缺氧诱导因子-1在肝内胆管癌中的表达及其与血管内皮生长因子和微血管密度的关系

目的探讨肝内胆管癌组织中缺氧诱导因子-1(HIF-1α)的表达及其与VEGF的表达、微血管密度(MVD)及临床病理因素之间的关系。方法采用免疫组化方法检测56例胆管癌及20例癌旁正常肝内胆管中HIF-1α、VEGF的表达,用CD34单克隆抗体标记血管内皮细胞并计数MVD,分析其间的相关性及其与肿瘤临床病理特征之间的相关性。结果肝内胆管癌组织中HIF-1α和VEGF的阳性表达率显著高于正常组织(P<0.05);HIF-1α和VEGF的表达均与淋巴结转移和TNM分期呈正相关(P<0.05);HIF-1α的表达与VEGF的表达和MVD值呈正相关(P<0.05)。结论HIF-1α在胆管癌组织中明显上调,与肿瘤血管生成、肿瘤转移及预后密切相关;提示检测HIF-1α可能成为判断胆管癌生物学行为及预后的重要指标,并作为临床控制胆管癌的作用靶点。

兔肝细胞的脾脏移植和定位初步研究

【目的】探讨肝细胞体内移植的途径和定位分析。【方法】从新西兰白兔的肝脏中分离获得原代肝细胞，经纯化培养后经脾动脉插管或注射移植到脾脏，在不同时间注射肝细胞特异性增强剂（扎贝葡胺），观察移植后脾脏核磁信号的变化和移植肝细胞的存活，并分析细胞移植前后肝功能变化。【结果】肝细胞移植入脾脏一段时间后受损肝功能明显改善。脾脏内可见肝细胞信号，d，信号最强，以后逐渐衰退并持续14d以上。【结论】肝细胞脾内移植是可行的；应用肝细胞增强剂进行MRl分析可成为肝细胞移植无创伤检测手段。

茶多酚对缺氧诱导的胆管癌细胞QBC939增殖及凋亡的影响与机制

目的建立缺氧模型,观察EGCG对缺氧诱导的QBC939胆管癌细胞增殖、凋亡与转移的影响及其与VEGF表达的关系。方法 QBC939低氧培养,MTT观察EGCG对缺氧诱导的胆管癌细胞增殖的影响,过河实验观察EGCG对缺氧诱导的胆管癌细胞迁移的影响,用流式细胞术观察缺氧对细胞周期和细胞凋亡率的影响,利用ELISA观察缺氧诱导对胆管癌细胞VEGF表达的影响。结果 EGCG呈浓度和时间依赖性抑制缺氧诱导的胆管癌增殖;缺氧胆管癌细胞过河时间为(15.2±0.94)h,较常氧组(23.1±2.14)h显著缩短,EGCG(40、80和160μmol/L)使缺氧胆管癌细胞过河时间显著延长([24.1±2.34)、(36.7±3.27)和(47.8±3.04)h];缺氧胆管癌细胞经EGCG(40、80和160μmol/L)处理后,G1期细胞和凋亡率显著增加,同时伴有S期和G2期细胞减少;缺氧诱导组VEGF表达量为(2 515.2±190.1)Pg/mL,EGCG(40、80和160μmol/L)处理组,VEGF合成显著下降([2 419.8±231.7)、(1 736.7±203.2)和(935.7±125.4)Pg/mL]。结论 EGCG可抑制胆管癌细胞的增殖与迁移,其机制与下调VEGF表达有关。

湖南乡村医生现状及培训需求调查

【目的】了解湖南省乡村医生队伍的现状及存在的问题。为进一步完善发展乡村医生队伍提供依据。【方法】对湖南省郴州市安仁县的四个乡的14个村；常德市澧县四个乡的14个村的71名乡村医生进行现场问卷调查。【结果】71名被调查的乡村医生中，男女比例为8：1；31～50岁以上的乡村医生占84．5％；中专学历占84．5％；取得执业医师或助理执业医师资格的占33．8％；以西医方式行医占59．1％；诊治最多的疾病为普通感冒的乡村医生占64．7％；最近三年参加过相关免费培训的占51．2％。【结论】目前乡村医生学历低、业务水平低、执业资格率低及年龄偏高的现象值得重视，加强对乡村医生的培训，提高其执业水平对农民群众的健康有着重要的意义。

CGRP预培养对肝细胞冻存损伤的保护作用及机制

【目的】探讨降钙素基因相关肽（CGRP）预培养对冻存肝细胞的保护作用与机制。【方法】外科切除肝组织分成5组：①对照组（DMEM预培养0h）；②标准预培养组（DMEM预培养8h）；③CGRP三个浓度预培养组（10^-6mol／L，10^-7mol／L，10^-8mol／L；8h）。采用胶原酶灌注法分离肝细胞，经预培养后冻存5周，复苏，台盼蓝检测新鲜分离肝细胞成活率，并体外培养肝细胞48h，用MTT法观察肝细胞活力，收集细胞培养上清检测谷白蛋白（Alb），乳酸脱氢酶（LDH）水平，检测肝细胞内活性氧（ROS）及丙二醛（MDA）含量。【结果】预培养组及各CGRP（10^-6，10^-7，10^-8）处理组细胞成活率（53±5，63±6，61±6，58±7）、Alb合成（4．8±0．6，6．5±0．7，5．8±0．7，4．9±0．6）及MTT活性（0．25±0．07，0．38±0．06，0．31±0．05，0．22±0．03）较对照组（46±7，3．9±0．6；0．11±0．01）显著增加（P〈O．05），且CGRP（10^-6，10^-7）处理组细胞成活率、Alb合成及MTT活性显著高于预培养组（P〈0．05）；预培养组及各cGRP（10^-6，10^-7，10^-8）处理组肝细胞复苏后48h内LDH释放（25±7，15±4，17±5，18±6），ROS释放（107士9．5，62±4．8，70±7．1，80±5．8）及MDA水平（0．87±0．1，0．70±0．06，0．76±0．07，0．80±0．07）较对照组（31±6，120±8．5，1．31±0．04）显著减少（P〈O．05），且与预培养对照组比较，CGRP（10^-6，10^-7，10^-8）各处理组LDH及ROS释放显著减少（P〈0．05），CGRP（10^-6，10^-7 。）处理组MDA释放显著减少（P〈0．05）。【结论】cGRP预培养对冻存引起的肝细胞损伤具有保护作用，其机制与抗氧化应激损伤有关。

炎症介质谱联合降钙素原在尿源性脓毒血症中的诊断价值

目的评估炎症介质谱联合降钙素原在输尿管结石并发尿源性脓毒血症中的诊断价值。方法收集湖南省人民医院2017年6月至2022年6月行炎症因子试剂盒检测的160例输尿管结石患者临床资料,研究组66例(输尿管结石术后发生尿源性脓毒血症患者),对照组94例(输尿管结石术后未发生尿源性脓毒血症患者)。分析两组患者的临床资料、围手术期生化指标的差异,采用多因素Logistic回归分析引起尿源性脓毒血症的相关危险因素。结果研究组术前血浆中IL-4、IL-6、IL-10、TFN-α、IFN-γ、CRP、PCT指标明显高于对照组,两组之间差异有统计学意义(P<0.05);研究组术后血浆中炎症介质谱、CRP、PCT指标均高于对照组,两组之间差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示:术前PCT和IL-6升高是输尿管结石术后尿源性脓毒血症的危险因素。结论IL-6和PCT升高是输尿管结石术后发生尿源性脓毒血症的重要预测指标。

兔不同急性肝衰竭模型的建立与评价

目的:探讨一种理想的急性肝衰竭(AHF)模型建立方法。方法:36只实验兔随机分为3组:①改良药物手术诱导组(A组,n=12),先用D-氨基半乳糖(D-Galn)和脂多糖(LPS)腹腔注射,同时加用乳果糖,注射后2h以氟烷作为麻醉剂,切除约50%肝脏组织,术中经肝静脉注入5%葡萄糖氯化钠溶液10ml/kg体重;②传统手术诱导组(B组,n=12),切除约95%肝脏组织,术中不行肝静脉穿刺注射5%葡萄糖氯化钠溶液;③药物诱导组(C组,n=12),用D-氨基半乳糖(D-Galn)和脂多糖(LPS)一次性腹腔注射。比较建模死亡率、建模后24h兔存活率、血谷丙转氨酶(ALT)、血氨(NH3)、总胆红素(TB)和血糖(BS)。结果:B组手术死亡率高于A组死亡率(41.77%vs0%),A组、B组兔建模成功后24h存活率及C组兔建模成功后72h存活率分别为0%,0%,25%,A组ALT和NH3水平显著高于C组(P<0.05),TB和BG水平低于C组,但差异无显著性。结论:通过改进的50%肝切除术可建立较理想的兔AHF模型,以氟烷作为麻醉剂,药物诱导注射同时加用乳果糖,术中经中叶肝静脉注入5%葡萄糖氯化钠溶液可减少手术死亡率。

CGRP对内皮素-1诱导肝细胞损伤的保护作用

目的探讨内皮素1(ET-1)对人肝细胞的损伤作用及降钙素基因相关肽(CGRP)的保护作用与机制。方法外科切除肝组织分为:正常对照组(D-Hanks液灌注);ET-1(10-7M)灌注损伤组;CGRP(10-6M,10-7M,10-8M)干预组。采用胶原酶灌注法分离肝细胞,检测肝组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)及丙二醛(MDA)含量,台盼蓝检测新鲜分离肝细胞成活率,并体外培养肝细胞。用MTT法观察肝细胞活力,收集细胞培养上清检测谷丙转氨酶(ALT)、白(清)蛋白(Alb),尿素(Urea)和乳酸脱氢酶(LDH)水平。结果与对照组比较,ET-1组肝细胞成活百分率及活力,ALB合成及Urea代谢显著减低(P<0.05);肝组织中TNF-α及MDA含量,LDH及ALT释放增加(P<0.05);而CGRP(10-6M,10-7M,10-8M)能显著减轻ET-1诱导的肝细胞损伤,使肝细胞成活率及活力、Alb分泌及Urea代谢均显著增加(P<0.05),使LDH及ALT,TNF-α及MDA显著减少(P<0.05)。结论CGRP对ET-1诱导的肝细胞损伤具有保护作用,其机制与MDA和TNF-α释放减少有关。

湖南省农村卫生适宜技术推广培训情况调查分析

目的 通过对湖南省农村卫生适宜技术培训人员数据库中收录的2370名参加培训人员的调查数据进行统计分析,了解和掌握农村卫生适宜技术的推广培训情况,以探索适合湖南省农村医疗卫生机构的适宜技术推广培训模式.方法 采用SPSS 12.0软件对湖南省农村卫生适宜技术培训人员数据库中收录的2370名参加培训人员的调查数据进行统计分析.结果 湖南省参加培训人员学历及技术职称总体构成较低,以中专学历（57.55%）和初级职称（47%）为主,仅8.82%具有本科及以上学历,仅21.2%具有中级以上职称;73.9%的人认为适宜技术较适用或很适用;通过本项目培训后,40.8%的人能熟练应用本技术,较培训前有显著提高（χ2=788.27,P〈0.01）;99.3%的人认为需要培训,且48.9%的人认为需要进行再培训.结论 本项目培训推广的农村卫生适宜技术难易度适中,适用于大多数农村卫生技术人员,具有很高的培训需求度,培训后相关卫生技术人员对适宜技术的熟练应用程度得到了显著提高.