人参果多糖的分级分离纯化及组成成分

以人参果为原料,采用水提醇沉法提取人参果水溶性总多糖(the total water-soluble polysaccharide of ginseng fruit,WPGF),并以超滤-纤维素柱层析-凝胶柱层析三级分离模式,对人参果水溶性总多糖WPGF进行全面系统的分级分离纯化,得到人参果多糖一级级分(the high-polymer polysaccharide of ginseng fruit,WPGFH)1个、二级级分4个(WPGFH-0、WPGFH-0.04、WPGFH-0.08、WPGFH-0.12)、三级级分1个(WPGFH-0.08-1)。采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生化高效液相色谱法(high performance liquid chromatography for pre-column derivatization of 1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone,PMPA-HPLC)和高效凝胶渗透色谱法(high performance gel permeation chromatography,HPGPC)初步分析人参果多糖4个二级级分和1个三级级分的单糖组成、分子质量均一性、分子质量范围,结果表明5个级分均主要含有葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖和鼠李糖及少量甘露糖,WPGFH-0和WPGFH-0.04不含糖醛酸,而其他级分含半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸。结合红外光谱分析(Fourier transform infrared spectroscopic investigation,IR)对WPGFH-0.08-1级分进行了结构分析,初步推断其为阿拉伯半乳聚糖型果胶。为人参果多糖的研发提供参考及试验基础。

白牛肝菌、白松露、松茸中多糖和氨基酸含量对比

以白牛肝菌、白松露、松茸烘干片为研究对象,分别采用苯酚-硫酸法和异硫氰酸苯酯衍生化法对其多糖、氨基酸的含量及氨基酸种类进行了测定和对比分析。结果表明白牛肝菌、白松露、松茸烘干片中多糖含量分别为质量分数3.739%、2.739%、4.378%,总氨基酸质量比含量分别为124.83、88.76、33.29 mg/g。三者均含有赖氨酸(Lys)等17种游离氨基酸,但同一种氨基酸在三者中的含量差异较大。提示3种不同品种的珍稀食用菌中多糖和氨基酸含量具有一定的差异,但总体而言其多糖含量均较高,且氨基酸种类齐全、含量丰富。

基于网络药理学、分子对接和实验验证的补骨脂效应成分及其抗骨质疏松作用机制探讨

目的:基于网络药理学、分子对接技术探讨补骨脂效应成分抗骨质疏松的作用机制,并进行实验验证。方法:采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱飞行时间质谱法表征补骨脂水提取物的化学成分,结合SymMap、Herb、TCM-ID、GEO数据库,STRING平台和Cytoscape软件,筛选了补骨脂抗骨质疏松(OP)的核心药效成分与重要靶点,并进行基因本体(GO)功能富集和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析;利用AutoDock软件对核心药效成分与重要靶点进行分子对接验证,通过体外细胞实验进行了初步验证。结果:共筛选得到补骨脂效应成分31个、重要靶点256个,其中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARG)为核心靶点。GO分析和KEGG信号通路分析分别筛选出符合条件的417个生物过程和123条信号通路,其中有8条核心靶点参与的通路。采用分子对接实验和体外细胞实验对其中腺嘌呤核苷一磷酸激活的蛋白激酶(AMPK)关键信号通路进行验证。分子对接结果显示,补骨脂治疗OP的主要活性成分补骨脂甲素、甲基补骨脂黄酮与蛋白质-蛋白质相互作用网络筛选出的核心靶点蛋白PPARG结合活性较好;细胞实验表明,2个成分可以促进成骨细胞的增殖和分化,对部分AMPK通路相关基因有上调的作用。结论:应用网络药理学和生物信息学方法,结合分子对接和细胞实验,可揭示补骨脂有效成分通过AMPK信号通路治疗OP的潜在作用机制,为补骨脂的药效物质基础研究提供了新思路。

基于蛋白组学探讨糖皮质激素性骨质疏松发病机制

目的:基于Label-free非标全蛋白组学方法探讨糖皮质激素性骨质疏松(glucocorticoid-induced osteoporosis,GIOP)的发病机制。方法:将12只SPF级SD雌性大鼠随机分为空白对照组和GIOP组。适应性饲养1周后,GIOP组按2.5 mg/kg体重于左右大腿内侧交替注射地塞米松,空白对照组注射等量的生理盐水,每周2次。造模8周末,取各组大鼠的胫骨进行病理切片,以确定造模成功。每组选取3个样本进行蛋白质组学检测,在质控后通过蛋白质的定性定量分析筛选差异蛋白,并通过生物信息学手段针对差异蛋白进行聚类分析,利用基因本体论(gene ontology,GO)、KEGG(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)等功能富集分析手段,以阐明糖皮质激素(glucocorticoids,GCs)诱发的GIOP的潜在病理机制。结果:与空白对照组比较.GIOP组大鼠骨小梁排列紊乱,分布不均且伴有断裂现象,骨空腔间隙增加,具有显著差异,证明造模成功。蛋白组学检测共鉴定47个差异表达蛋白,其中20个蛋白上调,27个蛋白下调。蛋白核磷蛋白1(nucleophosmin 1,NPM1)、脂肪细胞膜关联蛋白(adipocyte plasma membrane associated protein,APMAP)、抗酒石酸酸性磷酸酶5(tartrate-resistant acid phosphatase,ACP5)、细胞色素c氧化酶6A(cytochromec oxidase subunit6A1,COX6A1)等蛋白表达具有显著差异。KEGG结果显示,差异表达蛋白富集在代谢相关通路、免疫炎症相关通路及腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated kinase,AMPK)信号通路上。结论:NPM1、APMAP、COX6A1、ACP5等蛋白与GIOP的发病机制密切相关,可作为GIOP的潜在生物标志物。AMPK信号通路在GIOP的发生发展中起重要作用,为治疗GIOP的潜在信号通路。

银翘散抗流感病毒有效部位群化学成分的分离与鉴定

目的 :对银翘散抗流感病毒作用的物质基础进行研究。方法 :运用色谱技术进行分离 ,波谱等方法鉴定化合物的结构。结果 :从银翘散抗流感病毒有效部位群中分离得到 11种成分 ,鉴定为牛蒡子苷 (Ⅰ )、连翘苷(Ⅱ )、连翘酯苷 (Ⅲ )、甘草苷 (Ⅳ )、甘草素 (Ⅴ )、染料木素 (Ⅵ )、芒柄花素 (Ⅶ )、大豆素 (Ⅷ )、6 甲氧基大豆素 (Ⅸ )、3,3′ ,4 三甲氧基鞣花酸 (Ⅹ )和绿原酸 (Ⅺ )。结论 :染料木素、大豆素、6 甲氧基大豆素和 3,3′,4 三甲氧基鞣花酸为首次从银翘散群药中获得。

我国药用金银花资源、化学成分及药理研究进展

目的；介绍药用金银花的植物资源、化学成分及药理作用近十年的研究进展。方法：查阅国内研究资料并进行汇总、综述。结果：金银花可供药用的品种有４７ 种；已发现的化学成分主要有黄酮类、三萜类及有机酸等，且还富含挥发油；药理研究表明金银花具有抑菌、抗病毒、解热、抗炎、保肝、止血、抗氧化及免疫调节等作用。结论：应加强金银花有效成分及其构效关系研究，充分开发利用其药用植物资源。

银翘散抗流感病毒有效部位群中黄酮类成分研究

目的 :对银翘散抗流感病毒作用的物质基础进行研究。方法 :色谱技术进行分离 ,波谱等方法鉴定结构。结果 :从银翘散抗流感病毒有效部位群中分离得到 6种黄酮类成分 ,为醉鱼草苷、金合欢素、橙皮苷、异甘草素、异甘草苷和金丝桃苷。结论

RP-HPLC测定银翘散抗流感病毒有效部位群中牛蒡子苷的含量

目的 采用RP HPLC对银翘散抗流感病毒有效部位群中活性成分牛蒡子苷的含量进行测定。方法 选用YWGC18色谱柱 ( 2 5 0mm× 4.6mm ,10 μm) ,乙腈 水 ( 2 5∶75 )为流动相 ,紫外检测波长为 2 78nm ,室温下对牛蒡子苷进行含量测定。 结果 进样量在 0 .2 2～ 1.10 μg范围内 ,牛蒡子苷与其峰面积呈良好的线性关系 (r =0 .9998,n =5 ) ,平均加样回收率为10 0 .0 1% ;RSD为 0 .80 %。结论 本法简便、准确、快速 ;

高效液相色谱法测定感冒一小时胶囊中异欧前胡素和蛇床子素的含量

目的 :采用反相高效液相色谱法对感冒一小时胶囊中羌活、独活的指标成分异欧前胡素、蛇床子素同时测定。方法 :采用HypersilC18柱 ,流动相为乙腈 水 (4 2 5∶5 7 5 ) ,检测波长 32 0nm。结果 :线性范围异欧前胡素 0～0 3975 μg,蛇床子素 0～ 0 382 5 μg ,相关系数异欧前胡素 0 9999,蛇床子素 0 9997,平均回收率异欧前胡素98 1% ,蛇床子素 99 8%。结论 :方法简便、准确、灵敏可靠 ,适用于制剂及药材中异欧前胡素和蛇床子素的分析测定。

软枣猕猴桃叶化学成分的研究

从软枣猕猴桃叶中分离得到4种结晶成分,经理化常数和光谱分析证明熊果酸,齐墩果酸,琥珀酸和胡萝卜甙。

银翘散抗流感病毒有效部位群中的黄酮二糖苷

目的 对银翘散抗流感病毒作用的物质基础进行研究。方法 运用色谱技术进行分离 ,波谱等方法鉴定化合物的结构。结果 从银翘散抗流感病毒有效部位群中分离得到 4种黄酮二糖苷成分 ,鉴定为异甘草素 -2′-O-芹糖(1→ 2 ) -葡萄糖苷 ( )、异甘草素 -4′-O-芹糖 (1→ 2 ) -葡萄糖苷 ( )、异甘草素 -4 -O-芹糖 (1→ 2 ) -葡萄糖苷 ( )、甘草素 -4′-O-芹糖 (1→ 2 ) -葡萄糖苷 ( )。结论 异甘草素 -2′-O-芹糖 (1→ 2 )

糖尿乐颗粒中人参皂苷Rg1、Re和Rb1的HPLC测定

目的:建立同时测定糖尿乐颗粒(天花粉、山药、红参、知母、黄芪等)中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1含量的方法。方法:采用HPLC法实现对人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的含量测定,以DiamonsilC18(4.6mm×250mm;5μm)色谱柱为分析柱,以乙腈-0.05磷酸为流动相;检测波长为203nm。结果:在本色谱条件下,人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1之间有较好的分离度,3种成分的浓度和各自的峰面积之间有良好的线性关系,精密度、稳定性、重现性及加样回收率的相对标准偏差均小于3。结论:本方法可同时测定糖尿乐颗粒中的人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1,可作为糖尿乐颗粒的质量控制手段。

银翘散抗流感病毒有效部位各组分变化及归属分析

为深入研究银翘散抗流感病毒有效部位的物质组成及其归属,本文利用HPLC及LC-MS/MS提供的色谱及离子碎片信息,对相同实验条件下提取的银翘散抗流感病毒有效部位及其组方各单味药的色谱指纹图谱流出组分进行对比分析,实现了银翘散与其单味药中各组分的归属分析。采用HPLC及LC-MS/MS方法,负离子扫描获得质谱数据。根据保留时间比对、阴性验证、离子碎片解析、添加对照品指认等方法,归属色谱峰来源,并对主要色谱峰进行指认。结果对银翘散抗流感病毒有效部位色谱指纹图谱中的30个共有色谱峰,归属了其中的29个峰。对其中14个主要色谱峰进行了确定,分别为绿原酸、甘草苷、甘草素-4′-O-芹糖(1→2)葡糖苷、连翘酯苷、芦丁、4,5-二咖啡酰基奎宁酸、3,5-二咖啡酰基奎宁酸、异甘草素-4-O-芹糖(1→2)葡糖苷、3,4-二咖啡酰基奎宁酸、异甘草素-2′-O-芹糖(1→2)葡糖苷、牛蒡子苷、醉鱼草苷、染料木素和异甘草素。银翘散抗流感病毒有效部位与组方各单味药有较好的相关性,建立的方法所测得的色谱指纹图谱特征性和专属性较强,可对中药复方及组成该复方的单味药成分的色谱指纹图谱进行快速比较分析,并为复方物质基础的阐明奠定了基础。

反相高效液相色谱法测定银翘散抗流感病毒有效部位群中醉鱼草苷的含量

目的 :建立反相高效液相色谱法测定银翘散抗流感病毒有效部位群中醉鱼草苷含量的方法。方法 :选用YWG C18色谱柱 (4 .6mmid× 2 5 0mm ,10 μm) ,乙腈 3%醋酸水溶液 (2 5∶75 )为流动相 ,紫外检测波长为 32 6nm ,室温下对醉鱼草苷进行含量测定。结果 :醉鱼草苷进样量在 0 .2 5～ 0 .84μg与其峰面积积分值呈良好的线性关系 ,r =0 .9997(n =5 ) ,平均加样回收率为 99.3% ,RSD为 1.82 %。结论 :本法简便、准确、快速 ;可作为银翘散抗流感病毒有效部位群的质量控制方法。

感冒一小时胶囊中黄芩苷及盐酸小檗碱的HPLC测定

目的:建立高效液相色谱法对感冒一小时胶囊(羌活、独活、粉葛、黄芩、黄莲等)中黄芩苷和盐酸小檗碱测定方法。方法:用Hypersil C18(4.6mm×150mm,5μm)为色谱柱;分别以乙腈-0.05mol/L磷酸水溶液(25∶75)和乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲液(含0.5%三乙胺,磷酸调pH3.0)(24∶76)为流动相,检测波长分别为276nm和346nm。结果:黄芩苷线性范围0.176μg^0.880μg,相关系数为0.9998,盐酸小檗碱线性范围0.148μg^0.845μg,相关系数为0.9995;平均回收率黄芩苷99.30%(RSD=1.56%),盐酸小檗碱98.84%(RSD=2.41%)。结论:方法简便、准确、灵敏可靠,为感冒一小时胶囊的质量控制提供了依据。

感冒一小时胶囊中总香豆素、总黄酮、总生物碱三类成分的指纹图谱研究

目的:建立感冒一小时胶囊(羌活、独活、粉葛、黄芩、黄连等)中总香豆素、总黄酮和总生物碱的特征指纹图谱。方法:运用HPLC-DAD方法,色谱柱为Hypersil C18(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相A为乙腈,分离香豆素类成分时流动相B为水,分离黄酮类成分时流动相B为0.1%磷酸水溶液,分离生物碱类成分时流动相B为0.05 mol/L磷酸二氢钾缓冲液(含0.3%三乙胺,磷酸调pH 3.0),梯度洗脱;检测波长分别为318 nm、277 nm和347 nm。结果:香豆素类成分特征指纹图谱中含有38个共有峰,主要成分为蛇床子素和异欧前胡素,约占总峰面积的30%,其中蛇床子素为18%,异欧前胡素为12%;黄酮类成分特征指纹图谱中含有17个共有峰,主要成分为黄芩苷,约占总峰面积的37%;生物碱类成分特征指纹图谱中含有26个共有峰,主要成分为盐酸小檗碱,约占总峰面积的46%。结论:建立的三类成分色谱指纹图谱特征性和专属性较强,可用于感冒一小时胶囊的质量控制。

HPLC法测定苁黄补肾胶囊中麦角甾苷的含量

目的建立苁黄补肾胶囊中麦角甾苷的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Hypersil ODS2柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-甲醇-1%冰醋酸(13∶9∶78),流速1.0mL/min,柱温40℃,进样量为10μL,检测波长为334nm。结果麦角甾苷在0.1085μg～0.6507μg范围内与其峰面积呈良好的线性关系,r=0.9991,平均回收率为98.42%,RSD=1.89%(n=5)。结论该方法测定苁黄补肾胶囊中麦角甾苷的含量简便、快速、可行,可用于苁黄补肾胶囊的质量控制。

愈伤灵胶囊中人参皂苷Rg_1和Rb_1的HPLC-ELSD法测定

目的建立愈伤灵胶囊中人参皂苷Rg1和Rb1的含量测定方法。方法采用HPLC—ELSD法，色谱柱为Hypersil ODS2（4．6mm×250mm，5μm）；流动相为乙腈-水梯度洗脱；蒸发光散射（ELSD）参数：漂移管温度为110℃，气体流量为3．02～3．05SLPM。结果人参皂苷Rg1在2．272～11．360μg范围内线性关系良好，r=0．9991；人参皂苷Rb1在2．232～11．160μg范围内线性关系良好，r=0．9994；两者的平均回收率分别为96．6％，98．6％；RSD分别为1．7％，2．3％。结论该法简便、准确、可靠，可用于愈伤灵胶囊的质量控制。

软枣猕猴桃三萜化合物的分离与鉴定

软枣猕猴桃Actinidia arguta (Sieb.etZucc.)Planch.ex Miq.系猕猴桃科猕猴桃属多年生藤本植物,具有健胃、清热、利湿、催乳、止血等功效,可治消化不良、呕吐、腹泻、黄疸、风湿关节痛等疾病,民间亦有治疗癌症的报道。近几年又有抗衰老和抗肿瘤方面的研究。其化学成分迄今尚少报道。为了寻找该植物的活性成分以及对植物资源的合理利用,我们对该植物叶的化学成分进行了研究,初步分得2种三萜类化合物,经理化常数及光谱测定,证明化合物Ⅰ为3β-羟基-12-烯-28-乌苏酸(3β-hydroxyurs-12-en-28-oic acid),化合物Ⅱ为3β,24-二羟基-12-烯28-乌苏酸(3β,24-dihydroxyrus-12-en-28-oic acid),均为首次从该植物中分得,化学结构式见图。

药用土鳖虫的化学成分及药理作用

综述有关土鳖虫的化学成分和药理作用。表明土鳖虫在防治心脑血管性疾病等方面具有较大的药用价值，值得进一步深入研究和开发。