海南省与云南省两地微小按蚊杂交试验

目的： 观察海南省与云南省两地微小按蚊之间是否存在种间差异。方法： 在两地牛房采集微小按蚊，单雌驯养繁殖， 用强迫交配方法进行杂交试验， 观察 Ｆ１ 代的可育性。制作杂种 Ｆ１ 卵巢营养细胞多线染色体标本， 观察染色体各区域的联会情况。结果： 云南省微小按蚊（ Ｙ） ♀×海南省微小按蚊（ Ｈ） ♂杂交组卵孵化率为０ ， 卵内无胚胎形成。（ Ｈ♀× Ｙ♂） Ｆ１ 各回交组中， 大多数卵孵化率显著低于亲本。（ Ｈ♀× Ｙ♂） Ｆ１ 雌蚊卵巢营养细胞多线染色体３ Ｒ 的２９ 区、３６ 区及３７ 区， Ｘ 性染色体的４ 区和６ 区出现恒定不联会。结论： 海南省与云南省两地微小按蚊已出现明显生殖隔离， 系两个不同的亲缘种。

海南与广西两地微小按蚊杂交试验

目的 :观察海南微小按蚊与广西微小按蚊之间是否存在生殖隔离。方法 :在海南与广西两地分别采集微小按蚊 ,实验室中建立单雌繁殖线 ,用人工交配方法进行杂交试验 ,观察后代雌蚊的可育性 ;按 Coluzzi方法制备杂种 F1 代雌蚊卵巢营养细胞多线染色体标本 ,观察各区带的联会情况。结果 :各交配组的后代均显示可育 ;杂种 F1 代雌蚊的卵巢营养细胞多线染色体各区正常联会。结论 :海南微小按蚊与广西微小按蚊之间不存在生殖隔离 。

桂南与桂北微小按蚊杂交试验

通过杂交试验，发现桂南与桂北两地微小按蚊杂种后代均可育，杂种Ｆ１卵巢营养细胞多线染色体呈联会状态。证明桂南与桂北两地微小按蚊之间不存在生殖隔离。

广西、海南、云南微小按蚊3种同工酶谱比较研究

目的 探索我国微小按蚊复合体同工酶谱鉴别指标。 方法 选择广西微小按蚊 (A .m .G)、海南微小按蚊(A .m .H)和云南微小按蚊 (A .m .Y)的单雌线雌蚊匀浆 ,采用不连续性聚丙烯酰胺凝胶垂直板状电泳法分离 ,特异性底物染色 ,比较观察乳酸脱氢酶 (LDH)、醇脱氢酶 (ADH)和酯酶 (EST) 3种同工酶谱。 结果 三地微小按蚊的LDH同工酶谱相同 ,均具 1条Rm14酶带 ;ADH酶谱中三地微小按蚊均显一条酶带 ,A .m .G与A .m .H具相同酶带Rm 3 4,而A .m .Y则是 1条Rm 40酶带 ;EST的主带谱A .m .G与A .m .H基本相似 ,前者显示Rm18、3 5和 61,后者显示Rm18、3 5、5 9和 61。而A .m .Y明显不同于A .m .G和A .m .H ,显示Rm18、3 9、43、5 0、5 6和 5 9六条主带。 结论 ADH和EST同工酶谱在不同种的微小按蚊中存在明显差别 ,可能在区别我国微小按蚊姐妹种中有较大的应用价值。

元江县微小按蚊卵巢营养细胞多线性染色体观察

云南省元江县采集的微小按蚊分别单只雌蚊驯养,解剖分离卵巢营养细胞,染色后光镜观察、记录染色体图谱。经观察365个卵巢多线染色体标本。其染色体由5臂共3条染色体组成:Ⅰ号染色体为具端着丝点的性染色体(X染色体),仅见一臂;Ⅱ号为1对具亚中着丝点的常染色体,分右臂(2R)和左臂(2L);Ⅲ号为1对具中着丝点的常染色体,含右臂(3R)和左臂(3L)。与广西微小按蚊卵巢营养细胞多线染色体比较,发现有12处差异。

凌云微小按蚊与元江微小按蚊杂交试验

目的:观察广西凌云微小按蚊与云南元江微小按蚊之间是否存在生殖隔离。方法:分别在两地的牛房采集胞血的微小按蚊,在实验室单雌驯养2代,用人工交配方法进行杂交试验,观察子1代(F1)的可育性。结果:Y×L组的产卵率极低,卵的孵化率为0,卵内未见胚胎形成,显示不育。Y×F1的孵化率、化蛹率均明显低于亲本,可育性低。结论:广西凌云微小按蚊与云南元江微小按蚊已存在部分生殖隔离,系两个不同的亲缘种。

第七次全国人体寄生虫学教学改革与课程建设研讨会会议纪要

2013年7月29日，主题为“现代化进程中的寄生虫学发展”的第七次全国人体寄生虫学教学改革与课程建设研讨会在广西南宁召开。本次会议由广西医科大学基础医学院承办，来自全国45个高等医学院校的140名代表出席了会议。

p73 OD区基因的克隆与表达

目的：获取p73OD（oligomerization domain）区重要功能蛋白。方法：应用多聚酶联反应扩增目的基因，把目的基因插入质粒PET-29a（＋），构建成C末端含6个组氨酸的重组体，原核细胞表达并通过镍离子-多聚组氨酸亲和法纯化该目的蛋白。结果：成功构建p73（344-382）-PET-29a（＋）重组体；该重组体在大肠杆菌BL21（DE3）中高度表达；纯化后的p73（344-382）蛋白质形成四聚体，在磷酸盐缓冲液（PBS）、Bis—Tris和洗脱缓冲液中性质稳定。结论：p73（344-382）构建在PET-29a（＋）中有融合蛋白情况下才得到高度表达。获得较纯的p73（344～382）蛋白。

桂林市不同人群人芽囊原虫感染的流行病学调查分析

目的了解桂林市不同人群中人芽囊原虫感染情况,为制定干预措施提供依据。方法采用自行设计调查表、分层整群抽样调查的方法,收集1 603例不同人群当日新鲜粪便,用改良酸醚离心沉淀法处理后在显微镜下观察。结果桂林市人芽囊原虫检出率为10.98%,人群感染率以15～<25岁组最高(13.35%),女性高于男性(分别为14.58%、8.44%),少数民族高于汉族,市郊高于市区(分别为14.16%、8.69%),经统计学处理,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论加强初级卫生保健工作,针对不同人群特点开展卫生宣传教育,提高自我保健意识,以预防和控制人芽囊原虫感染的发生。

广西在校大学生人芽囊原虫分离株基因型的初步研究

为了解广西在校大学生人芽囊原虫分离株基因型构成,于2012年收集53例广西医科大学人芽囊原虫感染者粪便,分离虫体,经体外培养后抽提基因组DNA,用已知的7对STS引物进行PCR扩增。结果显示,53株人芽囊原虫分离株中共发现5种已知基因型。其中,1型(351 bp)4株,占7.6%;3型(526 bp)17株,占32.1%;4型(338 bp)4株,占7.6%;6型(317 bp)1株,占1.9%;7型(487 bp)5株,占9.4%。未见基因2型、5型和混合基因型。22株无特异性条带出现,初步认定为未知基因型。

广西10例人芽囊原虫基因型和同工酶谱的研究

目的分析广西10个人芽囊原虫(Blastocystis hominis)分离株基因型,及其乳酸脱氢酶(LDH)和酯酶(EST)的同工酶谱特征。方法从感染者粪便中分离到的10个人芽囊原虫(BhGX1～BhGX10),体外培养并提取基因组DNA。用已知的7对特异性序列标记位点(sequene tagged sites,STS)引物PCR扩增,来鉴定基因型。采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),分别进行乳酸脱氢酶和酯酶2种同工酶染色,比较分析10个分离株的酶谱。结果 10个人芽囊原虫分离株中有8个为基因Ⅰ型;另外2个分离株(BhGX4和BhGX7)经7对引物扩增均为阴性,为未知基因型。10个人芽囊原虫分离株在LDH谱中共出现10条酶带,常见酶带为Rm37、Rm49、Rm57、Rm68和Rm92;在EST谱中共出现12条酶带,其中Rm14、Rm18、Rm23、Rm27、Rm45、Rm50和Rm77酶带较常见。各分离株之间的LDH和EST同工酶谱均存在差异。结论广西10个人芽囊原虫分离株以基因Ⅰ型为主,但各分离株之间的LDH和EST同工酶谱存在差异。

巴马瑶族自治县人芽囊原虫感染情况调查

为了解桂西北地区巴马瑶族自治县不同人群人芽囊原虫感染情况,于2011年12月随机抽取巴马瑶族自治县5个行政村(巴马镇盘当村、凤凰乡德纳村、西山乡福厚村、燕洞乡龙威村和甲篆乡兴仁村)为调查点,收集当地居民的新鲜粪便497份,采用改良酸醚离心沉淀法,镜检定性诊断,分析不同调查点、性别、职业、年龄和民族人群芽囊原虫感染情况。结果显示,调查的497人中,人芽囊原虫感染者215例,总感染率为43.3%(215/497)。不同调查点中,巴马镇盘当村的感染率最高,达55.7%(68/122),明显高于其它行政村(P<0.05),其余4行政村的感染率间差异无统计学意义(P>0.05);不同性别、职业、年龄和民族间的感染率差别均无统计学意义(P>0.05)。

广西医科大学在校大学生人芽囊原虫感染情况调查

目的:了解广西医科大学在校大学生人芽囊原虫(Blastocystis hominis,B.h)的感染情况。方法:应用酸醚离心沉淀法粪检,抽查3个年级共1 433人,统计分析民族、性别、生源地、不同年级组别之间B.h感染率。结果:广西医科大学在校大学生B.h平均感染率为14.93%;汉族感染率13.48%,壮族感染率18.38%,其他民族感染率为17.24%。各年级感染率最低为13.19%,最高达16.28%。男性感染率为14.74%;女性感染率为15.06%。广西本地生源感染率为15.06%;外地生源感染率为13.94%。结论:广西医科大学在校大学生B.h感染率较高,并且存在校内感染的可能性。壮族学生B.h感染率高于汉族。

广西、海南和云南三地微小按蚊DNA的限制酶切片段长度多态性分析

目的 :探讨广西、海南和云南三地微小按蚊之间的基因差异。方法 :从三地单雌线蚊虫提取 DNA,然后分别用 Ava I、Bam HI、Pst I、Bgl I、Hinf I和 Hae 6种限制性核酸内切酶消化 ,进行琼脂电泳分析。结果 :三地微小按蚊的 Ava I、BamHI和 Pst I酶切区带有差异 ,Bgl I的酶切区带完全相同 ,而 Hinf I和 Hae 两种酶不显区带。结论 :三地微小按蚊有基因结构差异 ,Ava I、 Bam HI和 Pst I

刚地弓形虫SAG4基因的体外扩增及序列分析

目的:扩增刚地弓形虫R.H株SAG4基因,对SAG4基因编码序列进行结构和初步的功能预测。方法:提取弓形虫R.H株基因组DNA,然后进行目的基因的PCR体外扩增、序列测定和分析。结果:从弓形虫R.H株基因组DNA中扩增出575bp的基因片断,利用生物信息学技术鉴定其为R.H株SAG4基因分子片段,转译后的蛋白质结构稳定,能形成多个结构域。结论:成功地获得了刚地弓形虫R.H株SAG4基因片段,为弓形虫病的抗原诊断及分子疫苗研究奠定基础。

桂、琼、滇三地微小按蚊苹果酸脱氢酶和碱性磷酸酶同工酶谱比较研究

目的 :对桂、琼、滇三地微小按蚊两种同工酶谱进行比较 ,寻找简便、快速、敏感的生化分类指标。方法 :选取三地单雌线雌蚊制成匀浆液 ,经浓度梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳 (CG- PAGE)后 ,分别进行苹果酸脱氢酶 (MDH)和碱性磷酸酶(AKP)同工酶显色和比较分析。结果 :MDH同工酶 :三地微小按蚊均显 Rm 6、 2 5、 70、 10 0四条区带 ,酶谱相同 ;AKP同工酶 :桂、琼微小按蚊显 Rm6 6、 76、 10 0三条区带 ,而滇微小按蚊出现 Rm71、 10 0两条区带 ,与前二者存在较大差异。结论 :三地微小按蚊具有密切的亲缘关系 ,滇微小按蚊可能存在遗传分化 ,AKP同工酶具有鉴别意义。