IL-1β促进肺癌细胞增殖的作用机制研究

目的:研究IL-1β在巨噬细胞促进肺癌细胞增殖的作用机制。方法:采用Transwell插入式细胞培养皿共培养人肺癌细胞株A549、NCI-H520细胞和巨噬细胞。Brd U-ELISA法检测巨噬细胞对肺癌细胞的增殖能力。采用Real-time PCR法检测巨噬细胞和A549、NCI-H520细胞中IL-1βmRNA的表达。应用IL-1β的中和抗体抑制IL-1β的活性,观察IL-1β在巨噬细胞促进肺癌细胞增殖中的作用。利用Western blot法检测肺癌细胞中自噬标志物Beclin 1的表达。结果:Brd UELISA检测结果:A549细胞与巨噬细胞以1∶0.5的比例共培养,A549细胞的OD值从(0.41±0.06)增加到(1.13±0.10),差异有统计学意义(P<0.05),且A549细胞的OD值随共培养巨噬细胞比例的增加而升高(P<0.05)。NCI-H520细胞与不同浓度的巨噬细胞共培养后,NCI-H520细胞的OD值变化趋势与A549细胞相似。Real-time PCR法检测结果:在共培养后,巨噬细胞中IL-1βmRNA的表达显著上调,且有时间依赖性,并显著高于肺癌细胞中的表达。加入IL-1β中和抗体后,Brd U ELISA法检测的细胞增殖,结果显示IL-1β中和抗体可明显抑制巨噬细胞对肺癌细胞A549和NCI-H520的增殖促进作用。Western blot法检测结果显示IL-1β可显著抑制肿瘤细胞Beclin 1的表达。结论:巨噬细胞和肺癌细胞通过增强IL-1β的表达促进肿瘤细胞的增殖。抑制肿瘤细胞的自噬可能是IL-1β促进肺癌发展的作用机制。

细胞色素P450 1A1基因多态性与宫颈癌的相关性

目的探讨细胞色素P450 1A1(cytochrome P4501A1,CYP 1A1)基因MspⅠ酶切位点多态性及Ile/Val多态性与宫颈癌遗传易感性的关系。方法采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-restriction fragment length plogymorphism,PCR-RFLP)和等位基因特异性PCR(allele-specific PCR,as-PCR)检测宫颈癌患者(病例组,n=176)和同期体检女性健康人群(对照组,n=112)CYP1A1基因MspⅠ酶切位点多态性和Ile/Val多态性。结果比较病例组和对照组CYP1A1基因MspⅠ酶切位点基因型及等位基因T和C频率分布,差异无统计学意义(P=0.09);比较两组间CYP1A1 Ile/Val多态性发现,病例组3种基因型Ile/Ile、Ile/Val、Val/Val频率分布分别为19.3%、68.8%、11.9%,等位基因Ile、Val频率分布分别为53.7%、46.3%,与对照组比较差异有统计学意义(P=0.04)。结论细胞色素CYP1A1基因MspⅠ位点多态性与宫颈癌发病易感性无关联性,CYP1A1基因Ile/Val多态性与宫颈癌发病易感性有关联性。

综合性、设计性生物技术实验教学效果的调查与思考

为了更好地了解综合性、设计性生物技术实验的教学效果,对生物科学系学生开设分子生物学实验教学的情况进行问卷调查,系统分析综合性、设计性实验教学的效果及不足之处。为了提高综合性、设计性实验的效果,采取实验室开放,提高综合性、设计性实验指导教师的素质及综合性、设计性实验选题多样化等措施,可以进一步地改善与提高实验的教学效果。

miR-218对新藤黄酸抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖作用的影响及机制研究

目的研究miR-218对新藤黄酸抑制人宫颈癌He La细胞增殖作用的影响及其可能的分子机制。方法人宫颈癌He La细胞转染过表达真核表达载体pmiR-218,real-time PCR检测He La细胞miR-218的表达。将He La细胞分为空白对照组、新藤黄酸组、pmiR-218组、质粒对照组、新藤黄酸联合pmiR-218组。MTT法检测各组细胞增殖;流式细胞仪检测各组细胞凋亡;Western blot检测Bcl-2、Bax、E-cadherin表达;real-time PCR检测Bcl-2、Bax和E-cadherin的mRNA表达水平。结果 miR-218真核表达载体pmiR-218转染He La细胞后,细胞内miR-218表达水平明显增加(P<0.05)。miR-218可提高He La细胞对新藤黄酸的敏感性,高表达miR-218能促进新藤黄酸对He La细胞的增殖抑制作用,促进细胞凋亡,下调新藤黄酸对He La细胞Bcl-2/Bax蛋白的表达水平。结论 miR-218可提高He La细胞对新藤黄酸的敏感性,miR-218能增强新藤黄酸对He La细胞增殖抑制作用,并促进He La细胞凋亡,其作用机制可能与下调Bcl-2/Bax的表达有关。

脂肪酸结合蛋白、载脂蛋白E基因多态性与2型糖尿病并发冠心病的关系

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者脂肪酸结合蛋白(FABP2)及载脂蛋白E(ApoE)与冠心病(CHD)的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-PFLP)技术分别检测T2DM并发CHD组及T2DM非CHD组FABP2、ApoE基因型,并检测T2DM并发CHD组不同等位基因携带者血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HLD-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。结果T2DM并发CHD组FABP2A/T突变频率高于非冠心病组(P<0.05),T等位基因携带者与A等位基因携带者相比TG、TC、LDL-C浓度升高,血HDL-C浓度降低,有显著性差异(P<0.05);T2DM并CHD组ε4等位基因频率明显高于对照组(P<0.01),ε4等位基因携带者与ε3等位基因携带者相比TC、LDL-C浓度升高,HDL-C浓度降低,差异有统计学意义(P<0.05),FABP与ApoE基因连锁分析,FABP2T基因和ApoEε4基因连锁时,T2DM并发CHD的几率增加(P<0.05)。结论FABP2T基因及ApoE/ε4等位基因增高T2DM并发CHD的遗传易感性。

新藤黄酸对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡、迁移的影响及机制研究

目的:研究新藤黄酸对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡、迁移的影响及其机制。方法:不同浓度新藤黄酸(0.00、0.63、1.25、2.50、5.00、10.00 mg/L)作用于HeLa细胞72 h,MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期;荧光显微镜和DNA ladder检测细胞凋亡;Transwell实验检测细胞迁移;RT-PCR、Western blot检测BCL-2、BAX、NF-κB及E-cadherin的mRNA和蛋白表达。结果:不同浓度新藤黄酸作用HeLa细胞72 h后,细胞抑制率随药物浓度升高而升高;穿过Transwell小室的细胞数随药物浓度升高而减少;BCL-2、NF-κB mRNA及蛋白表达随新藤黄酸浓度升高而降低;BAX、E-cadherin mRNA及蛋白表达随新藤黄酸浓度的升高而升高。结论:新藤黄酸在一定范围内能以剂浓度依赖性抑制HeLa细胞增殖,促进其凋亡,并抑制其迁移。

转化生长因子β_1对人宫颈癌细胞上皮-间质转化的诱导作用

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)对人宫颈癌He La细胞上皮-间质转化(EMT)发生的诱导作用。方法用10 ng/m L的TGF-β1处理He La细胞72 h,电镜下观察细胞形态,real-time PCR和Western blotting检测EMT相关上皮标记分子和间质标记分子的表达,划痕试验、Transwell实验检测细胞侵袭和转移能力。结果 TGF-β1可诱导He La细胞呈现EMT细胞形态,并且下调上皮相关标记蛋白E-cadherin和β-catenin的表达,上调间质相关标记蛋白Vimentin和N-cadherin的表达;细胞的侵袭和转移能力明显增强。结论 TGF-β1能够诱导He La细胞发生EMT,促进细胞侵袭和转移。

苯并[a]芘对宫颈癌HeLa细胞细胞色素P450 1A1的诱导作用

目的探讨苯并[a]芘(BaP)对宫颈癌HeLa细胞增殖及细胞色素P450 1A1(CYP1A1)表达的影响。方法不同浓度(0、1.0、2.5、5.0、7.5和10.0μmol/L)的BaP处理宫颈癌HeLa细胞,MTT法检测BaP对HeLa细胞增殖的影响,W estern b lotting和RT-PCR分别检测CYP1A1的蛋白表达和mRNA表达,荧光素标记检测CYP1A1活性。结果 MTT法检测显示,各浓度BaP组光密度(D553 nm)均较对照组(0μmol/L BaP)升高,其中7.5μmol/L BaP组最高(P<0.05)。W estern b lotting和RT-PCR检测结果显示,各浓度BaP组CYP1A1 mRNA及蛋白的表达水平均高于对照组,其中7.5μmol/L BaP组最高(P<0.05)。CYP1A1活性检测结果显示,各浓度BaP组HeLa细胞CYP1A1酶活力均高于对照组,以5.0μmol/L BaP组活力最高(P<0.05)。结论 BaP可诱导HeLa细胞增殖,诱导HeLa细胞表达CYP1A1,并增加酶活性。

综合应用多种教学方法提高临床生物化学检验教学质量

目的:研究综合应用多种教学方法对临床生物化学教学的应用效果。方法:在2007级临床检验本科临床生物化学检验教学过程中,综合应用多种教学方法。结果:综合应用多种教学方法,提高了学生的学习积极性,培养了学生自学能力,学习成绩得到提高。结论:综合应用多种教学法,能够激发学生对临床生物化的学习兴趣,加深学生对知识的理解和记忆,增强学生的实践能力,从而提高教学质量,促进医学检验教学可持续发展。

转化医学理念下临床生物化学检验教学改革的探讨

转化医学是在临床与实验室之间建立的双向转化通道,旨在促进基础医学研究和临床实践的相互发展。如何在医学教育阶段开始培养医学生的转化医学思维成为各大医学院校面临的重要课题。结合当前临床生物化学检验教学现状,优化教学大纲、更新教学内容,并采用多种教学方法,逐步有效地将转化医学的理念、思维和方法引入临床生物化学检验教学模式改革中,既是当代医学教育发展的需要,也是培养应用型医学检验技术人才的需要。

2型糖尿病患者脂蛋白脂酶基因S447X和载脂蛋白E基因多态性与冠心病的关系

目的探讨2型糖尿病患者脂蛋白酯酶(LpL)及载脂蛋白E基因(ApoE)与冠心病的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-PFLP)技术分别检测2型糖尿病并冠心病组(110例)及对照组(116例)LpL、ApoE基因型。结果2型糖尿病并冠心病组LpL/S447XX突变频率低于对照组(P<0.05);2型糖尿病并冠心病组ε3/3和ε4/3频率分别为41.2%和37.3%,分别明显低于对照组ε3/3(频率70.7%)和高于对照组ε4/3(频率21.6%),P均<0.01。ε4等位基因频率为28.2%,明显高于对照组(13.4%,P<0.01)。结论LpL/S447XX突变降低2型糖尿病并发冠心病患者的遗传易感性,而ApoE/ε4等位基因增高2型糖尿病并发冠心病患者的遗传易感性。

信息技术条件下教师信息化专业素养的提高

教师素养是决定教师教学效能的基本因素,是影响学生转变学习方式的重要因素。在全面推进素质教育以及教学信息化的大背景下,信息技术与课程科学整合成为当前国内外课程改革的潮流。教师应具有较高的信息化专业素养,促进信息技术与课程的有机整合,培养创新型人才,同时信息技术和课程的科学整合,也有利于教师信息化专业素养的进一步提高。

细胞色素P4501A1在子宫颈鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨细胞色素P4501A1(cytochrome P4501A1,CYP1A1)在子宫颈鳞状细胞癌(SCC)中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学法检测18例正常子宫颈组织、33例子宫颈上皮内瘤变(CIN)组织和124例SCC组织中CYP1A1的表达。分析其表达与SCC的临床病理学参数及预后的关系。结果:CYP1A1在SCC组织中的阳性率(59.7%)高于正常子宫颈组织(11.1%)(P<0.05);在SCC病理分级细胞分化Ⅲ级中CYP1A1的阳性率(69.8%)高于SCC细胞分化Ⅰ级者(34.8%)(P<0.05)。在有淋巴结转移SCC组织中CYP1A1的阳性率(73.6%)高于无淋巴结转移者(49.3%)(P<0.01),CYP1A1表达在SCC的年龄、浸润程度、临床分期和肿瘤大小间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:CYP1A1的高表达可能与SCC的发生、发展等生物学行为有关。

临床生物化学以病例为指导的综合性实验开设的探索

目的改革临床生物化学检验实验课的教学方法,提高学生学习兴趣与能力。方法对医学检验专业临床生化实验课进行教学改革,开设以病例为指导的综合性实验。结果改革实践取得满意的成果,提高了学生的临床思维能力和综合素质。结论该课程的改革符合教学发展的趋势,有利于提高本科生的综合素质。

survivin、caspase-3在脑胶质瘤的表达及suvivin ASODN对U251细胞的影响

目的：观察脑胶质瘤患者脑组织survivin、caspase-3的表达情况及survivin ASODN对脑胶质瘤U251细胞survivin和caspase-3表达的影响,探讨两者与脑胶质瘤发病及预后的相关性。方法：免疫组化法检测脑胶质瘤患者survivin和caspase-3蛋白表达,RT-PCR检测脑胶质瘤组织survivin mRNA表达,以脑胶质瘤U251细胞为研究对象,转染不同剂量survivin ASODN（100nmol/L、300nmol/L、500nmol/L）,并于培养不同时间（24h、48h、72h）后,RT-PCR检测U251细胞survivin和caspase-3的表达。结果：脑胶质瘤患者脑组织survivin蛋白高表达（阳性率69.6%）,而caspase-3低表达（阳性率50.7%）,且两者表达的阳性率与肿瘤的恶性程度有关。U251细胞在不同浓度survivin ASODN转染不同时间后,以500nmol/L survivin ASODN转染72h对U251 survivin mRNA的抑制率达62.06%,与对照组及不同浓度组间比较差异均有统计学意义（P〈0.05-P〈0.01）。免疫组化结果显示转染后survivin表达下调,而caspase-3表达上调。结论：脑胶质瘤患者脑组织高表达survivin蛋白,而低表达caspase-3蛋白,survivin ASODN可诱导U251细胞株survivin mRNA及蛋白表达下调,而caspase-3蛋白表达水平上调。

信息技术与临床生物化学课程整合的教学模式探讨

信息技术与学科整合是当代教育信息化的发展的必然趋势,通过二者有机整合,促使多元化"教与学"方式融入日常教学,激活学生的思维、求知欲,使学生由被动接受转为主动探索学习,同时也促进教师自身信息化素养的提高。

脑胶质瘤survivin表达及其反义核酸对U251细胞的作用

目的：观察脑胶质瘤患者脑组织生存素（survivin）的表达及其反义寡核苷酸（survivin ASODN）对脑胶质瘤U251细胞生长和凋亡的影响。方法：RT-PCR法检测脑胶质瘤患者脑组织survivin mRNA表达,脂质体介导下,分别以100、300、500 nmol/Lsurvivin ASODN作用于脑胶质瘤U251细胞48 h后,观察细胞形态学,流式细胞术检测细胞凋亡。结果：脑胶质瘤患者脑组织有survivin mRNA表达,阳性率为76.7%。不同浓度survivin ASODN转染48 h后,细胞生长抑制率分别为（52.24±6.59）%、（36.14±4.01）%和（24.14±5.57）%,凋亡指数分别为（19.46±3.85）%、（38.6±1.85）%和（55.34±3.16）%,与对照组及不同浓度组间比较差异有统计学意义（P〈0.05-P〈0.01）。结论：脑胶质瘤患者脑组织有survivin mRNA表达,survivinASODN以剂量依赖方式抑制脑胶质瘤U251细胞生长,诱导细胞凋亡。

人文关怀在家庭腹膜透析患者护理中的应用

终末期肾功能衰竭的有效治疗措施之一为腹膜透析，虽然可有效缓解终末期肾衰患者的症状，延长患者的生命，但不能使肾脏病逆转，因而决定了腹膜透析只能是一种长期维持性治疗。目前由于经济方面的原因，许多患者缺乏足够的资金支持，因而绝大部分采用居家持续性不卧床腹膜透析（continuous ambulatory peritoneal dialysis，CAPD）。CAPD患者即要忍受身体上的巨大痛苦，又要面临来自经济上的压力和心理上的创伤，因而许多患者往往对治疗失去信心，生存质量很差。怎样改善对CAPD患者的护理，提高他们的生存质量，是目前护理工作中的一个重要课题。

血液透析中低血压的观察及护理

血液透析中低血压是血液透析治疗期间出现的严重并发症，严重影响血液透析治疗的正常进行，导致透析不充分，影响患者的长期生活质量和存活率，并增加了护理工作量。现将我们对透析中低血压的护理体会总结如下。