HPLC法测定克补片中6种水溶性维生素含量

目的:建立HPLC法同时测定克补片中硝酸硫胺、维生素B2、维生素B6、烟酰胺、叶酸、泛酸钙6种水溶性维生素含量。方法:采用AgilentHC-C18(2)(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱;流动相为0.05mo.lL-1醋酸铵(pH6.0)—甲醇梯度洗脱;检测波长212nm(泛酸钙)、280nm;柱温30℃;流速1.0mL.min-1。结果:硝酸硫胺、维生素B2、维生素B6、烟酰胺、叶酸、泛酸钙的线性范围分别为0.03～0.07mg.mL-1、0.030～0.071mg.mL-1、0.018～0.043mg.mL-1、0.3～0.7mg.mL-1、1.2～2.9μg.mL-1、0.064～0.151mg.mL-1。回收率分别为:99.4%、99.2%、98.7%、99.5%、98.3%、99.7%(n=9)。结论:本方法简便准确,精密度良好,适用于克补片中硝酸硫胺、维生素B2、叶酸等6种水溶性维生素的含量测定。

洛芬待因缓释片释放度检查的改进建议

洛芬待因缓释片为布洛芬与磷酸可待因的复方制剂。布洛芬抗炎镇痛，通过抑制环氧化酶对痛源的炎症组织局部起镇痛作用；磷酸可待因中枢镇痛，两者通过不同的作用机理及最佳配比发挥镇痛的协同作用。洛芬待因缓释片为双层片，其中磷酸可待因层为速释层，能迅速镇痛，布洛芬层为缓释层，起长效镇痛作用。

注射用磷酸肌酸钠有关物质检查方法的改进

目的:改进注射用磷酸肌酸钠有关物质检查方法。方法:调整供试品溶液的pH值,提高供试品溶液的稳定性。结果:改进后的供试品溶液在10h内稳定,测定结果更为可靠。结论:改进方法操作简便,测定结果准确可靠,更适用于日常检验。

反相离子对色谱法测定环磷腺苷有关物质

目的建立反相离子对色谱法检测环磷腺苷的有关物质。方法用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂 ;以 0 .0 5mol/L磷酸二氢钾溶液 (含 0 .0 1mol/L四丁基溴化铵 ,pH 4 .3) 乙腈 (85∶15 )为流动相 ;检测波长为 2 5 9nm ;流速为 1.0ml/min。结果腺苷、5′ 腺苷酸、环磷腺苷和降解产物之间的分离度分别为 9.2、11.5、14 .3,腺苷与 5′ 腺苷酸的检测限均为 0 .1ng、定量限均为 0 .3ng。结论此法分离度好、灵敏度高 ,操作简便 ,可有效分离、检测起始原料带入的杂质和降解产物 ,用于环磷腺苷中的有关物质控制 ,优于纸色谱法。

反相离子对HPLC法测定盐酸二甲双胍中双氰胺的含量

目的建立反相离子对HPLC法测定盐酸二甲双胍中双氰胺含量的方法。方法采用Agilent HC—C18（2）色谱柱（250mm×4．6mm，5μm），以甲醇-10mmool／L庚烷磺酸钠溶液（含0．8％三乙胺，用H3PO4调pH3．0）（15：85）为流动相；流速：1．0mL／min；检测波长：218nm；柱温：30℃。结果反相离子对HPLC法测定盐酸二甲双胍中双氰胺含量的线性范围为0．01～26．12μg／mL；相关系数r=0．9999；重复性的RSD为1．8％；精密度RSD为1．6％；高、中、低3种浓度的加样回收率分别为98．8％，102．1％，103．6％；RSD分别为0．8％，1．2％，0．9％。结论此法简便、快速、准确、专属性好。

HPLC法同时测定复方甘草酸苷片中甘氨酸和蛋氨酸的含量

目的建立HPLC法同时测定复方甘草酸苷片中甘氨酸和蛋氨酸的含量。方法采用AgilentHC-C18(2)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液(50%磷酸调节pH值至2.5)(5∶95)为流动相;流速:0.8 mL/m in;检测波长:200 nm;柱温:30℃。结果甘氨酸与蛋氨酸均在0.10～1.0 mg/mL的浓度范围内有良好的线性关系(r=1.000 0和0.999 9);平均回收率分别为100.29%和99.58%;RSD分别为0.97%和0.75%(n=9)。结论此法简便、快速、准确,适用于同时测定复方甘草酸苷片中甘氨酸和蛋氨酸的含量。

重复性测定结果可接受性检查方法在滴定液标定中的应用

目的:总结分析我国国家标准和《中国药典》滴定液标定结果可接受性检查方法,对食品药品检验系统滴定液标定的管理提供建议。方法:查阅国内相关标准、规定以及文献,总结现状,分析问题,提出相应对策。结果与结论:应建立食品、保健食品和化妆品滴定液标定方法的技术指导文件,积累标定数据,计算检验机构内部的标定重复性标准差,建立动态更新的数据库,进一步加强应用于国标方法滴定液的管理办法。

高效液相色谱法测定沙丁胺醇的有关物质

目的建立高效液相色谱法测定沙丁胺醇中的有关物质。方法采用C18柱,以庚烷磺酸钠溶液(庚烷磺酸钠2.87g、磷酸二氢钾2.5g,加水溶解并稀释至1000mL,用稀磷酸调节pH值至3.65)-乙腈(78∶22)为流动相,检测波长220nm。结果沙丁胺醇与其降解产物在该色谱条件下能够有效分离。结论方法简便、专属性强,可用于沙丁胺醇中有关物质的测定。

关于盐酸二甲双胍肠溶片酸中释放度检查方法的讨论

盐酸二甲双胍肠溶片酸中释放度检查方法存在不合理之处,对此提出探讨意见。

反相离子对色谱法测定注射用核糖核酸酶解产物中的5′-核苷酸

目的建立反相离子对色谱法同时测定注射用核糖核酸酶解产物中4种5'-核苷酸的方法,根据核苷酸的含量计算样品中核糖核酸的含量。方法用蛇毒磷酸二酯酶将样品中的核糖核酸水解为5'-核苷酸,采用岛津VP-ODS(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相A为甲醇-水(5:95)[含20 mmol L-1KH2PO4和1%(v/v)四丁基氢氧化铵(TBAOH)溶液,pH=6.5],流动相B为甲醇-水(80:20)[含1%(v/v)TBAOH溶液,pH=6.5],梯度洗脱,检测波长为254 nm。结果建立的色谱法能将4种核苷酸良好分离,4种核苷酸在0.50～15μg mL-1线性关系良好,相关系数分别为0.999 8、0.999 9、0.999 9、0.999 9;平均回收率(n=6)均在95.1%～106.3%,RSD均<3.5%。结论该方法专属性好,具有一定的准确性,可用于检测注射用核糖核酸的含量,测定结果可为注射用核糖核酸的质量研究和评价提供依据。

电位滴定法测定盐酸苯乙双胍含量

目的建立环保便捷的盐酸苯乙双胍含量的电位滴定方法。方法采用Mettler Toledo DL53电位滴定仪、Mettler DG113-GC电极。以20mL冰醋酸和20mL醋酐为溶剂进行电位滴定。结果盐酸苯乙双胍取样量在0．06～0．14g范围内。线性良好，r=0．9999（n=5），中间精密度为0．34％，稳定性试验和重复性试验的RSD均小于0．5％。结论该方法适于盐酸苯乙双胍原料的含量测定。

基于渗透速率及溶出曲线初步预测国产氯唑沙宗片的生物等效性

目的:从氯唑沙宗原料药的生物药剂学分类系统(BCS)分类出发,结合氯唑沙宗片的渗透速率及溶出曲线,对国产氯唑沙宗片仿制药与参比制剂的生物等效性进行初步预测。方法:采用人工仿生膜测定氯唑沙宗原料药渗透性,结合其在不同介质中的溶解度,对氯唑沙宗进行BCS分类判断。选择水、pH 1.2盐酸溶液、pH 4.0磷酸盐缓冲液、pH 6.8磷酸盐缓冲液作为溶出介质,分别采用相似因子(f2)法、AV值法及非模型依赖多变量置信区间法,对参比制剂与4家企业的国产氯唑沙宗片在不同介质中的溶出曲线进行相似性评价。计算仿制制剂与参比制剂在空腹肠及饱腹肠模拟液溶出介质中的渗透速率及总渗透量的90%置信区间,进行生物等效性预测。结果:氯唑沙宗为BCSⅡ类,低溶解度高渗透性药物。体外溶出试验显示国产氯唑沙宗片与参比制剂的相似性较低。渗透速率试验显示,在空腹肠模拟液溶出介质中,与参比制剂渗透速率的90%置信区间分别为101.05%~107.12%、116.57%~120.13%、99.36%~105.72%、130.17%~139.62%之间,其中3家在80%~125%的生物等效接受标准范围内,1家不在范围内。在饱腹肠模拟液溶出介质中,与参比制剂渗透速率的90%置信区间分别为103.62%~115.49%、116.99%~134.85%、131.70%~141.93%、122.37%~127.23%,其中1家在80%~125%的生物等效接受标准范围内,3家不在范围内。结论:基于溶出曲线结合渗透速率可在一定程度上较好地模拟药物在人体内的吸收转运过程,该联合应用方法可用于国产氯唑沙宗片与参比制剂生物等效性的初步预测。

瑞舒伐他汀钙片体内外一致性评价研究

目的:通过体外溶出试验和体内生物等效性试验,考察瑞舒伐他汀钙仿制制剂与参比制剂的质量与疗效,同时采用GastroPlusTM进行群体药代动力学模拟,评估软件模拟预测的性能可靠性。方法:分别测定不同pH缓冲液(pH 1.0~8.0)中瑞舒伐他汀钙的溶解度;测定仿制制剂与参比制剂在pH 1.0盐酸溶液、pH 4.5醋酸盐缓冲液和pH 6.6枸橼酸盐缓冲液等3种溶出介质中的溶出曲线;采用f2因子法评价溶出曲线相似性。在28名健康成年中国志愿者中进行临床BE试验,评估两制剂的生物等效性。通过GastroPlusTM进行PK建模,在虚拟的28名健康成年中国人中进行群体药代动力学研究,将临床BE试验结果与GastroPlusTM模拟结果比较,验证虚拟生物等效性研究的可行性。结果:溶解度结果显示,瑞舒伐他汀钙属于高溶解性药物。体外溶出结果显示,仿制制剂与参比制剂在pH 1.0介质中,除批号170703的f2因子为49,其他批号的f2因子均>50,两者基本相似;在pH 4.5介质中f2因子均<50,溶出曲线不相似;在pH 6.6介质中,两者在15 min几乎完全溶出(>85%),溶出曲线相似。临床试验和软件虚拟预测BE结果均显示Cmax和AUC的几何平均比(仿制/参比)的90%CI在80%~125%的范围内,仿制制剂与参比制剂生物等效。结论:仿制制剂与参比制剂生物等效,软件模拟BE可以用于仿制药一致性评价临床前的初步研究。

萘普生片溶出曲线相似性评价及体内外相关性研究

目的比较进口参比制剂萘普生片与国产仿制萘普生片的溶出曲线与生物等效性,评价两者质量一致性。为国产萘普生片处方、工艺的优化提出合理建议。方法以日本田边三菱公司生产的萘普生片为参比制剂,测定8种国产仿制药与参比制剂在pH值1.2盐酸溶液、pH值5.5醋酸盐缓冲液、pH值6.0磷酸盐缓冲液、pH值6.8磷酸盐缓冲液以及水等5种溶出介质中的溶出曲线,通过计算f2相似因子评价溶出曲线相似性。应用GastroPlusTM软件结合体外溶出数据,建立萘普生片体内外相关性模型,评价进口萘普生片与仿制萘普生片的生物等效性。结果体外溶出测定实验中,8种国产仿制萘普生片在多种溶出介质中的溶出曲线与参比制剂溶出曲线均不相似(f2因子均<50);体内预测结果,除参比制剂外,各仿制制剂与实测数值差异均较大。结论GastroPlusTM软件建立的体内外相关性模型可很好反映体内溶出情况,国内8种仿制萘普生片与进口参比制剂质量差异较大,制剂处方、工艺有待优化。

毛细管电泳法结合化学计量学分析评价云芝胞内糖肽的质量

目的建立云芝胞内糖肽毛细管电泳(CE)指纹图谱,结合主成分分析(PCA)和系统聚类分析(HCA)对云芝胞内糖肽的质量进行控制。方法选择5个厂家18批云芝胞内糖肽胶囊(片)、云芝胞内糖肽原料、云芝胞内糖肽对照品、菌丝体水提醇沉产物1,培养液滤液醇沉产物2,采用非涂层毛细管(60.2 cm×75μm,有效长度50 cm),以50 mmol·L^(-1)的四硼酸钠为运行缓冲液,在25℃下运行,电压为15 kV,检测波长为200 nm,建立云芝胞内糖肽的指纹图谱,用ChemPattern 2020版对其结果进行化学计量学分析。结果建立了云芝胞内糖肽的CE指纹图谱,确定了6个共有峰,同种来源云芝胞内糖肽的相似度计算结果在0.969~0.999,主成分分析和系统聚类分析结果显示同种来源云芝胞内糖肽样品成分较为一致。结论该方法专属性强,高效快速,可为云芝胞内糖肽的区分和质量控制提供参考。

亮菌甲素注射剂杂质谱研究

目的:对亮菌甲素注射剂杂质谱进行研究。方法:采用液质联用技术对注射用亮菌甲素和亮菌甲素注射液中有关物质的结构进行解析,结合强制降解试验,推测各杂质的来源,并利用ADMET Predictor软件预测各杂质毒性。结果:亮菌甲素与相邻杂质及各杂质之间分离良好。推测了亮菌甲素注射剂杂质谱中10个杂质的结构,其中杂质1~5来源于碱降解,杂质6、杂质7来源于光降解,杂质8为原料引入,杂质9、杂质10为亮菌甲素与辅料丙二醇反应的产物。软件预测结果显示,亮菌甲素、杂质8的预测毒性很低,风险低;其他杂质可能具有一定的潜致敏性、染色体畸变、生殖毒和肝脏不良反应。结论:通过对亮菌甲素注射剂杂质谱研究,推测了杂质的结构、来源及其毒性,为其生产工艺和质量控制提供依据。

云芝糖肽化学成分的研究进展

云芝(Trametes versicolor)糖肽为从云芝中发酵提取的糖肽类物质,是免疫增强药,含有多糖、肽、核苷和核碱类等多种活性成分,分子量大,结构和组成复杂,因此对云芝糖肽的化学成分研究显得尤为重要。综述了近年来对云芝糖肽结构研究的进展,分析各检测方法的利弊,对云芝糖肽的化学成分和结构测定作初步总结,为进一步研究云芝糖肽的组成提供基础数据。

亮菌甲素对照品标定及其注射剂含量测定方法研究

目的建立亮菌甲素对照品标定方法,同时建立HPLC测定亮菌甲素注射剂含量。方法对照品标定:通过紫外光谱、红外光谱、质谱、核磁共振波谱进行结构确证,采用HPLC法进行纯度检查,以质量平衡法进行定量赋值;注射剂含量测定:采用Kromasil C18色谱柱,以0.01 mol·L^-1乙酸铵溶液(pH 4.0)-甲醇(73∶27)为流动相,流速1.0 mL·min^-1,柱温40℃,检测波长367 nm。结果确证了亮菌甲素对照品的结构,测得其含量为99.6%;新建含量测定方法专属性良好,亮菌甲素浓度在8.07~80.70μg·mL^-1与峰面积线性关系良好(r=0.9999),注射用亮菌甲素(包括处方Ⅰ、处方Ⅱ)和亮菌甲素注射液平均加样回收率均在98.0%~101.0%内。24批样品含量测定结果为94.7%~102.6%,利用SPSS软件进行统计分析,结果表明,建立的HPLC法与现行标准中紫外吸收系数法含量测定结果相关性良好且差异无统计学意义。结论亮菌甲素对照品定量赋值结果准确、可靠,可作为含量测定用对照品;建立的含量测定HPLC法专属性好,准确度高,可替代原方法用于亮菌甲素注射剂的含量测定。

高效液相色谱法结合主成分分析法分析云芝胞内糖肽中核苷和核碱的组成

目的:本实验利用超声提取-高效液相色谱测定技术,建立了云芝胞内糖肽原料和制剂中核苷和核碱组成的检测方法。方法:样品以水为溶剂超声提取,以月旭AQ-C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm)为填充柱,流动相为水、甲醇梯度洗脱,检测波长为260nm,流速为1.0mL·min^(-1),进样体积为20μL。结果:云芝胞内糖肽由11个核苷和核碱组成,含量测定方法经过验证,线性关系良好,r均>0.9940,11个成分的线性均在1~100μg·mL^(-1),仪器精密度良好(RSD<2%),样品回收率在81.4%~98.7%,均能满足云芝胞内糖肽中核苷和核碱含量测定的要求。以该方法对54批样品及其原料和相关产物进行检测,经ChemPattern 2020版软件建模,可应用主成分分析区分不同生产工艺的样品。结论:此方法准确、灵敏度高、分离效能好,可用于云芝胞内糖肽中核苷和核碱的含量测定。