紫花苜蓿。试验中激素浓度配比与植物表达载体的改良,提高了紫花苜蓿转基因过程中的转化率,而激素种类与配比则影响抗性愈伤的形成与愈伤组织的玻璃化程度。本试验共获得67个抗性愈伤,最终有56个分化成幼嫩紫花苜蓿转基因植株,炼苗入土获得17株转基因植株。遗传转化过程中获得的转基因植株为进一步研究UFO基因功能提供材料。

紫花苜蓿转录因子基因MsAP_(2)的克隆及转化

紫花苜蓿(Medicago sativa)为重要的豆科牧草植物,研究紫花苜蓿转录因子基因MsAP_(2)的功能,为探究MsAP_(2)的信号转导网络提供理论指导和材料基础,也为紫花苜蓿生物技术育种提供一定的参考和借鉴。运用RT-PCR技术克隆MsAP_(2),利用DNA重组技术构建3302-3flag-AP_(2)植物表达载体,并利用农杆菌介导法对紫花苜蓿进行遗传转化,对再生植株进行转基因鉴定、基因表达量分析、内源激素的测定(脱落酸、细胞分裂素、生长素和赤霉素)和表型鉴定。结果表明,成功获得转MsAP_(2)紫花苜蓿植株,与野生型相比,转基因植株的MsAP_(2)表达量和激素水平均发生明显改变,转基因植株呈现早衰性状,叶片形态和大小发生改变,根系生长受到抑制,分枝数发生改变。

蒺藜苜蓿细胞分裂素响应调节因子ARR9自激活检测及表达分析

细胞分裂素响应调节因子ARR在植物细胞分裂素信号转导过程中扮演重要角色。以豆科模式植物蒺藜苜蓿R108为材料,采用RT-PCR技术克隆蒺藜苜蓿ARR9基因,通过生物信息学分析、酵母转录自激活检测、原核表达及表达特征分析,探究蒺藜苜蓿ARR9基因功能。结果表明:蒺藜苜蓿ARR9基因编码区全长501bp,编码167个氨基酸,分子量18.95kD,理论等电点为6.21。生物信息学分析表明,ARR9可能参与转录调控、响应细胞分裂素及红光、细胞分裂素磷酸化信号转导及昼夜节律等过程。进化分析表明,蒺藜苜蓿ARR9蛋白与鹰嘴豆ARR蛋白亲缘关系最为接近。蒺藜苜蓿ARR9无转录自激活活性。在大肠杆菌Rosetta(DE3)中成功诱导蒺藜苜蓿ARR9蛋白表达,融合蛋白大小在25kD左右,Western Blot证实ARR9蛋白表达成功。蒺藜苜蓿ARR9基因在根中表达量最高,其表达受ABA的抑制,受IAA的短期(2~12h)抑制。

白洋淀区域古代城市形态及其影响因素研究

白洋淀区域在历史发展过程中形成了一系列历史底蕴深厚、形态丰富的历史城镇,对其形态特征与影响因素进行研究,可以为建设雄安新区提供科学参考。本文收集明、清、民国、建国后的古地图、地方志等历史文献,综合使用形态学和类型学方法,对白洋淀区域及其周边范围内的古代城市进行考察,对其形态特征进行归纳。进一步,作者从军事防御因素、礼制和自然互动因素、水利工程的技术与文化因素3个方面讨论其空间形态的影响因素。

紫花苜蓿ARR基因克隆及转化

细胞分裂素响应调节因子ARRs(Arabidopsis response regulators)在细胞分裂素的信号转导过程中发挥极为重要的作用。紫花苜蓿(Medicago sativa)作为一种重要的多年生优质牧草植物,在我国草产业中地位显著,越来越受到科研工作者的关注。为研究紫花苜蓿ARR基因功能,采用RT-PCR技术成功克隆ARR基因。采用农杆菌(Agrobacterium tumefacien)转化法将成功构建的3302-ARR-3Flag植物表达载体导入野生型紫花苜蓿,并成功获得9株紫花苜蓿转基因植株。与野生型相比,转基因紫花苜蓿分枝数多,复叶数目异常,为深入研究ARR基因功能提供原始实验材料。

清康乾时期白洋淀水利营建研究

白洋淀是清代京畿水利安全的关键所在和帝王国家巡游体系的重要组成部分,康雍乾时期是古代白洋淀开发建设的高潮,其治理工程对白洋淀目前的水利条件和聚落环境有着诸多深远的、直接的影响。文中分析了康乾时期白洋淀水利营建的历史经验,探讨了水利营建对人居环境体系的影响,以期为如今雄安新区建设和白洋淀治理提供借鉴和参考。