以临床病例为中心的形态学实验教学改革的实施与反馈

目的为了探讨以临床病例为中心的形态学实验教学方法对提高病理及形态学实验技术教学质量的影响,进行了相关教学新模式的改革探索。形态学实验教学中融入形态学实验技术教学,让医学本科生尽早学习科研方法,使学生在人才培养和科学研究上得到双向提升。方法收集厦门医学院附属第二医院心胸外科2021年3月-2021年10月送检的20例肺鳞癌标本行石蜡、半薄及超薄切片。通过对石蜡切片技术、生物电镜技术基本原理、操作方法进行讲授,让学生掌握肺鳞癌光镜与电镜下图像。结果肺角化型鳞癌石蜡及半薄切片于光镜下可见癌细胞间形成良好的细胞间桥;非角化型鳞癌细胞间则无细胞间桥。超薄切片于电镜下可见,肺鳞癌无论高、中、低分化,细胞间均有多少不等的张力原纤维和/或桥粒,偶见少数癌细胞内含黏液颗粒。结论以临床样品为实例,以大型科研仪器为支撑,让医学本科生尽早跟随老师进入实验室,学习形态学常用技术的基本原理、相关仪器的操作步骤、样本的制备方法、实验结果的分析处理等知识,在实践中开拓学生科研思维、增强学生创新实践能力,提升对人体组织形态学的认识。

胃癌中RORα蛋白的表达及临床病理意义

目的观察维甲酸相关孤核受体α(Retinoid acid receptor related Orphan Receptorα,RORα)蛋白在胃癌中的表达,探讨其与胃癌发生、发展的关系,为寻找胃癌肿瘤标记物提供一定的实验依据。方法应用组织芯片技术及免疫组化SP法检测90例胃癌组织、48例癌旁胃黏膜组织与22例正常胃黏膜组织中RORα的表达,研究RORα与胃癌发生、发展的关系。结果 RORα蛋白在胃癌组织中表达下调,正常胃黏膜、癌旁胃黏膜和胃癌组织中RORα蛋白阳性率分别为83.36%(19/22),56.25%(27/48)和24.44%(22/90),3者相比差异有显著性(P<0.05)。高分化腺癌、中分化腺癌、低分化腺癌、黏液腺癌和印戒细胞癌中,RORα阳性率分别为45.00%(9/20)、27.59%(8/29)、14.29%(3/21)、11.11%(1/9)和9.05%(1/11)。高分化腺癌RORα阳性率高于低分化腺癌(P<0.05)。结论 RORα蛋白下调与胃癌的发生、发展相关,且可能与胃癌的分化程度有关。

二烯丙基二硫对人胃癌细胞RORα蛋白表达的影响

目的研究二烯丙基二硫(DADS)处理前后人胃癌细胞中维甲酸相关孤核受体α(R ORα)蛋白表达变化情况。方法实验分对照组和DADS处理组,进行体外细胞培养及细胞形态学观察,采用免疫细胞化学、Western blot分析RORα蛋白水平的表达;半定量RT-PCR检测RORα核酸水平的表达。结果DADS处理24 h后,细胞形态学发生明显改变;R ORα蛋白在人胃癌MKN28、MGC803细胞核中呈强阳性表达,与对照组相比表达明显上调;半定量RT-PCR灰度扫描定量分析结果显示,DADS处理24 h后,RORα蛋白表达在MGC803、MKN28细胞中的(0.97±0.01)、(0.91±0.01)较对照组的(0.44±0.02)、(0.72±0.01)显著上调(P<0.01或P<0.05);Western blot分析及灰度扫描显示,DADS处理人胃癌MGC803、MKN28细胞8、12和24 h后,RORα蛋白表达分别为(0.71±0.03)和(0.79±0.01)、(0.87±0.01)和(0.88±0.02)以及(1.31±0.01)和(0.96±0.02)较未处理组的(0.32±0.01)和(0.68±0.02)明显上调,差异有显著性(P<0.01或P<0.05)。结论DADS可诱导人胃癌细胞分化,其诱导分化作用可能与上调R ORα蛋白表达有关。

孤核受体RORα的研究进展

孤核受体RORα作为核受体超家族成员,广泛分布于机体各组织,近年来国外学者对结构、功能做了大量研究,不断发现其通过对目的基因转录调控,在许多重要生理活动发挥重要的调节功能,在对抗心血管疾病、慢性炎症、免疫功能不全、骨代谢障碍、肿瘤等一些病理过程中发挥重要作用。

PBL教学模式在病理学教学中的应用与反思

PBL是一种以问题为基础、学生自主学习为主、老师指导为辅的教学模式。我们总结了近年来在病理学教学中获得的一些PBL教学经验,就PBL教学过程中教案编写、教师角色转换、学生自主学习能力培养、分组讨论环节把控与完善、反馈信息整理、PBL网络建设等问题进行反思。

数码显微互动系统在病理实验教学中的应用

病理学是一门研究患病机体器官、组织、细胞形态结构,机能和代谢变化,揭示疾病本质的科学,其侧重于从形态学改变的角度研究疾病,是基础医学与临床医学的桥梁学科,对培养医学生的动手能力、创新能力、解决问题能力、正确的思维方法和严谨的工作作风起着不可替代的作用。

45例肾结核临床病理分析

目的探讨肾结核的临床和病理特征及其有效治疗方法。方法回顾性分析45例肾结核患者的临床及病理资料。结果肾结核病例仍较多见,病理变化多样,早期诊断困难,单纯药物治疗可治愈者约19%,手术切除仍是主要治疗方法。结论不典型肾结核的发病率仍较高。尿常规、B超、静脉肾盂造影和术前病理学诊断为主要诊断方法,诊断性治疗仍是确诊的重要依据。

二烯丙基二硫对人胃癌细胞维甲酸相关孤核受体α表达的影响

目的探讨二烯丙基二硫(DADS)处理前后人胃癌细胞中维甲酸相关孤核受体α(RORα)表达变化情况。方法 将胃癌SGC7901、MGC803细胞分为对照组和DADS处理组,进行体外细胞培养及细胞形态学观察,采用免疫细胞化学、Western blot分析RORα的表达;半定量RT-PCR检测RORα核酸水平的表达。结果 DADS处理24 h后,胃癌SGC7901、MGC803细胞形态学发生明显改变;RORα在人胃癌SGC7901、MGC803细胞核中呈强阳性表达,与对照组比较表达显著上调;半定量RT-PCR灰度扫描定量分析结果显示,DADS处理24 h后,SGC7901、MGC803细胞中RORα的表达量[(1.09±0.01)与(0.97±0.01)]较对照组[(0.45±0.03)与(0.44±0.02)]显著上调,差异均有统计学意义(P<0.01);Western blot分析及灰度扫描显示,DADS处理人胃癌MGC803、SGC7901细胞8、12、24 h后,RORα蛋白表达量较未处理组显著上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 DADS可诱导人胃癌细胞分化,其诱导分化作用可能与上调RORα表达有关。

应用显微数码互动提高病理实验教学质量

在医学病理学实验教学过程中引入显微数码互动系统,有助于师生之间的实时交流,有利于教学资源的共享,有利于教学质量和教学效率的提高。它为医学病理学实验教学提供了一种新模式。

二烯丙基二硫作用于HL-60细胞后凋亡相关基因的差异表达

背景与目的:二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)对多种肿瘤细胞有促凋亡作用,白血病是儿童最常见的恶性肿瘤,近期研究提示DADS能够在体外诱导人白血病细胞发生凋亡,但其具体作用机制尚不清楚。本实验旨在研究DADS诱导人白血病细胞HL-60凋亡的生物学效应,并探讨其分子机制。方法:运用DNA含量分析、AnnexinⅤ/PI双标记流式细胞仪、DNA琼脂糖凝胶电泳以及透射电子显微镜形态学观察等方法来证实细胞凋亡。通过基因芯片检测60μmol/L DADS作用于HL-60细胞4h后凋亡相关基因的表达谱,采用RT-PCR技术验证上调基因Fas-L和下调基因Bag-1。结果:15、30、60和120μmol/L DADS作用于HL-60细胞24h后,DNA含量分析出现了明显的亚二倍体峰;60μmol/LDADS作用4、8、12、24h后,Annexin Ⅴ/PI双标流式细胞仪检测表明早期凋亡细胞显著增加。60μmol/LDADS作用24h后,在DNA琼脂糖凝胶上可见特征性的梯形条带。电子显微镜观察到细胞体积缩小,核浓缩和凋亡小体形成等典型的形态学改变。通过基因芯片检测发现,60μmol/L DADS作用4h后有8个凋亡相关基因表达差异显著,选择其中Fas-L和Bag-1两个基因运用RT-PCR技术进行验证,其结果与基因芯片结果一致。结论:DADS能够诱导人白血病细胞HL-60凋亡,这可能是多个基因和多条信号转导通路共同作用的结果。

二烯丙基二硫启动人白血病HL-60细胞凋亡模型的建立

目的寻找二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)诱导人白血病HL-60细胞凋亡的启动点,建立DADS启动HL-60细胞凋亡模型。方法实验设未处理组、处理组和撤药组,分别采用细胞计数、流式细胞术、DNA凝胶电泳、Western blot等方法,绘制生长曲线,检测凋亡率、活化的caspase-3表达率以及DNALadder、凋亡相关蛋白的检测。结果3.6mg.L-1DADS作用HL-60细胞1d,与对照组相比,细胞数没有明显变化,而作用2～6d,细胞数分别减少24.1%、36.5%、44.2%、52%、53.6%。DADS作用1、2d,凋亡率分别为3.1%、4.3%,与未处理组(3.0%)差异无显著性,而作用3～5d的凋亡率分别达到8.5%,15.2%,27.4%,均高于未处理组(P<0.05)。DADS作用2～5d撤药后再培养至d6,凋亡率分别为7.9%,12.4%,16.5%,18.8%,高于未处理组的3.3%(P<0.05)。处理2～5d后,活化的caspase-3的表达率分别为10.0%、10.4%、14.9%、17.3%,均高于未处理组5.4%(P<0.05)。处理组中DADS处理4d后DNA凝胶电泳出现梯状条带,而DADS作用2～5d撤药后再培养至d6均出现明显梯状条带。Westernblot结果表明,从作用2d起,caspase-3表达开始上调,而Bcl-2表达开始下调。结论3.6mg.L-1DADS诱导人白血病HL-60细胞凋亡的启动点为处理2d。

DADS诱导人胃癌细胞周期阻滞相关基因的差异表达

目的研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)诱导人胃癌MGC803细胞G2/M周期阻滞相关基因表达的变化。方法MTT法、流式细胞术分别分析DADS对MGC803细胞的抑制作用与细胞周期分布的影响;功能基因芯片检测周期相关差异表达基因;Western blot、RT-PCR验证周期相关基因的表达。结果MTT法、流式细胞术证明DADS可明显抑制MGC803细胞增殖并诱导G2/M期阻滞。基因芯片结果显示,30 mg.L-1DADS作用MGC803细胞4 h后,表达上调的基因有CDC45L、CDK5R1、p21、CUL4A、GADD45α、RAD17、TP53,下调的基因是ANAPC5、ATR、BRCA1、CCNA2、CCNB2、CCNE1、CCNE2、CDC16、CDC6、CDK5RAP1、GTF2H1、MCM5、RAD9A、RGC32。RT-PCR显示30 mg.L-1DADS处理MGC803细胞4、8、12 h后,p21、GADD45α时间依赖性的表达增强(P<0.05),CyclinB1呈时间依赖性的表达降低(P<0.05)。TP53在4、8、12 h后与对照组比较表达明显增强(P<0.05)。Western blot结果表明,30 mg.L-1DADS作用MGC803细胞6、12、24 h后,p53、GADD45α、p21蛋白表达上调,CyclinB1蛋白表达下调(P<0.01)。结论DADS诱导人胃癌MGC803细胞G2/M周期阻滞是由多基因协同作用的结果,可能通过两种途径共同调节完成的。

血清髓鞘碱性蛋白含量对脊髓损伤程度早期诊断价值的实验研究

[目的]探讨血清髓鞘碱性蛋白(myelinbasicproteinMBP)含量与脊髓损伤程度间的关系及对脊髓损伤程度的早期诊断价值。[方法]60只日本大耳白家兔随机分为轻、中、重度脊髓损伤组,每组动物通过大脑皮层体感诱发电位、损伤脊髓病理组织学检查和损伤后动物改良TARLOR评分证实损伤程度差异性。应用酶联免疫吸附实验法检测不同损伤程度家兔损伤前后血清中髓鞘碱性蛋白含量。[结果]3组实验动物血清中髓鞘碱性蛋白含量损伤后均升高,伤后24、48、72h3组实验动物间血清MBP含量在统计学上有显著性差异(P<0.05)。损伤后第7d时3组实验动物血清MBP含量在统计学上已无显著性差异(P>0.05)。[结论]血清MBP含量对脊髓损伤程度早期诊断有一定的价值,血清MBP含量可作为早期判断脊髓损伤程度指标之一,但有一定的时限性。

MCL1蛋白在胃癌中的表达及临床意义

目的:MCL1(myeloid cell leukemia-1)与多种恶性肿瘤的发生、发展及转移相关。本文从临床样本和细胞水平检测胃癌组织中MCL1蛋白的表达水平,探讨MCL1蛋白在胃癌发生、发展中的作用。方法:采用S-P免疫组化法检测正常胃黏膜、癌旁胃黏膜和胃癌组织芯片中MCL1蛋白的表达,Western blot检测MCL1蛋白在人胃癌BGC823、SGC7901、MKN28细胞中的表达。结果:免疫组化结果显示,MCL1蛋白表达定位于细胞的胞浆,着色呈黄色至棕黄色;正常胃黏膜、癌旁胃黏膜、胃癌中MCL1蛋白阳性表达率分别为18.18%(4/22)、54.17%(26/48)、83.33%(75/90);MCL1蛋白在胃癌中的表达高于癌旁胃黏膜及正常胃粘膜,癌旁胃黏膜与正常胃粘膜MCL1蛋白表达亦具有明显差异(P<0.05);MCL1蛋白阳性表达率在伴淋巴结转移组为93.48%(43/46),无淋巴结转移组为72.72%(32/44),两者差异有显著性意义(P<0.05);而与性别、年龄和肿瘤大小无关。S-P免疫组化法与Western blot结果显示MCL1蛋白表达与胃癌分化程度呈负相关。结论:MCL1蛋白表达与胃癌发生、分化程度和淋巴结转移相关。

羊齿天门冬根茎提取物对人骨肉瘤细胞增殖的抑制作用

目的探讨羊齿天门冬根茎提取物对人骨肉瘤细胞增殖的影响及其分子机制。方法 MTT法检测羊齿天门冬根茎提取物对人骨肉瘤Saos-2细胞增殖和生长的影响;平皿集落形成法检测羊齿天门冬根茎提取物对细胞锚定依赖性生长的影响;碘化丙啶单染流式细胞仪检测细胞周期分布改变;Western blot检测环氧化酶2(COX-2)蛋白表达水平改变。结果羊齿天门冬根茎乙酸乙酯部位(AF-A)对Saos-2细胞具有细胞毒作用(IC50值为26.7μg/mL);AF-A对Saos-2细胞锚定依赖性生长具有抑制作用,呈剂量相关性(P<0.05);AF-A(30.0、100.0μg/mL)处理Saos-2细胞48h后,细胞S期百分比分别为(43.7±2.5)%和(51.9±1.9)%,与对照组(31.8±4.8)%比较差异有统计学意义(P<0.05);不同浓度AF-A均能抑制Saos-2细胞COX-2蛋白水平表达。结论 AF-A对人骨肉瘤细胞增殖和生长具有抑制作用,其机制可能与诱导人骨肉瘤细胞S期阻滞和抑制COX-2蛋白水平表达有关。

环氧化酶-2在骨巨细胞瘤中的表达及其临床意义

环氧化酶（COX）是花生四烯酸转化为前列腺素和血栓烷的关键酶，其有环氧化酶-1（COX-1）和环氧化酶-2（COX-2）两种异构酶。近年来研究表明，COX-2不仅在炎症过程中发挥重要作用，而且对细胞生长、血管生成等也产生影响，同时COX-2在多种恶性肿瘤中表达上调．参与肿瘤的发生、发展。本研究应用免疫组化的方法检测54例骨巨细胞瘤组织中COX-2的表达情况，并研究表达结果与骨巨细胞瘤的肿瘤分期和肿瘤复发、转移的关系，从而了解COX-2与骨巨细胞瘤的发生、发展及预后的相关性。

黏蛋白和转化生长因子βⅡ型受体在胃癌组织中的表达及其意义

目的探讨黏蛋白(MUC4)和转化生长因子βⅡ型受体(TGF-βRⅡ)在胃癌组织中的表达及其与生物学行为之间的关系。方法应用免疫组化S-P法检测87例胃癌标本中MUC4和TGF-βRⅡ的表达。结果MUC4在胃癌组织中表达阳性率为95.4%(83/87),与组织分化、肿瘤浸润深度及淋巴结转移密切相关(P<0.05);TGF-βRⅡ在胃癌组织中表达阳性率为16.1%(14/87),与组织分化、肿瘤浸润深度密切相关(P<0.05);两者的表达与患者年龄、性别均无关(P!0.05);而且MUC4与TGF-βRⅡ的表达之间呈负相关(P<0.01)。结论MUC4与TGF-βRⅡ的表达是研究胃癌不同组织分化的较好指标,TGF-βRⅡ的低表达可能引起MUC4的高表达,促使肿瘤的浸润和转移。

临床技能竞赛对地方医学院校临床技能教学的启示与促进

全国高等医学院校临床技能竞赛的举办使得地方医学院校拥有了检验和审视自身临床技能教学的机会。通过参赛,地方医学院校临床技能教学不仅获得了诸多启示,而且通过以赛促教、以赛促学等方式推动了临床技能教学形式和内容的改革,促进了地方医学院校人才培养质量的提高。

胃癌组织中MUC4和VEGF的表达及其意义

目的探讨MUC4和VEGF在胃癌组织中的表达及其与生物学之间的关系。方法采用免疫组化S-P法检测86例胃癌组织中MUC4和VEGF的表达。结果VEGF在正常胃黏膜中没有表达;MUC4在胃癌中的表达率为94.2%(81/86);VEGF在胃癌中的表达率为84.9%(73/86)。MUC4和VEGF与胃癌组织分化、肿瘤浸润深度、淋巴结转移密切相关(P<0.05),且MUC4与VEGF的表达呈正相关(P<0.01);但二者的表达与患者年龄、性别差异无显著性(P>0.05)。结论MUC4和VEGF是胃癌发生发展中的重要因子,在胃癌的侵袭转移中起重要作用,MUC4和VEGF的联合表达与胃癌的浸润转移密切相关。

MMP-2在实验性大鼠慢性阻塞性肺疾病的表达及意义

目的利用维A酸对实验性大鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)的干预,检测其MMP-2的变化并对其机制的探讨。方法Wistar雄性大鼠36只,随机分为三组:正常对照组、模型组和用药组,每组12只。模型组大鼠用药后观察各组大鼠肺组织的病理改变,免疫组化方法及酶联免疫试验观察肺组织MMP-2表达情况。结果模型MMP-2的活性和表达与正常对照组比较,差异有显著性(P<0.01)。用药组MMP-2的活性和表达与模型组比较,差异有显著性(P<0.01)。结论维A酸可降低COPD大鼠肺组织中MMP-2的表达,为COPD防治及治疗有很好的指导意义。