药物诱导肺癌细胞衰老的体外研究

目的探讨药物诱导肿瘤细胞衰老的可能机制和对肿瘤治疗的潜在价值。方法用不同浓度的抗肿瘤药物顺铂(DDP)、Nutlin-3的活性异构体(Nutlin-3a)、4-异硫脲基丁腈盐酸盐(Kevetrin)分别处理人肺癌A549、H460、H2228细胞,采用β-半乳糖苷酶染色检测衰老细胞阳性率,EdU染色检测增殖细胞阳性率,CCK-8法检测细胞存活率,Real-time qPCR法检测肺癌细胞衰老相关分子p21 mRNA表达水平,Western blot法检测药物处理肺癌细胞衰老相关分子p53和p21蛋白表达情况。结果DDP、Nutlin-3a和Kevetrin可诱导A549、H460和H2228细胞胞体增大、蓝染衰老细胞增多,阳性细胞率与各自对照组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。DDP和Nutlin-3a处理的A549细胞,荧光显微镜检测发现EdU红色荧光增殖细胞阳性率与对照组相比明显减少(均P<0.05);此外,药物的细胞毒性实验也发现,DDP、Nutlin-3a和Kevetrin均可使肺癌细胞存活率明显降低(均P<0.05)。与各自对照组相比,6.25μmol/L DDP、8μmol/L Nutlin-3及100μmol/L Kevetrin处理组A549肺癌细胞p21 mRNA表达上调,差异均有统计学意义(均P<0.05);蛋白水平上,DDP、Nutlin-3a及Kevetrin作用肺癌细胞,其p53、p21蛋白表达上调,Kevetrin处理A549细胞p53蛋白表达变化不明显。结论DDP、Nutlin-3a和Kevetrin 3种抗肿瘤药物不仅能够抑制肺癌细胞增殖,而且能够诱导肺癌细胞衰老。

浸润性肺腺癌淋巴结转移情况及相关危险因素分析

目的分析浸润性肺腺癌(IAC)发生淋巴结转移的情况并探讨相关危险因素。方法选取2010年1月至2019年12月在舟山医院经手术病理证实的单发IAC患者540例,收集所有患者性别、年龄、吸烟史、肺癌家族史、癌胚抗原(CEA)水平、细胞增殖核抗原(Ki-67)表达水平、p53表达水平、肿瘤生长部位、肿瘤最大径、病理亚型、胸膜侵犯、脉管癌栓、累及支气管等信息。采用多因素logistic回归分析IAC患者发生淋巴结转移的独立危险因素。结果多因素logistic回归分析显示CEA>5 ng/ml、Ki-67阳性、胸膜侵犯、脉管癌栓均是淋巴结发生转移的独立危险因素(均P<0.05)。病理亚型中相对于附壁型,实性型、微乳头型是淋巴结发生转移的独立危险因素(P<0.05)。结论CEA>5 ng/ml、Ki-67阳性、病理亚型(相对于附壁型,实性型、微乳头型)、胸膜侵犯、脉管癌栓均为浸润性肺腺癌淋巴结转移的危险因素,对IAC发生淋巴结转移具有一定的预测作用。

血清分泌型丝氨酸蛋白酶抑制剂Kazal 1型对浸润性肺腺癌的诊断价值

目的探讨血清分泌型丝氨酸蛋白酶抑制剂Kazal 1型(SPINK1)对浸润性肺腺癌的诊断价值。方法收集2014年1月至2019年12月在浙江大学舟山医院就诊的153例肺腺癌患者和28例健康志愿者,采用ELISA法分别检测两组受试者血清SPINK1浓度,荧光定量PCR法和免疫组织化学染色法检测肺腺癌患者的癌组织与癌旁组织SPINK1 mRNA表达水平和蛋白表达情况。分析肺腺癌患者血清与癌组织SPINK1表达水平的相关性、血清SPINK1与肺腺癌患者临床病理特征的关系。结果浸润性肺腺癌患者血清SPINK1浓度明显高于健康志愿者和浸润性腺癌患者,差异均有统计学意义(均P<0.05)。血清SPINK1浓度与癌组织SPINK1 mRNA表达水平呈正相关(r=0.277,P=0.014)。血清SPINK1低浓度患者主要分布于SPINK1蛋白低表达组,而血清SPINK1高浓度患者主要分布于SPINK1蛋白高表达组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。血清SPINK1低浓度与高浓度患者在性别、年龄、吸烟史、淋巴结转和胸膜侵犯间比较差异均无统计学意义(均P>0.05),而在病理类型、肿瘤大小以及TNM分期间比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。单因素及多因素分析显示,血清SPINK1浓度(OR=1.967,95%CI:1.116~4.116,P=0.033)、癌胚抗原(CEA)(OR=2.189,95%CI:1.211~5.516,P=0.025)和肿瘤大小(OR=2.121,95%CI:1.200~5.226,P=0.034)是浸润性肺腺癌独立预测因素。血清SPINK1浓度绘制ROC曲线,AUC为0.83,最佳截断值为1288.5729 pg/ml,灵敏度为0.743,特异度为0.827。结论肺腺癌患者血清SPINK1浓度升高可以反映癌组织SPINK1表达水平,对浸润性肺腺癌具有潜在的诊断价值。

三维重建技术在肺腺癌新分类标准诊断中的价值

目的探讨三维重建技术对肺腺癌新分类标准在术前外科诊断中的应用价值,助力于开发人工智能在肺癌辅助诊疗方面的深度学习模型系统。方法回顾性分析2018年10月至2020年6月我院收治的173例经手术病理证实且肿瘤直径≤2 cm肺磨玻璃结节患者的临床资料,其中男55例、女118例,中位年龄61(28~82)岁。同一患者不同部位肺结节视为独立事件,共纳入181例研究对象。按照病理类型新分类标准,将其分为浸润前病变[不典型腺瘤样增生(AAH)和原位腺癌(AIS)]、微浸润腺癌(MIA)及浸润性腺癌(IAC),利用多平面重建(multiplanar reconstruction,MPR)和容积重建(volume reconstruction,VR)等技术,分析研究三维重建相关参数与肺腺癌不同病理亚型之间的关系及其诊断价值。结果肺腺癌不同病理类型肺结节的直径(P<0.001)、平均CT值(P<0.001)、实性成分比值(P<0.001)、结节类型(P<0.001)、结节形态(P<0.001)、胸膜凹陷征(P<0.001)、空气支气管征(P=0.010)、结节内有无血管出入(P=0.005)、TNM分期(P<0.001)差异均有统计学意义,而结节生长部位差异无统计学意义(P=0.054)。同时还发现随着肺腺癌不同病理亚型侵袭性增加,各组参数显性征象比例也逐渐升高。多因素logistic回归分析结果显示,结节直径和平均CT值或实性成分比值是浸润前病变进展为IAC的独立危险因素。结论三维重建下肺小结节各种影像征象,包括结节直径、平均CT值、实性成分比值、形态、类型、血管出入情况、空气支气管征、胸膜凹陷征对肺腺癌新分类标准的诊断具有重要价值,在临床能够为患者个性化治疗提供指导。