何首乌饮介导DNMT1调控DNA甲基化促进大鼠Leydig细胞功能

为探讨何首乌饮介导基因表观遗传(DNA甲基化)的改变对大鼠睾丸间质细胞(Leydig)分泌睾酮的影响,选用12、18月龄Wistar雄性大鼠睾丸组织,甲基化芯片筛选出受何首乌饮调控并与精子发生功能密切的基因AXL、Ttc29、wnt2b、MAPK10、C-myb,甲基化特异性PCR(MSP)与实时荧光定量PCR(RTqPCR)技术检测基因甲基化水平及mRNA表达水平;BrdU荧光染色观察细胞增殖情况;慢病毒转染敲低Leydig细胞DNMT1,分析wnt2b、C-myb甲基化程度和睾酮分泌水平是否受DNMT1影响.结果显示:何首乌饮可调控衰老大鼠睾丸组织中关键基因DNA甲基化和mRNA水平,促进细胞增殖和睾酮分泌;敲低Leydig细胞DNMT1后,细胞分泌睾酮水平降低,同时wnt2b和C-myb DNA甲基化水平也明显下降.这表明何首乌饮可能介导基因DNA甲基化程度促进大鼠Leydig细胞分泌睾酮,进而提高生精功能.

复方太岁口服液体内外抗肿瘤及免疫调节作用

为探讨复方太岁口服液(compound Taisui oral liquid,CTOL)体内外抗肿瘤及对免疫功能的调节作用,体外采用MTT法检测不同浓度CTOL对SGC7901和Hela细胞增殖的抑制作用,体内制备S180荷瘤小鼠模型,实验分为模型组、CTX组、CTOL低剂量组、CTOL高剂量组、CTOL低剂量+CTX组、CTOL高剂量+CTX组.CTX采用腹腔注射给药,CTOL采用灌胃方式给药,连续给药6周后处死小鼠,称取瘤质量和脾质量,计算抑瘤率和脾指数,ELISA法检测血清IL-2和IFN-γ水平.结果显示:不同浓度CTOL对SGC7901和Hela细胞均有抑制作用,且呈剂量依赖关系.体内各实验组瘤质量均明显低于模型组(P<0.05),其中CTOL高剂量+CTX组的抑瘤率最高为70.90%;CTOL低、高剂量+CTX组的脾指数、IL-2、IFN-γ水平均明显高于CTX组(P<0.05).由此可得:CTOL在体内外均可抑制肿瘤的生长,并可改善CTX导致的脾脏损伤及促进IL-2和IFN-γ的分泌.

六味地黄丸抑制巨噬细胞激活抗肾纤维化实验研究

目的研究六味地黄丸对单侧输尿管结扎(Unilateral ureteral obstruction,UUO)致肾纤维化过程中巨噬细胞激活的影响。方法 24只C57BL/6小鼠随机分为假手术组(8只)和结扎组(16只),结扎小鼠随机分为模型组和六味地黄丸组,每组8只。造模开始给予六味地黄丸(0.617 1g/kg)灌胃给药至2周末,实验结束留取肾组织样本,检测肾组织病理学。免疫组化检测平滑肌肌动蛋白(Alpha-sooth muscle actin,α?SMA)和人磷酸化信号转导分子-2(p-Smad2),以及肾组织F4/80表达。实时定量PCR测定TNF?αmRNA表达,Western blot检测趋化因子11(Chemokine(C-X-C motif)ligand,CXCL11)和CD68蛋白表达。结果 UUO造模2周肾脏间质纤维化形成,六味地黄丸显著抑制肾纤维化形成。假手术组α?SMA表达较低,模型组α?SMA染色阳性表达显著增强,主要分布在肾小管上皮细胞和增宽的肾间质;与模型组相比,六味地黄丸组α?SMA表达显著降低。假手术组F4/80表达较低,UUO造模2周,F4/80表达显著升高,促炎症因子及趋化因子等表达显著升高,而六味地黄丸显著抑制F4/80及促炎症因子和趋化因子表达。结论六味地黄丸显著抑制巨噬细胞激活可能是其有效抑制肾纤维化的作用机制,为其治疗肾纤维化提供基础依据。

六味地黄丸抑制巨噬细胞激活抗肝纤维化作用机制研究

目的观察六味地黄丸对四氯化碳(CCl4)小鼠肝纤维化过程中巨噬细胞激活的影响。方法每周3次腹腔注射CCl_4共6周制备肝纤维化模型,六味地黄丸在CCl_4造模同时灌胃给药。免疫荧光检测α-SMA表达,免疫组化检测巨噬细胞标志物CD68表达,qPCR检测α-SMA、TNF-α、IL-1β、MCP1、CXCR3表达,Western blot检测α-SMA、MCP1和CXCR3。结果造模6周,α-SMA表达显著升高(P<0.01),六味地黄丸显著抑制α-SMA表达(P<0.01);CCl_4造模后CD68主要分布在纤维间隔呈强阳性表达;与正常组相比,模型组TNF-α、IL-1β、MCP1、CXCR3表达显著升高(P<0.01);与模型组相比,六味地黄丸显著降低CD68及促炎症因子、趋化因子的表达(P<0.01)。结论六味地黄丸对CCl_4肝纤维化过程中的巨噬细胞激活有显著抑制作用。

辛散温化法治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期疗效观察

目的:观察辛散温化法治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期临床疗效。方法:将300例慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者随机分为2组各150例。对照组应用抗生素、激素、平喘药物配合吸氧治疗;治疗组在对照组基础上加用小青龙汤。并予小青龙汤超声雾化吸入。疗程均为14天。结果:总有效率治疗组90.0%,对照组80.0%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05),治疗组疗效明显优于对照组。2组咳嗽、咳痰量、气喘、肺部啰音治疗前后比较,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗后,治疗组各项指标与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:辛散温化法治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期临床疗效好,并可显著改善临床症状。

彩色多普勒超声早期诊断剖宫产瘢痕妊娠32例分析

选取2005-01-2011-03期间要求终止妊娠的32例患者,运用彩色多普勒超声检查。32例中确诊的28例,诊断符合率87.5%,误诊4例,误诊率12.5%。总结如下。

Wnt信号通路抑制参与运动训练对自发性高血压大鼠心脏的保护作用

本文旨在探讨低中强度运动训练对自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)心脏的保护作用,以及Wnt信号通路在其中所起的作用。SHR和正常血压WKY(Wistar-Kyoto)大鼠随机分为高血压对照组(SHR-S)、高血压运动组(SHR-E)、正常血压对照组(WKY-S)、正常血压运动组(WKY-E)和高血压运动+Wnt激动剂组(SHR-E-Wnt)。运动组大鼠进行16周低中强度游泳运动,SHR-E-Wnt组大鼠在游泳结束前4周尾静脉注射Wnt通路激动剂Wnt agonist 1,每周测定大鼠动脉血压。运动结束后,超声心动图测定左心室壁厚度和射血功能、HE染色和Masson染色观察心肌结构和胶原纤维变化,实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot分别检测左心室心肌β-连环蛋白(β-catenin)和DVL-1(Dishevelled-1)mRNA和蛋白表达。结果显示:与WKY-S大鼠相比较,SHR-S大鼠体重下降(P<0.05),动脉血压明显升高(P<0.01),心脏重量和室壁厚度明显增加(P<0.01)、左室射血功能明显减弱(P<0.05),心肌结构受损和胶原纤维明显增多,左室β-catenin和DVL-1的mRNA和蛋白表达明显上调(P<0.01)。与SHR-S大鼠相比较,SHR-E大鼠体重未见明显改变,而动脉血压明显下降(P<0.01),心脏重量和室壁厚度明显减小、射血功能明显增强(P<0.01),心肌结构损伤明显改善、胶原纤维明显减少,左室β-catenin和DVL-1的mRNA和蛋白表达明显下调(P<0.01)。此外,运动训练对SHR的降压和心脏保护作用可被Wnt信号通路激动剂所消除。上述结果表明,低中强度运动训练对SHR心脏具有保护作用,此作用可能通过抑制Wnt信号通路实现。