具有解钾活性假单胞菌的分离与鉴定

[目的]分离并鉴定具有解钾活性假单胞菌。[方法]以农田土壤为样本,在钾长石粉为唯一钾源的选择性培养基上分离并纯化解钾菌,并通过形态观察和16S r DNA序列分析对分离到的细菌进行鉴定。[结果]经梯度稀释涂布和平板划线分离,经初筛获得8株生长良好并具有解钾透明圈的细菌。将初筛后获得的细菌菌株进行发酵培养,利用原子吸收分光光度法测定发酵上清液中的速效钾含量,从中筛选出解钾能力较强的1株假单胞菌K3。通过形态观察发现,该菌株为革兰氏阴性杆菌。16S r DNA序列分析结果表明,该菌株与荧光假单胞菌F113亲缘关系最近,初步确定该菌株属假单胞菌属。[结论]该研究为微生物钾肥的开发提供了新的试材。

猪繁殖呼吸综合征病毒的NSP7蛋白密码子优化和表达及其免疫学活性鉴定

目的:提高蓝耳病毒NSP7基因的表达水平和促进其可溶性表达,验证重组蛋白的免疫学活性,为猪繁殖呼吸综合征血清学鉴定奠定基础。方法:通过同源性分析软件分析28株NSP7基因的保守性,抗原表位预测网站预测NSP7蛋白的抗原表位,可溶性表达预测网站分析NSP7基因可溶性表达概率,随后挑选保守性高的NSP7基因进行密码子优化并合成,最后利用SDS-PAGE探究重组蛋白表达产物存在的形式和表达的最佳条件,Western blot和ELISA探究重组蛋白的免疫学活性。结果:蓝耳病毒NSP7基因较保守,抗原表位较多,经过密码子优化后以可溶性形式表达; SDS-PAGE分析表明重组蛋白的相对分子质量约为49 k D,最佳表达条件为34℃0. 8 mmol/L IPTG 7 h; Western blot和ELISA结果显示纯化的蛋白具有免疫学活性。结论:重组蛋白以可溶性形式表达且具有免疫学活性,为PRRSV血清学鉴定奠定基础。

婴幼儿花斑糠疹马拉色菌菌种及致病因素分析

目的了解婴幼儿花斑糠疹患者马拉色菌的菌种分布并进行致病因素分析,以期为婴幼儿花斑糠疹的诊断提供依据。方法招募本院门诊就诊的≤2周岁婴幼儿花斑糠疹患者83例及部分患儿母亲。取患儿皮损鳞屑及部分患儿母亲胸前皮脂屑接种于Leeming和Notman培养基中培养,通过PCR技术和基因测序方法进行马拉色菌菌种鉴定,并对其致病因素进行分析。结果共分离培养出9种马拉色菌,显示患儿花斑糠疹主要致病菌为糠秕马拉色菌(79.59%),其次为钝形马拉色菌和Malassezia japonica。该结果与母亲标本菌种一致率为81.25%,其中糠秕马拉色菌为主要携带菌,一致率为88.89%。结论婴幼儿花斑糠疹主要致病菌为糠秕马拉色菌,病原菌来源可能与母亲携带菌菌种有关。