乙型肝炎病毒感染时的骨髓造血干细胞

目的研究乙型肝炎患者骨髓造血干细胞中HBV的感染、复制及对造血干细胞增殖的影响。方法收集乙型肝炎患者9例,健康者7例骨髓液,磁珠分离仪分离纯化骨髓液CD34+细胞,取部分干细胞进行免疫组化和原位杂交,以感染HBV的干细胞(2.2.15细胞)为阳性对照,并设健康人骨髓干细胞为阴性对照。余两组干细胞分别分为两组,一组在含有干细胞生长因子(SCF)、酪氨酸激酶受体家族Ⅲ的配体(FLT3)、促血小板生成素(TPO)、白介素-3(IL-3)和10%FBS的IMDM培养基中孵育,另一组在无细胞因子的同样培养基中孵育。第0、1、6、12d进行PCR病毒载量检测并做细胞计数。结果患者组骨髓干细胞经免疫组化染色后为变为棕黄色与阳性对照组一致,经原位杂交后细胞染色为蓝紫色与阳性对照组一致,而阴性对照组均未染色。对患者组骨髓干细胞加细胞因子和无细胞因子第1、6、12d细胞计数分别比较,均明显少于正常对照组(t=0.818,P<0.05;t=3.599,P<0.05;t=2.967,P<0.05)。加细胞因子患者组第6、12d细胞内病毒载量明显高于不加细胞因子患者组(t=3.36,P<0.05;t=5.71,P<0.01)。结论 HBV可以感染骨髓造血干细胞并且可随干细胞的增殖不断复制。感染了HBV的干细胞增殖能力减弱。

乙型肝炎病毒感染对造血干细胞活性的影响

目的了解HBV感染对脐血来源的造血干细胞活性的影响。方法将分离纯化的健康脐血CD34^＋细胞，在含有干细胞生长因子（SCF）、酪氨酸激酶受体家族Ⅲ配体（FL）、促血小板生成素（TPO）、IL-3和10％FBS的IMDM培养基中扩增，同时加入高拷贝HBV，观察干细胞扩增与病毒复制规律；干细胞扩增后，在巨细胞集落刺激因子（GM-CSF）和IL-4作用下诱生树突状细胞，对干细胞及树突细胞进行形态学观察，并检测其表面分子的表达。两组间比较采用独立t检验，多组间比较采用方差分析。结果感染HBV的造血干细胞自然增殖能力明显低于正常干细胞（P〈0．01）；加入细胞因子后细胞增殖增加（P〈0．01），细胞内HBVDNA复制也增加（P〈0．01），但其干细胞增殖仍低于正常干细胞加细胞因子组（P〈0．05）。电子显微镜观察发现HBV感染干细胞后胞质内出现Dane颗粒；HBV感染的干细胞经诱导为树突状细胞后，其免疫表型CD80、CD86、CD1a、HLA-DR的表达均低于未感染组（P〈0．01）。结论HBV可以感染CD34^＋造血干细胞，并随干细胞增殖而复制增加，HBV不仅抑制造血干细胞增殖，而且下调干细胞分化来源的树突状细胞免疫表型的表达。

乙型肝炎患者骨髓造血干细胞来源的树突状细胞表型分析

目的 检测乙型肝炎患者骨髓造血干细胞（HSC）诱导的树突状细胞（DC）的表面分子的表达,评价其相关因素及临床意义.方法 收集慢性乙型肝炎患者的骨髓液9例,健康者7例后用磁珠分离仪分离纯化骨髓液CD34＋细胞,在含有干细胞生长因子（SCF）、酪氨酸激酶受体家族Ⅲ的配体（FLT3）、促血小板生成素（TPO）、IL-3和10%FBS的IMDM培养基中孵育并进行扩增,在干细胞扩增基础上,在GM-CSF和IL-4作用下诱生DC,通过流式细胞仪分析其表面分子的表达并对DC进行形态学观察.结果 乙型肝炎患者HSC经诱导为DC后,其免疫表型CD80、CD86、CD1a的表达均低于正常对照组,差异有统计学意义：CD1a（t=3.94,P＜0.05）,CD80（t=7.08,P＜0.01）,CD86（t=3.65,P＜0.05）,而HLA-DR表达与正常组比较差异无统计学意义（t=0.34,P＞0.05）.结论 慢性乙型肝炎患者HSC来源的部分DC的表面分子表达低下可能与HBV感染HSC后出现病态的免疫细胞分化有关.

造血干细胞与慢性乙型肝炎

慢性乙型肝炎的发病机制与免疫系统低反应状态或免疫耐受有关，机体的免疫反应决定了疾病的发生、发展与转归。机体启动免疫反应的第一步是由抗原提呈细胞捕获抗原并将信息传递给T、B淋巴细胞来完成的。树突细胞是体内提呈功能最强的抗原提呈细胞，因此树突细胞的功能直接影响免疫应答的效果。造血干细胞是树突状细胞的主要来源，因此造血干细胞在产生免疫细胞以及参与免疫调节中起到重要作用。研究造血干细胞对慢性乙型肝炎的免疫重建产生的影响可为慢性乙型肝炎的治疗提供新的思路。

肝内胆管细胞癌与肝细胞癌miRNA相关级联调控网络及通路研究

目的:分析肝内胆管细胞癌(ICC)与肝细胞癌(HCC)患者肝组织小非编码RNA(MicroRNAs,miRNA)、转录因子(Transcription factor,TF)和信使RNA(messenger,mRNA)的级联调控网络,探讨关键miRNA和TF相关的级联调控网络以及调控通路的作用。方法:下载GEO(GSE57555)miRNA/mRNA表达谱芯片数据,通过生物信息数据分析方法获得肝细胞癌患者和癌旁组织显著差异的miRNA、mRNA表达谱,并依据现今已知的实验证实的miRNA、TF和靶基因间的调控关系构建级联调控背景网络。通过ICC和HCC各自差异表达的miRNA和mRNA挖掘出疾病特异的级联调控网络。继而分析级联调控网络中的mRNA参与的GO、KEGG以及挖掘网络中重要的级联调控通路识别通路内的关键调控元件。结果:构建的ICC级联调控网络内的度最大的节点主要为miRNA(has-miR-200b-3p、hsa-miR-155-5p),而HCC级联调控网络内度最大的节点为TF,而且网路中包含关键的已知疾病相关基因TP53、CTNNB1,无论是miRNA还是TF都是和相应疾病密切相关的。ICC和HCC级联调控网络中的mRNA主要参与的GO功能有RNA聚合酶Ⅱ的调控、表达调控、凋亡过程调控等;KEGG信号通路主要有癌症相关miRNA通路、乙型肝炎通路、癌症通路等。共挖掘出12条疾病特异的级联调控通路,识别出ICC相关通路内关键的调控因子为MYC、hsa-miR-320b,HCC相关通路内的关键调控因子为has-miR-200b-3p、HMGA1。结论:TP53、MYC、HMGA1、has-miR-200b-3p、hsa-miR-155-5p和hsa-miR-124-3p为ICC和HCC级联调控网络内的核心调控元件,在ICC和HCC相关的肝细胞癌发生、发展中具有关键作用,有望为未来的ICC和HCC相关研究提供新思路和新方向。

流行性感冒大流行的变迁

人们开始真正认识到流行性感冒(简称流感)给人类健康造成的巨大危害始于1918年的西班牙流感大流行。然而,在科技和经济飞速发展的今天,尽管流感的防治措施较百年前有了质的飞跃,其发病率及死亡率依然维持在一定水平,并造成严重的社会负担。此文对流感病毒的致病性、危害及防治措施的变迁进行回顾和总结。