神经生长因子对创伤性脊髓损伤大鼠膀胱功能和轴突损伤修复的作用

目的探究神经生长因子(nerve growth factor,NGF)对创伤性脊髓损伤(traumatic spinal cord injury,t-SCI)大鼠膀胱功能和脊髓神经轴突损伤修复的影响,并探讨其分子机制。方法选取30只雄性SD大鼠,通过改良Allen’s击打法构建创伤性脊髓损伤模型,随机分为假手术组、损伤组和NGF组,每组10只。采用BBB评分观察术前、术后大鼠的后肢运动功能;BL-420生物仪实验系统检测尿动力学;甲苯胺蓝染色吻合口远端截取的左侧腰6前根,计算有髓轴突数量;采用HE染色大鼠膀胱组织;TUNEL染色大鼠损伤严重的脊髓,观察脊髓凋亡率;蛋白质印迹法(Western blotting)检测脊髓组织中Raf-1、p-MEK-2、MEK-2、ERK1/2和p-ERK1/2的蛋白表达。结果BBB评分结果显示,术前假手术组、损伤组和NGF组的评分无差异,而术后与假手术组比较,损伤组和NGF组的评分显著降低(P<0.05)。损伤组的最大逼尿压力和脊髓有髓轴突数量显著低于假手术组和NGF组(P<0.05),但损伤组的残余尿量和膀胱细胞凋亡率显著高于假手术组和NGF组(P<0.05)。HE染色结果显示,损伤组的膀胱水肿严重,逼尿肌结构疏松,而NGF组有减轻膀胱损伤。Western blotting结果显示,与假手术组比较,损伤组的p-ERK1/2/ERK1/2和p-MEK-2/MEK-2蛋白比值以及Raf-1表达量显著高于假手术组和NGF组(P<0.05)。但假手术组和NGF组在最大逼尿压力、髓轴突数量、残余尿量、膀胱细胞凋亡率和蛋白差异均无统计学意义(P>0.05)。结论NGF可能阻碍MAPK/ERK通路的传导,从而促进轴突损伤的修复,改善t-SCI大鼠膀胱功能。